Защита утеплителя от мышей: Страница не найдена – Блог о строительстве

Содержание

как защитить постройку от вредителей

Грызуны появляются в доме независимо от того, из какого материала он построен. Кирпичные, бетонные или деревянные стены одинаково не защищают здание от проникновения маленькой серой мышки или вредителя покрупнее. Они способны пробраться в узкую щель между конструкциями, через прорытые в земле ходы, забежать в неприкрытую дверь, проползти по трубам коммуникаций. Тепло и доступная пища привлекают животных в жилье особенно в конце осени. Почувствовав приближение холодов, они ищут надежное пристанище для зимовки. Наиболее эффективный способ не пустить вредителей в жилище — физические барьеры. Металлическая сетка от грызунов создаст преграду и предотвратит присутствие нежелательных гостей в каркасном доме.

Компания «Сетка МСК» реализует оцинкованную сетку для защиты от мышей и крыс. Никаких «прутков», «струн» и мест соединений, сплошной лист!

Сетка ОЦ 6х6 по 149р.

/кв.м., размер рулона 1х10м, сетка ОЦ 10х10 по 107р./кв.м., размер рулона 1х15м.

Склад-магазин находится по адресу: г. Москва, ул. Ремизова д.14к1 (м. Нагорная) Есть доставка и самовывоз! Забираем неизрасходованные излишки!

Телефон: +7 (499) 406-14-49
Сайт: https://setkamsk.ru

Куда стремятся мыши

Каркасный дом из-за особенностей постройки – привлекательное место для пребывания грызуна. Деревянную или реже металлическую раму из стоек, опорных балок, подкосов обшивают с наружной и внутренней стороны защитными и отделочными материалами. Внутрь полых стен укладывают плитный утеплитель. Полы часто устраивают по лагам, между которыми располагают теплоизоляцию в виде рулонов или плит.

Технология предполагает устройство вентиляционных зазоров для удаления конденсата и циркуляции воздуха в конструкциях. Это уберегает их от гниения, накопления влаги.

Одновременно все щели и технологические зазоры – доступный путь проникновения мышей. Излюбленное место обитания – плиты утеплителя. Грызуны прокладывают в них ходы, устраивают гнезда, выводят многочисленное потомство.

Мышиная возня раздражает, но помимо этого утеплителю наносится немалый вред. Структура со временем разрыхляется и распадается, что приводит к потере теплоизолирующих свойств.

Исследования, проведенные в США в университете рыбоводства, лесоведения и дикой природы, установили, что за полгода деятельности грызунов теплопроводность утеплителя увеличивается в 5 раз.

В эксперименте участвовали семейства домовых мышей. Их подсаживали на 6 месяцев в имитации стен, утепленных распространенными видами изоляторов для каркасных, кирпичных и бетонных домов – экструдированным пенополистролом, базальтовой или стеклянной ватой, вермикулитом, целлюлозной эковатой. Не остановили острые зубы фольгированные паробарьеры и изоцианат.

Опасно соседство с мышами для электрической проводки. Нарушение изоляции от острых зубов грызунов может привести к короткому замыканию и даже пожару.

Деревянные конструкции – элементы каркаса, полов, перекрытий – основательно повреждаются серыми животными. Это нежелательные явления, приводящие к постепенной утрате прочности, нарушению эстетического вида отделки.

Грозные враги

Домовые мыши – самая многочисленная популяция млекопитающих. Они достигают длины 9,5 см и веса 30 г. Благодаря свойству синантропии – сосуществования с человеком – прекрасно приспособлены к его образу жизни и жилью. Обитают везде, кроме районов Крайнего Севера и Антарктиды.

Маленькая мышка может пробежать 5 км в поисках подходящего жилья. Особенно она активна в конце лета и осенью, так как очень не любит холодов. Роет в земле норы на глубину до 60 см. Передвигается по постоянным маршрутам, оставляет тропинки из пыли и помета, скрепляя их мочой. Ее специфический запах выдает существование грызуна в помещении.

Селятся мыши семействами, где на одного доминантного самца приходится несколько самок. Индивидуальный ареал вокруг гнезда составляет 900-1200 м². Пределы участка грызуны стараются не покидать.

Домовые мыши быстро бегают, хорошо лазают, прыгают, плавают.

Размножаются круглый год. Одна самка способна принести до 120 детенышей за год.

Многовековое соседство мыши и человека – неоспоримый факт. Но то, что 80 % генома грызуна совпадает с человеческим, до сих пор остается загадкой. Эта особенность применяется в науке для исследования заболеваний и методов их лечения. Фонд Мафусаила, занимающийся проблемой старения, в 2005 году присудил премию за пятилетний рекорд долголетия лабораторной мыши. В новосибирском Академгородке ей поставлен памятник.

Ближайшие «соратники» домовой мыши – серые и черные синантропные крысы. Образ жизни их сходен с мышиным, но наносимый хозяйству вред больше во много раз. Грызуны без всякого вреда собственному здоровью повреждают свинцовые и алюминиевые трубы, кабели под напряжением, создавая аварийные ситуации в транспортных и коммуникационных сетях.

Особенность крупного грызуна – способность адаптироваться к ядам и умение мыслить абстрактно. Благодаря этому популяция вредителя постоянно растет, несмотря на активную борьбу – дератизацию.

Чем опасны грызуны

От мышей и крыс страдают не только строительные конструкции, но и запасы продуктов. Пробравшись в хранилище, животные способны быстро уничтожить или загрязнить крупы, овощи, фрукты. Не пренебрегают они ничем, даже мылом, свечами и клеем, хотя относятся к виду грызунов. В природе основу их рациона составляют семена растений.

Одежда, обувь, книги, мебель при «встрече» с мышами становятся непригодными к дальнейшему использованию.

Соседство с грызунами опасно для человека. Мыши и крысы переносят тяжелые, даже смертельные инфекции – псевдотуберкулез, чуму, лептоспироз, туляремию. Заражение наступает при контакте с испражнениями или укусе кровососущих членистоногих, обитающих на животных и легко переходящих к человеку.

Последние исследования подтвердили, что вирус, вызывающий опухоль молочных желез мышей, заразен для человека и способствует развитию рака груди.

Металлические сетки – барьер для грызунов

Чтобы встречаться с мышами и крысами на своей территории как можно реже, нужно сделать жилье недоступным для проникновения извне. Защиту каркасных домов от грызунов проводят комплексно – начиная от строительства фундамента, заканчивая истреблением вредителей при их появлении.

Чтобы мыши не проникли в дом, применяют оцинкованные металлические сетки с ячейкой до 6 мм. Такой размер обусловлен способностью черепа животного сплющиваться до минимального объема. Пластиковая защита не надежна, грызуны легко с ней расправятся.

Просечно-вытяжные сетки подходят для этой цели как нельзя лучше. Даже мелкие грызуны не смогут протиснуться сквозь маленькое отверстие. Изготавливаются из листового металла толщиной 0,45-0,50 мм прорубанием ромбовидных ячеек с последующим растягиванием. Изделие называется сокращенно ЦПВС – цельнометаллическая просечно-вытяжная сетка.

Основное применение – армирование шпаклевок и штукатурок, но в последнее время широко используется как защита каркасных домов от мышей и крыс. ЦПВС мало весит, не расползается при деформации. Она прочна, не подвержена коррозии и воздействию острых зубов грызунов.

Непосредственно к каркасу сетку крепят скобами с помощью строительного степлера или саморезами с прессшайбами. Для монтажа на теплоизоляцию используют специальные удлиненные фиксаторы.

Цена материала доступна – 70-160 руб/м². Вложения окупаются спокойным сном, сбереженными нервами и средствами.

Помимо ЦПВС используют тканые сетки с ячейкой до 6 мм и толщиной проволоки 1,2 мм. Они стоят дороже – до 250 руб/м², но более мощный металл способен остановить не только мышей, но и крыс.

Грызуны могут углубляться в землю до 50-60 см. Проникают в дом через щели в фундаменте, цоколе и полах, поэтому основная защита должна располагаться в уровне этих конструкций.

Профессионалы, построившие не один десяток каркасников, советуют, как защитить каркасный дом от грызунов с помощью сетки:

Закрепить вертикальную подземную завесу по периметру вдоль цоколя и фундамента на глубину не менее 100 см;
Уложить на черновой пол слоем, предшествующим утеплителю, чтобы мыши не смогли в него пробраться и обосноваться;
Оббить наружные углы строения до начала отделки;
Закрыть вентиляционные зазоры, дымоходы, продухи фундамента и другие технологические отверстия.

Вероятные места проникновения грызунов будут закрыты непроницаемым для них барьером. Основные требования к сетке – размер ячейки – до 6 мм и достаточная толщина слоя цинка. В более крупные отверстия мышь пролезет без труда, а низкое качество оцинковки приведет к быстрому разрушению металла основы.

Надежные способы от грызунов

Если в доме появились мыши, то можно воспользоваться традиционными методами – отравленными приманками, табачной пылью, мятой, мышеловками, или более современными — ультразвуковыми отпугивателями. Но самый эффективный способ – предотвратить проникновение вредителя путем установки защиты на этапе строительства.

Железобетонная плита

Монолитный фундамент из железобетона – прочная основа здания и непреодолимое препятствие для зубов грызунов. Проникнуть сквозь армированную плиту толщиной 25-30 см мышам и крысам не удастся. Остальные пути можно защитить мелкоячеистой сеткой.

Керамзит

Черновой пол, устроенный по грунту, можно сделать непроходимым для крыс и мышей с помощью керамзита.

На подготовленное основание насыпают вспученную глину слоем 25-45 см. Сверху укладывают слой тощего бетона толщиной 3-5 см или проливают цементным раствором. Затем расстилают плотную гидроизоляционную пленку или мембрану. Завершает устройство полов стяжка, гипсоволоконные или древесностружечные плиты, финишная отделка.

Керамзит несъедобен для мышей.

Они не прокладывают в нем ходы, не устраивают гнезда. Обосноваться в утеплителе им не удастся из-за его сыпучести.

Утеплитель

При выборе теплоизолятора для каркасного дома немаловажна такая характеристика, как повреждаемость грызунами. Существуют три категории утеплителей, к которым у мышей разное отношение.

Первые они не трогают никогда. Это пеностекло в гранулах и плитах, стекловата, эковата. Материалы на основе силикатное сырья травмируют слизистые оболочки рта. Достаточно тонкой прослойки стекловаты, чтобы остановить грызуна. Бура и борная кислота, которыми обрабатывают целлюлозу, для них токсичны. Поэтому стены каркасных домов можно без страха утеплять этими теплоизоляторами.

Вторая категория неохотно повреждается мышами. Это базальтовая вата, экструдированный пенополистирол, жидкий расширяющийся пенополиуретан. Материалы несъедобны для животных-вредителей, но проницаемы. Они прокладывают сквозь них ходы, используют волокна для устройства гнезд.

Третий вид утеплителей – самый любимый и обживаемый грызунами. Сюда относятся пенопласт и пенополистирол. В легких теплых материалах серые вредители устраивают обширные лабиринты и гнезда, в которых выводят многочисленных детенышей.

Чтобы в каркасном доме не поселились непрошенные жильцы, для утепления выбирают качественные материалы высокой плотности.

Чем они жестче, тем меньше привлекают грызунов.

Металлические отбойники

Используются для защиты от мышей в домах на свайных или ленточных фундаментах. Представляют собой круговые отливы, установленные по периметру здания в уровне верха цоколя. Ширина их не менее 36 см.

Сплошная полоса из гладкого металла высотой 40-45 см станет препятствием для подъема грызунов по стенам.

Некоторые строители рекомендуют основу под черновой пол каркасного дома на свайном фундаменте монтировать из листов стали, например, профлиста. Это надежный способ закрыть животным доступ в жилье.

Дом без мышей

Идеальный дом без грызунов стоит на возвышении, вдали от куч мусора и сараев, где содержат домашних животных. Углы, фундамент, цоколь, технологические отверстия защищены металлической сеткой с мелкой ячейкой. Полы по грунту – на толстом слое керамзита, по лагам – по той же оцинкованной сетке. Теплоизоляция стен – плотная минеральная или вспененная эковата, закрытая от проникновения вредителей в местах вентиляционных зазоров. Чердачные перекрытия утеплены сыпучими материалами с отпугивающими мышей свойствами. Деревянные элементы каркаса обработаны смесью буры и извести.

Завершающий штрих. У порога сидит умная кошка, которая ловит мышей себе на завтрак или из спортивного интереса.

Сетка ОЦ 6х6 по 149р./кв.м., размер рулона 1х10м, сетка ОЦ 10х10 по 107р./кв.м., размер рулона 1х15м.

Телефон: +7 (499) 406-14-49
Сайт: https://setkamsk.ru

Как бороться с мышами и другими грызунами в каркасном доме

Ультразвуковые генераторы

Как же быть, если дом уже возведен, и вопреки всем предупреждающим действиям, все-таки подвергся нападению грызунов? Существует много проверенных способов устранения мышей, среди которых весьма эффективный и экологичный – это использование ультразвуковых отпугивателей. Это устройства, принцип работы которых лежит в испускании звуковых волн, не слышимых человеческим ухом. При этом грызуны отчетливо слышат неприятный звук, который вынуждает их покинуть зону воздействия прибора. Такие устройства эффективны не только против мышей – установка ультразвукового отпугивателя способна избавить участок и от более крупных грызунов – крыс, кротов и прочих вредителей.

Наличие в доме кота, а лучше нескольких, может стать профилактикой появления мелких вредителей. Всем известно, с каким удовольствием коты-охотники истребляют грызунов. Действительно, даже запах хищника отпугивает грызунов. Но это работает не всегда. Вам может попасться такой кот, который будет проживать на одной территории с мышами в полной гармонии, не причиняя им никакого вреда. Естественными врагами мелких грызунов являются ласки, горностаи. Несколько таких одомашненных животных способны довольно быстро очистить дом от мышей.

Недостатки каркасных домов

Естественно, недостатки в конструкциях каркасного типа тоже имеются. Еще на этапе проектирования надо ответственно подойти к подбору используемых материалов. Так, попытка сэкономить может привести к использованию некачественных китайских материалов, к примеру, плит OSB-3. При изготовлении таких плит в качестве связующего выступают фенолформальдегидные смолы. Если класс эмиссии формальдегида от Е2 и более, то данное вещество будет активно испаряться в воздух помещения, что несет опасность здоровью человека. Безопасными считаются материалы с нулевым классом эмиссии.

Минеральная коротковолоконная вата и базальтовая вата низкого качества – источник канцерогенной пыли. Таким образом, правильный подбор применяемых при строительстве материалов станет гарантией качественной и здоровой жизни проживаемых в каркасном доме людей.

Кроме того, каркасные дома классифицируются как деревянные. Это говорит о повышенной пожароопасности. Устранить этот недостаток можно, применяя пожаростойкие материалы: специальный гипсокартон, несгораемые панели из СМЛ, ЦСП. Балки, из которых изготавливается каркас, необходимо пропитывать пожаростойкими пропитками. Пенополистирол подбирается класса Г1 или Г2. К недостаткам следует отнести и низкую вандалостойкость таких домов. Стены каркасного дома может разрушить один человек при помощи бензопилы, чего нельзя сделать с каменными стенами. Кроме того, материалы каркаса и остальных элементов конструкции беззащитны перед атакой мелких вредителей – мышей, крыс. Этот, казалось бы, незначительный, факт может сделать жизнь человека в доме абсолютно невыносимой. Грызуны прогрызают себе норы и тоннели в материале утеплителя, уничтожают керамзит и стекловату, и могут длительное время проживать в стенах каркасного дома. Эта проблема особенно актуальна тогда, когда при возведении дома в качестве утеплителя применялся низкокачественный пенопласт.

Причины проникновения грызунов в каркасный дом

Для того, чтобы разрабатывать эффективные методы борьбы, нужно понять мотивы зверьков. Возможно, тогда бороться с ними будет легче.

Самая главная причина – поиск корма. Грызуны особо жалуют различные крупы, которые притягивают вредителей, словно бы, магнитом.

Второе – это поиск теплого места для проживания. Если вы живете в местности, где бывают довольно холодные зимы, то будьте уверены – практически со стопроцентной вероятностью у вас есть мелкие соседи.

Каркасные дома – легкодоступная мишень для грызунов. Они с удовольствием селятся внутри стен и под полом. Особенно рады они утеплителю. Последний прокладывается между гипсокартоном и стенами. Мыши устраивают себе в нем норки и живут там припеваючи.

Другие методы

Борьба человека с грызунами идет уже многие века. Люди постоянно придумывают все новые способы, которые позволят оградить дом и имущество от порчи вредителями. Так, под напольное покрытие укладывают обожженные деревянные бруски, ветки. Запах горелого дерева отпугивает мышей. Кроме того, можно использовать и другие ароматические отпугиватели – это сосна, мята, табак, добавляемые в утеплитель. По периметру дома и, по возможности, в стены насыпают красный жгучий перец. Также известно, что грызуны не терпят запах паленой шерсти. Старый метод – в старую ненужную кастрюльку кладут клочок шерсти, делают в кастрюльке несколько дырок и поджигают шерсть, затем эту емкость ставят в подвале. Запах дыма будет медленно распространяться по всему дому, выгоняя вредителей прочь.

Хоть концепция возведения каркасного дома вовсе не нова и знакома уже на протяжении веков, однако особенную известность этот метод возведения получил в последние года. Во-первых, растущая необходимость в доступном и высококачественном персональном жилище и, во-вторых, формирующиеся технологии изготовления нынешних строительных мануфактур дают возможность произвести каркасный дом на высококачественным и экологически чистым

Утеплители и грызуны есть ли решение

Давайте сразу уточним – большинство современных утеплителей для пола мыши действительно не едят, но при этом преспокойно в них живут. А в мягких еще и гнезда вьют.

Интересный факт: зубы у мышей растут на протяжении всей их жизни. Причем, если мышь не грызет постоянно что-то, то эти зубы у нее будут врастать в верхнюю челюсть. А потому грызть – это ежедневная потребность для этого животного. И точить мышь может даже бетонные стены.

Особенно часто мыши заводятся, как ни странно, именно в пенопласте. Причем они его грызут – но не с целью насытиться, а с целью построить в нем удобные гнезда. И потому производители рекомендуют утеплять стены и пол эковатой, которая более рыхлая и создает антисептическую среду. Но и ее мыши грызут, хотя и не так охотно.

Ведь как показывает практика, под полом мыши могут заводиться и в эковате, и в пенопласте, и практически любом другом утеплителе. Даже в стекловате! Правда, стоит заметить, что обычную фанеру и плиты OSB мыши прогрызть очень трудно, почти невозможно. Все из-за особенностей строения ее зубов. Как и плиты, которые имеют слоистую структуру с древесными щепами, направленными в разные стороны.

Секрет выживания этих животных в любых условиях – это их крайняя неприхотливость. Потому и грызут себе норы в чем угодно, одним словом.

Какой вред наносят грызуны

Мыши, крысы и другие грызуны при отсутствии определенных мер защиты могут легко проникнуть в каркасный дом. Этим они не только пугают хозяев, боящихся или брезгующих такими гостями, но и приносят вред. Разрушения могут постигнуть любой уголок жилища. Они перегрызают бетонные или , проводку, самые разнообразные предметы в доме. Часто вредители уничтожают запасы на зиму или другую пищу.

Если мыши поселятся в подвальных помещениях, где обычно сыро и темно, то начинают активно размножаться. В таком случае бороться с их огромным количеством еще сложнее. Самое опасное, что грызуны являются разносчиками опасных инфекционных заболеваний, например, холеры, разнообразных кишечных болезней, лептоспироза.
Поэтому необходимо как можно скорее от них избавляться, а для этого ознакомимся с методами борьбы с мышами.

Основные методы защиты каркасных домов от грызунов

Эковата
, используемая в качестве утеплителя, проложенная в половых перекрытиях нижнего этажа, защитит от появления плесени, грибка, насекомых и грызунов. Эковата, состоящая на 80% из вторичной целлюлозы и на 20% из смеси борной кислоты и буры, является прекрасным антисептиком для дерева и отпугивает насекомых и грызунов.
Раствор буры или извести
, которым можно обработать строительные блоки.
Старый способ борьбы с грызунами, которым издавна пользовались наши предки: добавление к утеплителю золы, шлака, табачной пыли, сухой мяты или полыни.
Механическая защита
: монолитная железобетонная плита, заложенная в фундамент, станет надежной преградой для грызунов. Можно воспользоваться более дешевым вариантом: мелкоячеистая металлическая сетка, уложенная в местах возможного проникновения грызунов.

Рассмотрим более подробно, как можно защитить свой дом от нашествия грызунов.

Утеплители против грызунов

Прежде всего, не стоит использовать дешевые утеплители, такие как пенопласт. Выбор его обычно обусловлен его малой стоимостью, но пенополистерол, хотя и обладает хорошими теплоизоляционными свойствами, не может стать защитой от грызунов. Лучшим вариантом, как указано выше, служит эковата. Она послужит прекрасной защитой от какой бы то ни было биологической агрессии, защитит от появления плесени, грибка, насекомых и грызунов. В то же время она совершенно безопасна для человека, ее составляющие не токсичны и не летучи, не могут с пылью попадать в органы дыхания человека. Кроме того, она имеет отличные характеристики тепло- и звукоизоляции.

Особенностью эковаты является то, что она в качестве строительного материала выпускается не в привычных рулонах или матах, а в рыхлом виде. Для ее укладки требуется специальное оборудование и некоторые профессиональные навыки. С другой стороны, способ ее укладки — задувание, позволяет не оставить щелей и пустот.

Керамзитовый пол защитит от грызунов

Керамзит утеплительный материал, получаемый из обожженной глины. Используется для быстрой засыпки, в том числе и при устройстве пола. Для того, чтобы защититься от появления грызунов, требуется слой керамзита не менее 30 см. Керамзит укладывается на почву и покрывается полиэтиленовой пленкой. Сверху укладывается два слоя ОСП-3. Ориентированно-стружечная плита в своем составе имеет пропитку из синтетического воска и борной кислоты, что должно отпугнуть грызунов. На ОСП укладывается еще один слой керамзита и черновой пол готов.

Металлическая сетка

Мелкоячеистая металлическая сетка с ячейками 5х5 мм может быть проложена по черновому полу или подбита снизу от него. Другим вариантом использования сетки может стать обертывание цоколя. Высота сетки в таком случае должна составлять не менее одного метра, укладывается сетка под обшивку цоколя. Еще один металлический способ защиты — обшивка фундамента профилированным листом.

Предотвратить появление грызунов в частном доме намного проще, чем бороться с ними, пытаясь их вывести.

Как уберечь здание от грызунов

Одна из самых серьёзных опасностей, которые подстерегают деревянные дома – нашествие грызунов.
Это касается не только брусовых и бревенчатых, но и каркасных зданий: мыши и крысы проделывают ходы в утеплителе, разрушая стену, кроме того, если не принимать меры, со временем их будет становиться всё больше. Одна мышь-полёвка может принести до 600 детёнышей за год, и такое нашествие способно принести немало неудобств жильцам.

Как защитить деревянный дом от грызунов? В борьбе с вредителями приходится использовать комплексный набор средств: это касается как конструктивных особенностей дома, так и постоянных поддерживающих мер. Можно воспользоваться следующими способами борьбы:

Правильный выбор утеплителя. Грызуны быстро разрушают пенополистирол, в некоторых случаях они могут устраивать гнёзда даже в базальтовой вате. Идеальным, хотя и дорогим решением становится эковата: она способна полностью занять все щели, и грызуны трогать её не будут.

Кроме того, она становится по-настоящему эффективным барьером для противостояния холоду. Однако укладывается она с помощью специального оборудования, и без помощи профессионалов с этой работой не справиться.

Обустройства керамзитового слоя при утеплении пола. Это один из действенных способов, как защитить деревянный дом от мышей. 10-сантиметровый слой керамзита позволит защитить подпол, и мыши не будут грызть балки пола.
Обёртывание цоколя и укладка под полом металлической сетки. Она защитит здание от проникновения грызунов и станет вполне эффективным барьером на долгое время. Однако это не должна быть единственная мера борьбы: крысы – очень умные животные, и иногда они находят способ обойти преграду.

К дополнительным мерам защиты относятся различные пропитки древесины биоцидами, раскладывание отравленной приманки, установка мышеловок и другие методы. Многим они кажутся антигуманными, но с мышами и крысами всё равно приходится бороться. Самым безопасным для вредителей методом является установка ультразвуковых отпугивателей, эти приборы безвредны для человека, и они эффективно распугивают грызунов с участка.

Использование отравленных приманок не всегда безопасно: от них могут пострадать домашние животные, оставленные без присмотра. Чтобы не случилось беды, нужно выбирать яды с очень горьким вкусом: кошка или собака такую приманку есть не станет, а мышь не обратит на вкус никакого внимания.

Защита здания от насекомых

Другая проблема, которая угрожает деревянному дому – насекомые. Жуки-древоточцы, термиты, муравьи – это лишь краткий перечень представителей отряда насекомых, которые не прочь полакомиться древесиной и натуральными утеплителями.

Как защитить деревянный дом от жуков? Самым эффективным методом до сих пор остаётся использование химических антисептиков и других веществ:

Защита от грызунов на стадии строительства

Почему именно на этой этапе? Да потому, что предупредить нашествие грызунов намного легче, чем потом бороться с ними. И мифы о том, что для желающих попасть в дом мышей преград не существует – это все-таки мифы. При творческом и внимательном подходе к этому вопросу можно вполне добиться того, чтобы в вашем доме или бане такая напасть не заводилась никогда.

Но для начала можете внимательно изучить действующие строительные нормы и правила, в которых перечислены решетки, металлические экраны и другие способы защиты. Но помните, при монтаже металлопрофиля от мышей обязательно нужно оставлять зазор – чтобы от конденсата не намокал утеплитель.

Способ #1 — керамзитовый замок

Здесь идет речь о так называемом «керамзитовом замке», когда слой керамзита укладывается особенно плотно и не менее 10 см толщины. Вот стандартный пирог пола, который защищают во время строительства дома от мышей:

1-й слой: прямо на грунт укладываем керамзит (обожженная глина). Слой должен получиться не менее 30 см. Накрываем полиэтиленовой пленкой.
2-й слой: укладываем двумя слоями плиты ОСП-3.
3-й слой: снова кладем керамзит.
4-й слой: накрываем ориентировано-стружечными плитами, пропитанными синтетическим воском и борной кислотой. Эти вещества хорошо отпугивают грызунов.

Как видите, ничего сложного.

Способ #2 — мелкоячеистая сетка

Самым простым и достаточно действенным способом механической защиты от мышей еще на стадии строительства можно назвать оцинкованную сетку. Она должна быть из прочного метала и с мелкими ячейками. Намного мельче, чем вы сейчас себе представили. Сейчас объясним, почему: череп мыши имеет свойство «складываться», как у новорожденного, и потому это животное действительно пролезет там, «где пролезет карандаш», как любят говорить биологи.

Итак, металлическую сетку желательно во время строительство проложить еще по черновому полу и дополнительно обернуть вокруг цоколя, если вы живете в частном доме. А как обустраивать с ней полы, вы можете подробнее рассмотреть на нашей фото-инструкции:

Все углы по возможности (и напольные, и стеновые, и потолочные) оббейте сеткой, которую обычно используют для штукатурки. Не пропустите ни одного стыка.

Иногда этим материалом защищаются от мышей и после строительства, когда проблема с грызунами становится очевидной. Для этого заройте ее вокруг фундамента на глубину до 80 см. Если заметите уже прорытые норы – тогда еще глубже. А под обшивку цоколя сетку кладите не менее метра в высоту.

Обшивают фундамент дома также профилированным листом в 1,5 мм, из конструкционной стали. Это – тоже неплохая дополнительная защита.

Способ #3 — оставляем мышей под полом

Если же вас устроит то, что мыши под полом в небольшом количестве все-таки будут, но в сам дом не проникнут, тогда сделайте вот такой пирог:

Шаг 1. Забудьте об утеплителе. Пол без мышей – это пол без всяких там ват и пенопласта. Просто сделайте щит – половую доску прямо по лагам.
Шаг 2. Чтобы мыши не проникли в щель между краем пола и обшивкой снаружи, нарежьте 10 сантиметровые полосы оцинковки и приколотите их сверху на пол.
Шаг 3. Закройте эти полосы сверху утеплителем и обшивкой.

Вот такие простые проверенные рецепты. Главное — не сдавайтесь!

Защита каркасного дома

Чтобы не позволить грызунам поселиться в новостройке, следует тщательно продумать, как защитить дом от мышей при строительстве. В качестве превентивных мер от вредителей можно использовать такие приемы:

В роли утеплителя пола на первом этаже рекомендуется использовать эковату. Она убережет дом от появления грибка, плесени, различных насекомых. Материал на 80% состоит из вторичной целлюлозы, а 20% – это смесь борной кислоты и буры. Состав – отличный антисептик для древесины и будет защищать особняк от мышей и прочих вредителей.
Обработать стройматериалы раствором буры или извести.
можно с помощью золы, табачной пыли, полыни или перечной мяты, запах которых грызуны не выносят, а также заполнять межкомнатные перегородки шлаком.
Свайный или ленточный фундамент, если позволяет характеристика почвы, заменить железобетонной плитой, прогрызть которую мыши не смогут и не проникнут в каркасный дом. Применение монолитных конструкций станет надежной защитой дома.
Использование специальной мелкоячеистой металлической сетки, которая будет предохранять постройку от грызунов.

Все эти приемы будут защищать конструкцию от мышиной напасти.

Применение сетки из металла

Помимо этого, на этапе строительства или же после возведения сооружения для обеспечения его безопасности используется металлическая сетка. Она обладает целым рядом положительных свойств:

простотой в применении;
максимальной защитой от различных грызунов;
экологической безопасностью;
доступностью потребителям;
способностью сохранять свои характеристики при широком диапазоне температур.

Для обеспечения эффективной защиты необходимо правильно выбрать материал. Толщина проволоки, из которой изготавливается сетка, должна быть не менее 2 мм, а параметры ячеек не более 5х5 мм, иначе мыши прогрызут ее или просто пролезут в имеющиеся отверстия.

Сетка от мышей прокладывается по черновому полу, в этом случае утеплитель расстилается непосредственно на нее. Либо же ею обшивают цоколь дома, так как мыши могут водиться под полом внутри пространства, которое образуется в результате постройки дома на сваях. Высота защитного покрытия, укладываемого под обшивку цоколя должна быть не менее метра. Перед проведением утепления и отделки дома желательно оббить все углы строения оцинкованной сеткой.

Защитить от мышей можно построенный каркасный дом. Для этого следует зарыть сеточное ограждение вдоль фундамента на глубину не менее 0,8 м, а если имеются норы грызунов, то прокладка защитного сооружения должна быть глубже мышиных ходов.

Об эффективности данного метода защиты каркасного дома от мышей свидетельствуют многочисленные отзывы владельцев таких коттеджей, размещенные на сайте.

Пол

Дома на винтовых сваях, также как и другие каркасные сооружения, нуждаются в эффективной защите пола, который является наиболее вероятным местом проникновения в дом мышей. При его обустройстве следует использовать как металлическую сетку, так и другие средства. Действенным методом охраны полового покрытия станет керамзит:

при закладке чернового пола его рассыпают на грунт слоем не менее 0,3 м;
материал укрывают пленкой из полиэтилена, поверх которой размещают плиты ОСП-3 в два ряда;
затем укладывается завершающий слой керамзита, венчающий конструкцию «черного» пола, полностью защищенного от мышей.

Надежность такого «керамзитового замка» усиливают пропиткой из борной кислоты и синтетического воска, которая наносится на плиты.

Утеплители

В качестве защиты от мышей и крыс может выступать соответствующий утеплитель. Довольно часто, чтобы утеплить изнутри каркасный дом, владельцы используют дешевый теплоизоляционный материал – пенопласт. Мыши могут обгрызать его и беспрепятственно обосновываться в помещении. Специалисты настоятельно рекомендуют не экономить и использовать дорогой, эффективно защищающий от грызунов вариант утеплителя – эковату. Экологический материал отпугнет не только грызунов, но и создаст антисептическую среду, исключающую появление плесени и других негативных явлений. Данный утеплитель обладает хорошими тепло- и звукоизоляционными характеристиками.

Использование металлической сетки

Частым и очень надежным приемом при защите каркасного дома от грызунов является применение мелкоячеистой металлической сетки. Оцинкованную сетку из металла при строительстве дома укладывают на черновой пол перед настилом чистового. Для защиты от проникновения грызунов в дом также можно оцинкованной металлической сеткой обернуться цоколь здания, высота сетки при этом должна составлять 1 м или более. Не лишним будет и защита углов здания такой же мелкоячеистой сеткой перед работами по утеплению или во время наружной отделки.

Механические способы защиты

Если панельно-каркасный дом уже давно построен, и вместе с жильцами в нем проживают и грызуны, то работы по снятию пола и отделки стен с целью введения под них металлической сетки будут очень долгими и материально затратными. Если нет ни времени, ни ресурсов на проведение таких работ, прибегают к более традиционным приемам борьбы с мелкими грызунами.

Практически каждый хотя бы раз в жизни сталкивался с мышеловками, капканами или клеевыми ловушками. Именно к таким инструментам и следует прибегнуть в подобном случае. Конечно, даже после полного устранения грызунов (которого очень непросто достичь), некоторые ремонтно-строительные работы в помещении все равно придется осуществить. Все равно будет необходимо избавиться от щелей и других возможных путей проникновения грызунов, заделав все бреши цементным раствором.

Если колония мышей или крыс достаточно большая и плодовитая, то борьба с ними при помощи мышеловок и капканов может продолжаться вечно

В таком случае потребуются ядовитые химические вещества, которые требуют осторожного обращения. Среди отрицательных моментов применения ядохимикатов следует отметить, что при недостаточно осторожном применении ядов ими часто травятся домашние животные (если они есть), а также то, что какой-либо грызун может умереть в недоступном месте, и труп его будет там долго разлагаться

Как видно, борьба с грызунами может занять очень много времени. Причем нет никакой уверенности, что в этой схватке победу одержите именно вы, нет. Для того чтобы ликвидировать грызунов полностью необходимо обратиться к профессионалам. Только эксперты знают:

как правильно применять ядовитые химикаты;
где искать и уничтожать основные скопления грызунов;
какой метод лучше всего подходит именно в вашем случае.

Работники нашей компании имеют большой опыт в проведении таких работ и гарантируют эффективный результат.

Способы защиты от грызунов

Защита от грызунов в саду может быть обеспечена несколькими способами.

Штамбы деревьев можно обмазать известью и разными пахучими веществами. Недостаток этого способа заключается в том, что к весне любой запах улетучивается, а зимой обмазку повторить невозможно.

Современные производители садовой «химии» выпускают специальные составы, которые при обмазывании ими стволов осенью до весны сохраняют свойство отпугивать грызунов.

Под деревьями можно раскидать опилки, предварительно пропитанные креолином. Не рекомендуется использовать жиры и масла для обмазки стволов, особенно если это керосин, солидол или автол, так как это может вызвать ожоги коры.

От мышей и зайцев можно защитить деревья, сделав обвязку отплодоносившими побегами малины или камышом.

Не стоит использовать для этих целей солому, так как она привлекает грызунов еще больше. Обвязку следует делать так, как было указано выше, — с небольшим заглублением в землю.

Стволы можно обвязывать толем или листами рубероида, но они не должны соприкасаться с корой, так как пропитаны смолистыми веществами.

Кроме того, на солнце черная поверхность обвязки нагревается, что также может стать причиной ожогов. Стволы необходимо сначала обвязать мешковиной, тканью или газетами, а поверх них уже укрыть толем или рубероидом.

Получившийся зазор между деревом и обмоткой необходимо замазать глиной или заткнуть кусками газеты.

Это делается для того, чтобы вода не затекала под листы и затем во время морозов не замерзала под обмоткой. Вода, замерзая, расширяется, и следовательно, штамб будет сжиматься, что неблагоприятно скажется на самочувствии дерева.

Привлекательными для грызунов становятся неубранные листья и сухая трава в саду. Поэтому еще раз стоит вспомнить о необходимости уборки с участка всего, что может служить убежищем для мышей.

Можно воспользоваться специальными отравленными приманками и разложить их по всему периметру участка. Но такой способ хорош только для тех хозяев, у которых нет домашних питомцев.

После выпадения первого снега следует притоптать его вокруг деревьев, так как мышам труднее пробираться под слежавшимся снегом. А от зайцев можно установить высокий забор.

ПОХОЖИЕ ПУБЛИКАЦИИ

Причины и защита от солнечных ожогов деревьев

Зимние работы в саду

Работа в дни оттепели

Сетка от грызунов в каркасном доме

Доброго времени суток подписчики, а также случайные зрители.

Мы строим каркасный дом 6*12 метров своими руками. Ссылка на него появится в верхнем правом углу. В прошлом ролике я рассказывал про окна ПВХ. Про замер окон, их покраску и установку. А сегодня речь пойдет про устройство чернового пола и защиту от грызунов.

В начале коснемся теории про сегогорбых и того, на сколько же все печально, во второй части ролика расскажу, как с ними бороться и правильно зашить черновой пол, а на фоне покажу, как черновой пол зашивали. На просторах интернета существует мнение, что каркасный дом – это дом для мышей. Знатоки поговаривают, что мыши полчищами живут в стенах и перекрытиях каркасных домов и от них невозможно избавиться. Так ли это на самом деле, об этом сегодня и поговорим.

Многие думают, что каркасники это рассадники для мышей, а вот дом из бруса, камня или бревна — это совсем другая история. Если вы тоже так думаете, то вы очень сильно ошибаетесь. Полы, перекрытия и стропильная система практически всегда сделана в любом доме все по той же каркасной технологии. Пространство между балками и стойками заполнено тем самым утеплителем. Если вы думаете, что зальете все бетоном и мыши в таком доме жить не будут, спешу вас огорчить. Когда я заезжал в новостройку, каково же было мое удивление обнаружить мышиное дерьмо в прихожей. А это третий этаж панельного дома. Серогорбые вездесущи и пробираются везде, куда только смогут просунуть свое жало. Покажу вам небольшой трэш, как мыши прекрасно живут под бетонной стяжкой. Слабонервным, беременным женщинам и детям лучше перемотать)

Надо понимать, что абсолютно любой дом интересует мышь, как источник тепла и пищи. За утеплителем из каркасных стен мыши не приходят) Поговаривают, что мыши и еще некоторые животные видят, как тепловизор и они бегут на это излучение, понимая, что там тепло. Но это не точно. Абсолютно любой дом находится в зоне риска. Мыши вездесущи. Даже когда мы бурили ямы под сваи, в одну из ям заскочила мышь. Предположения о ее судьбе можете оставить в комментариях)

Как же мыши попадают в дом? Самая большая зона, куда мышь может пробраться это фундамент дома. Если дом стоит на сваях, как у нас, то мыши не составит никакого труда подняться по свае и прогрызть себе ход через подпол. Но не все так печально. Есть очень эффективных метод, как полностью исключить эту вероятность, но об этом позже. Дальше вероятные места попадания мышей в дом — это воздуховоды и вентиляция. Любую вентиляцию нужно защитить от мышей. Что касается крыши…мышь без проблем ползает по отвесным стенам на любую высоту. Но даже, если весь дом защищен, всегда остается шанс пустить мышей через двери. Поэтому следует их держать закрытыми. Еще рабочий вариант разжиться мышами – это занести их с вещами. Кровати, матрасы, кресла, диваны, шкафы – все это потенциальная угроза. Следует тщательно все проверять, перед тем как заносить в дом, если эти вещи стояли на улице или в гараже, например. Да что говорить, у меня друг по осени привез мышь с рыбалки в рюкзаке в квартиру. Пришлось устроить целую операцию по ее поимке. Это тоже дело не простое, как может показаться на первый взгляд. Опять же следует понимать, что даже если мышь занесли, то без еды ей долго не прожить. Поэтому следует следить за доступом к продуктам, выносить мусор, если там есть чем поживиться серогорбым. Следует еще понимать такую штуку, как плодовитость этих мелких вредителей. Мышь в среднем дает потомство каждые 2 месяца, в помете в среднем 5 мышат. В двухмесячном возрасте мышь способна к размножению. А теперь представьте, как быстро они могут расплодиться, если в дом проникнет хоть одна беременная мышь.

Но не все так грустно, как на первый взгляд. Если надежно защититься от мышей и перекрыть им доступ в дом, то они вас не побеспокоят. Разберем устройство чернового пола, эффективного против проникновения мышей в дом. Стандартный пирог пола каркасного дома выглядит следующим образом: Лаги пола, между которых установлен утеплитель, сверху утеплителя монтируется пароизоляция, которая препятствует проникновению пара из теплого помещения в зимний период. Под паром подразумевается теплый воздух из помещения, который конденсируется в утеплителе и способствует его намоканию, в следствии чего утеплитель теряет свои теплоизоляционные свойства. Сверху пароизоляции монтируется чистовой пол или основание под него. Снизу лаг с утеплителем монтируется ветро-влагозащита. Ее задача – это вывод пара, который попал в утеплитель из помещения наружу. А так же защита утеплителя от внешней влаги, конденсата, проникновения холодного воздуха и выдувания утеплителя. Ниже ветро-влагозащиты монтируется дюймовка. Это доска 100*25 мм. Она предназначена для того, чтобы утеплитель опирался на нее и не выпал наружу. Интервал доски подбирается с зазором между ними около 40 см.

В этом пироге не хватает одной существенной детали – это защиты от грызунов. После монтажа влаго-ветрозащиты следует установить сетку от грызунов. Ниже нее уже набивается дюймовка. Что касается сетки. Существует несколько ее разновидностей, но далеко не все подходят, а точнее подходит только одна. Правильная сетка от грызунов имеет сечение 6*6 мм, не больше. Диаметр проволоки 0,6мм. или больше. Сетка должна быть обязательно сварная и оцинкованная. Размеры сетки, как правило, один метр на 15 метров. Найти ее нам оказалось не так просто. Возможно у нас в Беларуси она дефицитная или даже конкретно в нашем городе. Найти ее удалось под заказ только в одном месте. Нельзя использовать сетку просечку, у которой ячейка в виде ромбика. Есть мнение, что такую ячейку мыши достаточно успешно прогрызают. У такой сетки ячейки достаточно большие, как правило, начиная от 10*10 мм. И в такие дырки головы молодых мышей очень легко пролазят. Так же нельзя использовать плетеную сетку, потому что мышь может достаточно легко сдвинуть прутья и получится достаточно большая дырка для того, чтобы мышь проникла через нее.

Последовательность монтажа чернового пола следующая: Сперва монтируется влаго-ветрозащита. Наш выбор пал на Ондутис А100. Аналогов хватает, к этому бренду привязываться не стоит, мы выбрали из-за доступности в нашем регионе. Площадь рулона 75 м. кв. С нахлестами аккурат хватает одного рулона с минимальным остатком. Монтируем ее с помощью степлера между брусьями обвязки с нахлестом на брус около 10 см по периметру. Нахлест между полотнами около 10 см. Далее, с помощью того же степлера, монтируется сетка от грызунов с нахлестом на брус по периметру сантиметров 5. Нахлест между полотнами около 5 см. Поверх сетки монтируется дюймовка. Мы монтировали доски по краям обвязки брусом, чтобы прижать сетку и ветро-влагозащиту к брусу, на стыке сетки и влаго-ветрозащиты. Вышло около 40 см между досками. Доски обязательно должны быть антисептированы. Это очень сильно повлияет на их долговечность. Дюймовку прибивали на ершеные гвозди при помощи все того же наладонного нейлера. Очень удобно, когда нету места, чтобы размахнуться ручным молотком. Как вариант, можно дюймовку монтировать на саморезы при помощи шуруповерта. Монтировали по 2 гвоздя на лагу.

Рекомендую подписываться на наши группы в вк и инстаграм. Там я публикую текущие этапы работы. Ссылки на них в конце видео или в описании под каждым роликом.

На этом этапе по материалам покупали: Ровно куб доски и бруска на черновой пол, потолок, контробрешетку пола и стен. Его стоимость прибавлю сразу на этом этапе. Ветро-влагозащиту Ондутис А100 – 1 рулон, сетку от грызунов 6*6мм, сварную оцинкованную 6 рулонов по 15 квадратов, ершеные гвозди для крепления дюймовки, электростеплер со скобами. Потратили: примерно 184$ или 13800 рр.

Итого на этом этапе потрачено 322000 рр или 4715 долларов. По времени монтаж чернового пола занял неполный день при работе вдвоем. Ну и на этом на сегодня у меня все… Подписывайтесь на канал, если интересна наша задумка построить дом своими руками за минимальный бюджет. Так же не забывайте нажать на колокольчик, чтобы не пропускать новые выпуски, потому как ютуб скорее всего вам их не покажет без нажатого колокольчика, даже если вы подписаны. Если есть конструктивная критика или дополнения, пишите в комментариях, на все постараюсь ответить. Понравился ролик – покажи это лайком, это лучшая благодарность за работу над ним, не понравился – тогда ставь дизлайк. В следующих роликах расскажу, как делали каждый из этапов нашей стройки, сколько это заняло по времени и финансам…

Сетка от грызунов в каркасном доме

Каркасные дома популярны благодаря скорости возведения и невысокой себестоимости по сравнению с капитальным строительством. Однако у таких строений есть и недостатки, один из них – размножение грызунов. Позаботиться о защите от мышей и крыс стоит еще на этапе строительства. Надежно защитить дом от грызунов поможет металлическая сетка. Поговорим о том, как мыши обычно проникают в дом, и как выбрать и установить сетку для защиты от них

Слабые места в каркасных строениях

С наступлением холодов мыши в поисках тепла и пищи переселяются поближе к людям. И каркасные дома становятся для мелких вредителей жильем не только на зиму. С наступлением весны они точно не покинут дом из-за постоянного доступа к пище, кроме того, они начнут активно размножаться.

При строительстве каркасного дома невозможно избежать щелей в местах соединения, необходимы технологические зазоры для вентиляции. Пол обычно устанавливается на лагах, между которыми укладывается рулонная или плиточная теплоизоляция. Она же монтируется и внутри стен. Недорогие материалы, например, пенопласт, вредители могут прогрызть и строить целые лабиринты ходов. В результате теплоизоляционный слой приходит в негодность.

Грызуны проникают в дом через щели в фундаменте, полу и цоколе. Эту зону стоит защитить еще на этапе строительства.

Выбираем сетку

Для защиты от грызунов используется армирующая сетка. Пластиковая не подойдет, поскольку мыши ее легко прогрызают. Необходима металлическая оцинкованная сетка с сечением не менее 2 мм и размером ячейки не более 6 мм. Только в этом случае будет обеспечена надежная защита от грызунов. Оцинкованное покрытие защитит от коррозии, а толстый двухмиллиметровый металл мыши точно не перегрызут. Применение мелкоячеистой сетки связано с тем, что череп грызунов способен сжиматься. Если сетка будет крупнее, вредитель сможет проникнуть в дом.

Другая не менее эффективная разновидность сетки – ЦПВС. Расшифровывается ЦПВС как цельнометаллическая просечно-вытяжная сетка. Изготавливается из металлического листа толщиной 1 мм путем прорубания ячеек, после чего он растягивается.

Крепятся обе разновидности сетки строительными скобами или саморезами в сочетании с пресс-шайбами. К теплоизоляционным материалам она монтируется с помощью специальных фиксаторов.

Плюсы этого способа

Металлическая сетка в качестве защиты от грызунов обладает рядом положительных характеристик:

Экологичность. В отличие от химических пропиток она полностью безопасна;
Невысокая стоимость;
Эффективность. При правильной установке и соответствии требованиям, она станет надежным барьером.

Защита дома на этапе строительства

Сетка используется для обшивки цоколя дома. Дополнительно ею укрепляются все углы (напольные и потолочные) и стыки. Это наиболее уязвимые места.

Для защиты каркасного дома при монтаже сетки следуйте приведенным ниже правилам:

По всему периметру фундамента стека закапывается на глубину не менее чем на 0.8 метра;
Защита укладывается на черновой пол под слой утеплителя;
Перед нанесением отделочного слоя все наружные углы укрепляются;
Все технологические отверстия (вентиляция, дымоходы, продухи в фундаменте) также должны быть защищены.

Если соблюдать эти правила, у грызунов практически не останется возможности попасть в дом.

Сочетание сетки и других методов защиты

Для повышения эффективности стоит использовать дополнительные методы, которые обычно еще применяются на этапе строительства:

Железобетонные плиты. Фундамент из железобетонных плит станет непреодолимой преградой для грызунов.
Керамзит. Черновой пол засыпается толщиной в 0.25-0.45 м керамзитом, сверху он заливается цементным раствором. После полного застывания укладывается гидроизолирующая пленка. В конце монтируется стяжка либо укладываются древесно-стружечные плиты.
«Правильный» утеплитель. В качестве слоя утеплителя стоит использовать минеральную или эковату. Эти материалы несъедобны для грызунов.

Сочетание всех этих мер надежно защитит дом от грызунов.

Обзор сеток от грызунов в каркасном доме

Сетка ОЦ 6х6 по 139р./кв.м., размер рулона 1х10м, сетка ОЦ 10х10 по 107р./кв.м., размер рулона 1х15м.

1 Куда стремятся мыши
2 Грозные враги
3 Чем опасны грызуны
4 Металлические сетки – барьер для грызунов
5 Надежные способы от грызунов
- 5.1 Железобетонная плита
- 5.2 Керамзит
- 5.3 Утеплитель
- 5.4 Металлические отбойники
6 Дом без мышей

Куда стремятся мыши

Исследования, проведенные в США в университете рыбоводства, лесоведения и дикой природы, установили, что за полгода деятельности грызунов теплопроводность утеплителя увеличивается в 5 раз.

Грозные враги

Домовые мыши быстро бегают, хорошо лазают, прыгают, плавают.

Размножаются круглый год. Одна самка способна принести до 120 детенышей за год.

Чем опасны грызуны

Одежда, обувь, книги, мебель при «встрече» с мышами становятся непригодными к дальнейшему использованию.

Последние исследования подтвердили, что вирус, вызывающий опухоль молочных желез мышей, заразен для человека и способствует развитию рака груди.

Металлические сетки – барьер для грызунов

Цена материала доступна – 70-160 руб/м². Вложения окупаются спокойным сном, сбереженными нервами и средствами.

Закрепить вертикальную подземную завесу по периметру вдоль цоколя и фундамента на глубину не менее 100 см;
Уложить на черновой пол слоем, предшествующим утеплителю, чтобы мыши не смогли в него пробраться и обосноваться;
Оббить наружные углы строения до начала отделки;
Закрыть вентиляционные зазоры, дымоходы, продухи фундамента и другие технологические отверстия.

Надежные способы от грызунов

Железобетонная плита

Керамзит

Черновой пол, устроенный по грунту, можно сделать непроходимым для крыс и мышей с помощью керамзита.

Керамзит несъедобен для мышей.

Они не прокладывают в нем ходы, не устраивают гнезда. Обосноваться в утеплителе им не удастся из-за его сыпучести.

Утеплитель

Чем они жестче, тем меньше привлекают грызунов.

Металлические отбойники

Сплошная полоса из гладкого металла высотой 40-45 см станет препятствием для подъема грызунов по стенам.

Дом без мышей

Сетка ОЦ 6х6 по 139р./кв.м., размер рулона 1х10м, сетка ОЦ 10х10 по 107р./кв.м., размер рулона 1х15м.

Защищаем каркасный дом от мышей

Каркасные дома довольно востребованы в нашей стране. Строения не только быстро возводятся, но и обладают выдающимися эксплуатационными характеристиками. Один из недостатков – грызуны в каркасном доме. Если в процессе возведения не были приняты необходимые меры, неприятные гости с большой вероятностью поселятся в вашем доме.

Сегодня мы расскажем о том, как защитить каркасный дом от мышей. Разберем основные причины появления грызунов, а также остановимся на способах, которые помогут навсегда забыть о проблеме.

Грызуны в каркасном доме

Мыши в каркасном доме, а также в жилых постройках другого типа появляются, находясь в поисках еды. Если доступ к пище обеспечен в постоянном режиме, мыши не только задержатся, но и совьют уютное гнездышко вдали от человеческих глаз, начнут активно размножаться и увеличивать популяцию.

Как не дать расплодиться мышам.

Часто в доме мыши появляются с наступлением холодов – в помещении создаются оптимальные условия для проживания. Со временем вредители начинают искать еду и активно осваивать всю жилую площадь вашего каркасника.

Мыши в частном доме появляются из-за ошибок строителей, которые были допущены в процессе возведения. Если в области стен и пола имеются щели между стыками, грызуны, с большой вероятностью, выберут каркасник в качестве своего дома. Раз конструкция подразумевает обшитый каркас, то между панелями создается оптимальное пространство для передвижения небольших грызунов.

Помните о том, что для голодных мышей нет абсолютно никаких препятствий, особенно если они чувствуют поблизости запах крупы, муки, сахара, хлеба. Старайтесь хранить любую еду не в пакетах и мешках, а закрывать все в герметичные контейнеры.

Защита каркасного дома от грызунов

Защита от мышей в каркасном доме позволит сделать все попытки грызунов проникнуть в ваше жилище бесполезными. Крайне важно продумывать методики защиты еще на этапе разработки проекта дома. Существует несколько эффективных способов, борьба с грызунами в каркасном доме не составит вам труда:

В качестве утеплителя выбирайте минеральную вату, материал не только сберегает древесину, но и препятствует поселению грызунов в каркаснике; Обработка строительных материалов специальными растворами, отпугивающими вредителей; Применение народных методик: обработка внутренних стен золой или табачной пылью, добавление веточек перечной мяты или полыни, запах которых отпугивает грызунов; Используется специальная металлическая сетка от мышей в каркасном доме, которые выступают в качестве надежного барьера между окружающей средой и вашим домом.

Применение сетки

Металлическая сетка от грызунов в каркасном доме монтируется, как на этапе строительства, так и уже после возведения каркасной конструкции. Материал довольно легок в применении и позволяет обеспечить защиту каркасника от мелких и крупных вредителей (мыши, кроты, крысы).

Сетка от грызунов в каркаснике.

Сетка абсолютно безопасна для окружающей среды, при этом она справляется с высокими и низкими температурами, недорого стоит. Помните о том, что сетка против грызунов должна быть с мелкими ячейками, при этом толщина проволоки – не менее 2 мм. В ином случае вредители с легкостью прокусят сетку и все равно попадут в жилище.

Защита пола

Не менее эффективный способ защиты пола – использование керамзита. Материал, представляющий собой обожженную глину, насыпается при обустройстве чернового пола, слой – не менее 300 мм. Поверх материала укладывается обычная полиэтиленовая пленка, далее – две ОСП плиты, завершающий этап – еще один слой керамзита. Выполняя черновой пол данным способом, можно защитить жилище от вредителей.

В некоторых случаях к «сэндвичу» чернового пола добавляются еще и стружечные плиты, пропитанные борной кислотой и воском. Вещества активно отпугивают грызунов.

Защита стен

Часто будущие владельцы каркасного дома интересуются, какой материал лучше использовать для обшивки каркасного дома, чтобы грызуны не прогрызли стену и не проникли в дом.

Чтобы не завелись мыши в стенах каркасного дома, можно использовать специальные профилированные металлические листы из стали. Толщина такого листа – более 1,5 мм. Для мышей данное покрытие является слишком скользким, за счет этого они не могут попасть в помещение. Еще один действенный вариант – использование металлической сетки.

Выбор утеплителя

Если при строительстве каркасного дома в качестве утеплителя выбирается обычный пенопласт. Материал имеет отличные эксплуатационные характеристики, он надежно изолирует помещение, недорого стоит. У утеплителя из пенопласта есть существенный недостаток – мыши и крысы часто выбирают пенопласт в качестве места для создания своих гнезд.

Нанесение эковаты на наружные стены каркасного дома.

Но как защитить каркасный дом от грызунов? Для защиты дома от вредителей, остановите выбор на эковате, которая реализуется в рыхлом виде. Работать с материалом можно только при наличии соответствующих навыков, желательно доверить процесс профессионалом, которые уложат вату с помощью специального оборудования, надежно закроют все щели и исключат вероятность проникновения грызунов.

Эковата готовится на основе древесной целлюлозы, она не содержит в составе опасных веществ, может применяться даже в случае, если в доме проживают аллергики и маленькие дети.

Особенности фундамента

Если использовать металлическую сетку, то к фундаменту нет каких-либо определенных требований. При этом наиболее защищенными от грызунов считаются ленточный и свайный фундамент.

Борьба с грызунами

Если этап защиты дома от вредителей был пропущен, и в каркаснике все-таки завелись мыши, бороться с ними можно несколькими способами. Как избавиться от мышей в каркасном доме? Чаще всего используются мышеловки, ловушки и химикаты для уничтожения грызунов.

Механические способы

Если в каркасном доме завелись мыши, можно прибегнуть к самому популярному методу – установить мышеловки. Помните о том, что способ принесет должный эффект только в том случае, если будут заделаны все щели и дыры, через которые мыши изначально проникли в помещение.

Мышеловка.

Мышеловки имеют ряд преимуществ над химическими препаратами: они безопасны для детей и домашних животных, грызун не погибнет в перегородках каркасного дома и не станет причиной появления неприятного запаха.

Народные методы

Не менее действенными являются многочисленные народные методики борьбы с вредителями:

Винная пробка.

Нафталин.

Манная крупа.

Негашеная известь.

Смешивается с сахаром и укладывается вблизи норок. Грызуны с радостью съедают приманку. В желудке известь вступает в реакцию с желудочным соком, вызывает сильнейшие ожоги, становится причиной гибели мыши.

Ультразвуковые методы

Установлено, что грызуны болезненно реагируют на ультразвук высокой частоты. Современные электронные отпугиватели, которые работают от сети или аккумулятора. Они излучают звуки, которые вызывают у мышей панику, чувство физической боли, заставляют их спешно покидать помещение.

Охота кота за мышами.

Обращайте внимание на параметр рабочей площади устройства, если мощности будет недостаточно – грызуны покинут лишь определенные помещения.

Самый верный помощник в борьбе с грызунами – обычный домашний кот. Метод безопасен с экологической точки зрения, кот станет хорошим другом для детей и взрослых.

Как победить мышей в каркасном доме и не допустить их появления

Каркасная технология имеет недостаток (который, впрочем, можно предупредить еще на этапе прокладки фундамента). Это мыши. Стены в каркаснике обычно заполняются довольно легким утеплителем, который не является преградой для мышей, и они могут там комфортно жить и размножаться. Рассмотрим, как не допустить появления грызунов в каркасном доме или как справиться с ними, если такая напасть все же с вами произошла.

Какой вред наносят грызуны

Мыши, крысы и другие грызуны при отсутствии определенных мер защиты могут легко проникнуть в каркасный дом. Этим они не только пугают хозяев, боящихся или брезгующих такими гостями, но и приносят вред. Разрушения могут постигнуть любой уголок жилища. Они перегрызают бетонные или деревянные перекрытия, проводку, самые разнообразные предметы в доме. Часто вредители уничтожают запасы на зиму или другую пищу.

Если мыши поселятся в подвальных помещениях, где обычно сыро и темно, то начинают активно размножаться. В таком случае бороться с их огромным количеством еще сложнее. Самое опасное, что грызуны являются разносчиками опасных инфекционных заболеваний, например, холеры, разнообразных кишечных болезней, лептоспироза. Поэтому необходимо как можно скорее от них избавляться, а для этого ознакомимся с методами борьбы с мышами.

Причины появления грызунов

Мыши пробираются в каркасный дом по нескольким вполне логичным причинам. Прежде всего, это поиск корма, который всегда имеется в жилых строениях. Особенно сильно их привлекает наличие больших запасов круп. Также высока вероятность их появления в зимний период с целью укрытия от холода. В местах, где зимы достаточно холодные, это еще более актуально.

Каркасные дома не являются особой помехой для проникновения крыс и мышей. При сооружении здания очень сложно избежать щелей в полу или на стыках. Перегородки здесь зачастую бывают полыми, а гипсокартонная ошибка вряд ли сможет удержать мышей и не дать им проникнуть внутрь. В каркасном доме при обрешетке пустые места наполняют утеплителем. Мыши их легко прогрызают и делают там гнезда. Тем более это просто при использовании некачественного материала и неправильном монтаже.

Защита каркасного дома

Наиболее эффективными методами защиты от грызунов будут те, которые применены еще при строительстве.

Итак, первыми методами профилактики являются:

Если есть возможность использовать железобетонные плиты, то рекомендуется делать фундамент именно их них, а не ленточный или свайный. Прогрызть их крайне сложно, такая монолитная конструкция не позволит мышам проникнуть в каркасный дом.
Эковата станет оптимальным вариантом в качестве утеплителя для пола нижнего этажа. Состоит она из вторичной целлюлозы на 80% и смеси бурной кислоты и буры на 20%. Такой древесный антисептик не только защитит от вредителей, но и убережет от различных насекомых, плесени или грибка.
Стройматериалы рекомендуется обрабатывать известью и раствором буры.
Межкомнатные перегородки можно наполнять шлаком. Кроме того используют табачную пыль, золу, полынь, перечную мяту, которая отпугивает мышей своим запахом.
Металлическая мелкоячеистая сетка тоже является отличным средством защиты.

Эти методы считаются достаточно эффективными и не дают вредителям пробраться в каркасный дом.

Рассмотрим подробнее как применять металлическую сетку.

Применение металлической сетки

Во время закладки фундамента его можно защитить стальными листами, толщиной до 1 мм. Благодаря им попасть в каркасный дом грызуны не смогут, потому что листы скользкие, и мыши не смогут зацепиться и забраться на фундамент, съезжая вниз.

Также на этом этапе целесообразно использовать металлическую сетку, которая имеет ряд преимуществ:

Экологическая безопасность.
Простой и доступный метод для применения.
Эффективная защита.
Сохранение характеристик при изменении любых температур.

Важным нюансом является правильный подбор материала. Будет хорошо, если толщина сетки будет около 2 мм, а размер ячеек не более 5х5 мм. Если они будут шире, то мыши или пролезут в такое отверстие или прогрызут сетку.

Металлическая сетка раскладывается по черновому полу, после чего на нее кладется утеплитель. Крепление на стену осуществляется на высоту минимум 1 м. Для углов каркасного дома нужно использовать оцинкованную сетку. Если на этапе формирования фундамента сетка не была проложена, то ее можно вкопать вокруг построенного дома вблизи фундамента. Глубина должна около 1 м. Ограждение такого вида можно украсить, например, вьющимися цветами.

Другие методы защиты

Чаще всего мыши в каркасные дома попадают через пол, поэтому очень важно защитить его как можно эффективнее. Помимо металлической сетки надежным средством считается применение керамзита. Наносят его на черновой пол в несколько слоев. Сначала на грунт посыпают керамзит, слой которого не менее 30 см. далее натягивают пленку из полиэтилена, размещают плиты ОСП. После этого снова конструкцию засыпают керамзитом. Чтобы такой метод был максимально эффективным, необходимо обрабатывать плиты борной кислотой, использовать порошок буры.

Утеплитель также играет немаловажную роль в защите каркасного дома от мышей. На нем чаще всего экономят, не придавая особого значения, выбирают самый дешевый теплоизоляционный материал – пенопласт. И это большая ошибка. Прогрызть его не составляет никакого труда. Поэтому рекомендуется применять хоть и дорогой, но надежный материал – эковату. Кроме того он имеет отличные звукоизолирующие характеристики, хорошо утепляет, предупреждает появление плесени или грибка.

Методы борьбы

Если мыши все же пробрались в ваш дом, необходимо знать способы избавиться от них. Методов много. Главное выбрать подходящий способ с учетом типа строения и количества вредителей.

Некоторые применяют отраву, однако, это один из худших методов, поскольку мышь может умереть в стене. Достать ее получится, только если разрушить стену. Трупный запах распространится по всему дому, после чего находиться в нем будет просто невозможно. Даже средства, имеющие мумифицированный эффект, оставляют неприятный запах, хоть и менее сильный. В связи с этим рекомендуется прогонять мышей или вылавливать.

Народные способы

Указанные далее методы могут использовать строители при возведении здания или жильцы после окончания процесса строительства. Итак, приемы следующие:

Для отпугивания под пол кладут обожженные поленья.
Вместе с утеплителем добавляют табачную пыль, золу, ромашку, полынь, мяту, шлак, сухой репей, сосновые ветки.
Вдоль стен насыпают порошок красного жгучего перца.
Под пол укладывают битое стекло.

Эти методы наиболее популярные, но встречаются и другие.

Механические средства

Часто для борьбы с грызунами используют мышеловки, капканы, ловушки. Расставлять их лучше вдоль стен в комнатах, где мышь была замечена. При этом необходимо также заделать дыры и щели, через которые вредители попали в жилище, иначе каждый раз будут появляться новые особи. Такие приспособления можно купить, а можно сделать самостоятельно. Рассмотрим некоторые методы их приготовления.

Вариант 1. Отрезать горлышко пластиковой бутылки, положить внутрь приманку и обмазать подсолнечным маслом стенки. Далее нужно горлышко опустить в середину бутылки и зафиксировать скотчем. В такую ловушку мышь легко залезет, но за счет скользких стенок выбраться уже не сможет из бутылки.

Вариант 2. Налить в ведро воду, сверху расположить шелуху, листья или солому, налить растительного масла 1 ложку, насыпать зерен или семечек. Чтобы мышь смогла легко залезть требуется поставить лесенку. Ею может стать обычная палочка. Когда грызун попытается достать еду, то упадет в воду и утонет. Верхний слой станет на место, поэтому попасться в ловушку сможет не один вредитель.

Вариант 3. Использовать для формирования клейкого капкана можно клеенку, фанеру или плотный картон. Эту основу прикрепить к полу, а сверху налить клей и разместить по центру приманку. Мышь приклеится и не сможет сбежать. Причем ловушка может сработать для нескольких животных одновременно.

Отпугивание

Мышей из каркасного дома можно прогнать с помощью неприятного звука или запаха. Растения, такие как полынь, ромашка, мята, запихивают вдоль стен в норы. Такой метод также считается профилактическим, так как грызуны вряд ли появятся в данных местах. Полы следует промывать с нашатырным спиртом или раствором уксуса, а в блюдце оставить концентрированные препараты. Мыть пол можно также с добавлением эфирных масел, цитрусовых, мяты, мелиссы.

Существует и более современный метод: ультразвуковой отпугиватель. Такое устройство имеет систему управления. Желательно для лучшего эффекта приобрести несколько отпугивателей и расположить их по углам дома и вдоль стен. Ультразвуковое излучение от них приносят дискомфорт мышам, от чего им хочется покинуть эту территорию.

Итоги

Если мыши уже попали в каркасный дом, то нужно сразу предпринять меры по их устранению. Методов для этого достаточно много, и есть возможность выбрать наиболее приемлемый. Чтобы избежать их повторного появления, необходимо провести кардинальные меры по защите сооружения. Для этого требуется поставить металлическую сетку, сменить утеплитель или прибегнуть к народным способам.

Видео

Также предлагаем вам посмотреть видео с канала House for Alice о том, что может быть, если не предусмотреть “мышиную” опасность для каркасника на этапе строительства.

Металлическая сетка для защиты дома и бани из бруса от грызунов

Деревянные дома и бани привлекательны для грызунов по нескольким причинам. Во-первых, там почти всегда есть чем поживиться. Во-вторых, древесина не является серьёзным препятствием для мышиных зубов. В-третьих, современные деревянные дома строятся с упором на энергоэффективность, а это означает применение конструкций с пустотами, в которых укладывается минераловатный утеплитель. С мышами в доме или бане из бруса можно бороться несколькими способами. Но самой действенной и практичной защитой сегодня считается металлическая сетка.

Где поселяются грызуны в доме и бане из бруса?

Самое первое место в доме и бане из бруса, в котором непременно поселятся мыши, это нижнее основание. Это становится очевидным, если посмотреть на устройство перекрытия пола в таких постройках:

Обвязка основания. Выполняется из деревянного бруса, который в один или два ряда располагается на фундаменте. В проектах на монолитной ленте — это «главные ворота» для грызунов.
Несущие лаги. Являясь силовым элементом конструкции и имея солидную толщину, не представляют преграды для мышей.
Черновые полы. Подшиваются из строительной доски небольшой толщины. Наиболее уязвимое место в деревянных домах и банях, возведённых на опорно-столбчатом, свайном или свайно-винтовом фундаментах. Прогрызть 25-миллиметровую доску гораздо проще, чем 50-миллиметровый брус в обвязке.
Гидроизоляция. Настилается на черновой пол, и служит для защиты утеплителя от влаги и продувания снаружи. Страдает сразу же после чернового пола, не являясь преградой для мышей. Конечно же, будучи прогрызённой, ветро-влагозащитная мембрана становится практически бесполезной.
Утеплитель. Несмотря на общепринятое заблуждение, для грызунов не является чем-то съедобным. Однако та же базальтовая вата легко разрушается грызунами, и используется для обустройства «дома в доме». Когда в полу брусового дома заселяются мыши, об энергоэффективности приходится забыть.
Пароизоляция. Предназначена для защиты утеплителя от влаги, которая в виде паров имеется в жилых помещениях. Не страдает от мышей, если их целью не стали такие помещения, как кухня или кладовая (где есть чем поживиться).
Чистовой настил. Страдает от мышей обычно там, где не видно. Грызуны трусливы, а потому пробираются в дом в углах, за мебелью и так далее. Обычно их сначала слышно, и только потом уже видно.

В стенах дома и бани из бруса мыши заводятся не всегда. Обычно это происходит в тех случаях, когда деревянная постройка утепляется дополнительно снаружи или изнутри. В бане из бруса это делается практически по умолчанию при отделке парной. Тем не менее, попадают грызуны внутрь, как правило, через полы и нижнюю обвязку.

Как с грызунами бороться бесполезно?

Учитывая рассмотренное выше устройство перекрытий в брусовых домах и банях, можно сразу же сказать, что такие средства, как кошка, мышеловка или яд — большой пользы не принесут. Во многих случаях, когда грызуны основательно заселились в полах, подобные способы борьбы не помогают справиться с проблемой даже временно. А это значит, что нужны более радикальные меры. К счастью, они есть, и не являются чем-то сверхновым.

Металлическая сетка для защиты от грызунов

Именно сварная металлическая сетка с мелкой ячейкой — это уже серьёзная преграда для любых грызунов, включая тех, которые побольше и позубастей, чем мыши. Размер ячейки сетки составляет обычно не более 6 мм, что необходимо для защиты от самых мелких особей. В домах и банях на свайном фундаменте такой сеткой зашивается весь черновой пол.

Если же основание плитное или ленточное — достаточно защитить нижнюю обвязку. Исключением являются только те случаи, когда дом или баня обшиты снаружи. Такая отделка превращает постройку в уязвимую к грызунам, а потому сеткой обивается 30-50 см стены (под отделкой), а также ею закрываются воздуховоды для удаления конденсата.

Какой утеплитель не грызут крысы и мыши

Утеплитель – необходимый материал, который используется при постройке домов, повышающий теплоизоляцию. Его применение позволяет сократить расходы на обогрев помещений в зимний период. При составлении сметы важно учитывать не только технические характеристики материала, но и отношение к нему грызунов. Зная, какой утеплитель не грызут мыши и крысы, можно избежать лишних ремонтных работ в будущем.

Едят ли грызуны утеплитель

Строение зубов и их особенности заставляют грызунов постоянно точить свои резцы. Если животные не будут этого делать, они попросту не смогут открывать рот, так как длинные зубы будут мешать. Существует и еще одна причина, почему мыши покушаются на утеплитель. Маленькие кусочки материала хорошо подходят для обустройства гнезда для детенышей крыс и мышей.

Отвечая на вопрос, какой утеплитель не едят мыши и крысы, можно с уверенностью сказать, что любой. Хвостатые животные априори не могут съесть стройматериал. Он не представляет для них никакой питательной ценности. Используют они его лишь в качестве «пилки» для зубов, для постройки гнезд.

На заметку!
Крысы и мыши обгрызают хрупкий утеплитель, проделывают в нем свои ходы, тем самым нарушая целостность конструкции.

Излюбленные утеплители грызунов

Есть ряд утеплителей, которые крысы грызут с наибольшей охотой.

Пенопласт

Крысы и пенопласт
Пенопласт – один из самых популярных утеплителей. Основные его достоинства: легкость, простота монтажа, доступная цена. Не оставляют его без внимания и грызуны. Крысы и мыши не едят пенопласт, но способны прогрызть его, обустроить в пустотах возле него свои жилища, в которых они будут благополучно обитать и плодиться. Мыши буквально крошат материал на мелкие кусочки, растаскивая их по своим норам. Особенно нравится мышам грызть пенополистирол, который характеризуется низкой плотностью.

Защита пенопласта может обойтись дороже самого стройматериала. Чтобы предотвратить посягательства вредителей, листы обтягивают мелкой металлической сеткой. Обработать пенопласт можно медным купоросом или борной кислотой. Ликвидировать дыры, проделанные крысиными или мышиными зубами, удается с помощью монтажной пены.

Из всех видов пенопласта наиболее устойчивы листы с мелкими порами, но это не означает, что мышам или крысам они не по зубам. Просто этот материал чуть-чуть дольше будет сохранять свою целостность.

На заметку!
Раскладывать отраву для крыс и мышей под обшивкой – весьма рискованная затея. Если гибель животного настигнет непосредственно под ней, тело будет разлагаться и источать отвратительный запах. В зависимости от температуры и уровня влажности процесс может продолжаться несколько месяцев. Для извлечения смердящего трупа придется демонтировать всю конструкцию.

Разновидность пенопласта – экструдированный пенополистирол. В отличие от первого он отличается повышенной сопротивляемостью к влаге. Его применяют для утепления чердачных, подвальных помещений. И хоть плотность материала выше, чем у традиционного пенопласта, мыши охотно грызут его, хоть и не селятся в нем.

Пенофольгированный полиэтилен

Материал представляет собой вспененный целлофан, покрытый одним или двумя слоями алюминиевой фольги. Обладает хорошей теплоизоляцией, не пропускает воздух, влагу. С его помощью утепляют стены с внутренней стороны. Главный недостаток – возможность появления грибка, плесени, а также полная «беспомощность» перед вредителями.Утеплители которые грызут крысы

Каменная вата

Каменная вата – волокнистый теплоизоляционный материал. Производится из горных пород, но чаще всего используется базальт. Для внутреннего и наружного утепления домов обычно применяется базальтовая вата высокой плотности. Она характеризуется низкой теплопроводностью, влагоустойчивостью, заглушает звуковые волны, не горит.

Согласно заверениям производителей, в состав добавлены специальные добавки и ее не грызут грызуны. Однако, как свидетельствуют отзывы, на практике дело обстоит иначе. Минеральная вата изредка подвергается атакам вредителей, они кусают ее и даже могут поселиться в ней.

По поводу стекловаты мнения расходятся. В советские времена считали, что этот утеплитель боятся грызуны и он представляет для них смертельную опасность. Сейчас же можно наблюдать, как крысы в стекловате обустраивают свои жилища и прекрасно в них себя чувствуют. Досконально установить причины, почему животные изменили отношение к материалу, пока не удается. Есть две гипотезы. Согласно одной из них, стекловата производится по другой технологии и отличается по составу от своего советского предшественника. Другая версия гласит, что мыши и крысы адаптировались, мутировали, и теперь стекловата больше не пугает вредителей.

Устойчивые материалы

Устойчивые к грызунам материалы
Преимущественно утеплитель, в котором не живут грызуны неорганического происхождения, отличается плотной и твердой структурой.

Керамзит

Один из самых популярных стройматериалов, который не едят мыши. Представляет собой легкие, пористые фракции, полученные путем обжига легкоплавной глины. Широко применяется для утепления фундамента, перекрытий, кровли. Нередко используется при обустройстве сухой стяжки пола. Это экологически чистый сыпучий материал, который не выделяет вредных токсических соединений.

На заметку!
Размеры гранул варьируются в диапазоне 5-45 мм. Даже если мышь и попадет в такой утеплитель, ее передвижение будет затруднено. Перед укладкой керамзита поверхность часто накрывают целлофановой пленкой, чтобы обеспечить надежную гидроизоляцию. Находясь под слоем утеплителя, грызун будет испытывать недостаток воздуха, а твердость гранул не позволит попробовать их на зуб.

Эковата

Еще один вид утеплителя, который не пришелся по вкусу грызунам. Эковата – относительно новый материал, достоинства и недостатки которого вызывают много споров. Изготавливается на основе целлюлозы, в которую добавляют специальные добавки, присадки, препятствующие возгоранию. Минеральная вата, известная своими шумоизоляционными свойствами, уступает эковате по данному показателю в четыре раза. Наносится утеплитель ручным способом или посредством установок, заполняя все щели и не оставляя при этом стыков

Эковата могла бы стать прекрасным материалом для грызунов, в котором они бы мирно сосуществовали. Но производители предусмотрели подобный сценарий и обогатили состав утеплителя антисептиками, к одним из которых относится ортоборная кислота и борные соли, провоцирующие обезвоживание организма грызуна, удушье и его последующую гибель.

Пеностекло

Материл представлен в сыпучем виде или в плитах для сооружения жестких конструкций. Один из самых дорогих утеплителей. Заявленный срок эксплуатации до 100 лет. Изготавливается из отходов стекла посредством вспенивания углеродной смесью. В результате образуются стеклянные ячейки, плотно прилегающие друг к другу.

Стекловолокно отличается хорошими теплоизоляционными свойствами, удобством монтажа, не боится влаги, материал абсолютно устойчив к грызунам. Даже, если мышь и попытается прокусить утеплитель, она сразу же поранит ротовую полость и на этом ограничит свои притязания.

Пенобетон

Материал легче по весу, чем бетон. Технические характеристики близки к газобетону. Ячеистый материал выпускается в сыпучем виде, которым заполняют необходимые полости и в виде блоков.

На заметку!
Невзирая на его недостатки: плохо штукатурится и боится влаги, отчего при неправильном монтаже возможно появление плесени, пенобетон не боится грызунов. Используя данный материал, можно не переживать по поводу повреждений, которые способны нанести крысы и мыши.

Фанера

Грызут ли фанеру и линолеум грызуны
Едят или грызут фанеру грызуны, такой вопрос также беспокоит людей, планирующих утеплить дом на этапе строительства или эксплуатации жилого помещения. Способ изготовления, строение слоев ДВП, ДСП, ОСБ пли не позволяет мышат и крысам нанести серьезные повреждения данным материалам.

Ротовой аппарат грызунов приспособлен грызть поперек. В фанере же идет чередование продольных и поперечных слоев. Даже если мыши удалось прогрызть первый слой, то следующий становится невыполнимой задачей.

Линолеум

Хоть линолеум не входит в список утеплителей, однако именно это напольное покрытие остается самым востребованным и популярным при обустройстве и утеплении пола. Утепленный линолеум может укладывать как на специальные подложки, так и на голый бетон, деревянное основание. При выборе подложек стоит обращать снимание на такие, которые не привлекают грызунов.

Способы защиты утеплителя

Если в теплоизоляционном слое стала развиваться популяция грызунов, то необходимо срочно предпринимать меры. Защитить утеплитель помогут следующие мероприятия:

поврежденный материал заменить новым, который не по зубам грызунам;
в обнаруженные ходы, полости, проделанные мышами, необходимо засыпать битое стекло, древесную стружку, которую предварительно обрабатывают медным купоросом;
чтобы у грызунов не было стимула селиться в утеплителе, следует обеспечить им отсутствие источника питания;
во избежание проникновения животных извне на этапе строительства в полости полов в подвале засыпают измельченное стекло или сыпучий утеплитель, вдоль фасада обустраивают ленточный фундамент.

Ультразвуковой отпугиватель мышей Защита на 360 градусов

Описание

Ультразвуковой отпугиватель мышей Thanos® на 360 градусов поможет вам быстро и эффективно избавиться от мышей, крыс, белок и других вредителей с помощью мощных атакующих волн.

Самая современная технология

Это ультрасовременное устройство использует звуковые волны разной длины для отпугивания всех видов грызунов и других нежелательных вредителей из вашего дома. И самое приятное то, что он делает это гуманно, не убивая их.

Мощная технология звуковой атаки мгновенно отпугивает грызунов
Выберите один из четырех режимов работы: TEST, TRANS, ULTRA и DUO
В тестовом режиме устройство стимулирует звуки, которые слышат вредители
В режиме ULTRA отпугивает мыши, тараканы, блохи, сверчки и муравьи
В режиме TRANS излучаются волны давления, отпугивающие крыс и белок
Выберите режим DUO для комбинированных звуковых волн, отпугивающих всех вредителей

Защита на 360 градусов
98
8
8 Этот ультразвуковой репеллент на 360 градусов не требует, чтобы вы направляли его в определенном направлении; вам просто нужно поместить его на сухую плоскую поверхность в беспрепятственной обстановке.

Три ультразвуковых динамика излучают атакующие волны во всех направлениях, обеспечивая полную защиту вашей семьи на 360 градусов.

100% нелетально для грызунов

Ультразвуковой репеллент Thanos® 360 градусов отпугивает грызунов, не причиняя им вреда.

Традиционные яды и ловушки с защелками смертельны, поэтому вам остается избавиться от любых мертвых тварей в вашем доме. Это неприятная работа, а также потенциально опасная для здоровья.

К счастью, с нашим устройством в вашем доме никогда не будет мертвого грызуна.

Вместо этого, Thanos® 360 Degree Ultrasonic Mouse Repellent будет отпугивать грызунов и насекомых, не пуская их в ваш дом, пока устройство работает.

100% безвреден для человека
Ультразвуковой репеллент Thanos® 360 Degree не повлияет на здоровье вас или ваших близких.

Абсолютно не используются смертоносные химикаты, что делает его разумной альтернативой опасным ядам. В результате его совершенно безопасно использовать для всей семьи, включая ваших детей.

Простота в использовании
Использовать ультразвуковой репеллент Thanos® 360 Degree Ultrasonic Mouse Repellent легко и просто.

Вам нужно только подключить его, и он сразу же начнет издавать переменные звуковые волны, отпугивающие грызунов.

Используя высокотехнологичный 360-градусный звуковой поток, репеллент Thanos® позаботится о любых грызунах на площади около 100 м2 или 1076 кв. футов.

Для достижения максимальной эффективности убедитесь, что Thanos® 360 Degree Ультразвуковой отпугиватель мышей беспрепятственно сидит немного над землей.Поскольку это электронное устройство, его следует беречь от влаги.

Экологически чистая борьба с мышами | Викинг Борьба с вредителями

Поздоровайтесь с SMART Home Защита от грызунов

Исторически сложилось так, что домашняя борьба с грызунами заключалась в том, чтобы делать обоснованные предположения на основе данных о том, где крысы или мыши могут или не могут быть активными. С технологией Anticimex SMART нам больше не нужно гадать. Мы узнаем.

Шаг 1: Анализ и планирование

Мы проверяем дом и документацию, включая чертежи и чертежи, и задаем вам ряд вопросов.После тщательного анализа мы определяем уникальную оптимальную настройку в зависимости от вашей ситуации.

Шаг 2: Установка и подключение

Мы устанавливаем самые современные многоцелевые технологии по всему дому.

Шаг 3: Мы обслуживаем, вы отдыхаете

Текущее обслуживание включает в себя физический осмотр, опорожнение и перемещение ловушек, а также анализ. Мы действуем быстро, когда это необходимо — просто расслабьтесь и расслабьтесь.

Будущее за электроникой

Технология Anticimex SMART состоит из Smart Connect Minis и Smart Eye Mini , которые взаимодействуют друг с другом и обратно в штаб-квартиру.Используя инфракрасные датчики, они сообщают нашим специалистам по борьбе с вредителями, где давление мыши является высоким, поэтому они знают, где наиболее эффективно разместить ловушки.

Благодаря инновационной технологии SMART от Anticimex вам никогда не придется даже думать о мышах в вашем доме, не говоря уже о том, чтобы удалить их из самодельной ловушки.

Smart Connect Minis

Связь SMART начинается с Smart Connect Mini. Он обменивается данными по беспроводной сети через ячеистую сеть (БЕЗ использования вашего домашнего Wi-Fi или камер), отправляя важную информацию об активности грызунов в центр данных, расположенный в офисе Viking.Smart Connect Mini в сочетании с Smart Eye Mini может подключать до 200 устройств по всему дому.

Smart Eye Minis

Датчики Smart Eye Mini — это водонепроницаемые и пыленепроницаемые устройства, которые можно размещать на стенах, ящиках для приманок, на чердаках, под раковинами, в подвалах и в любом другом месте, которое соответствует вашим личным потребностям. Они могут обнаруживать мышей на расстоянии до 6,5 футов. Smart Eye Mini имеет три настройки сенсора: «на приманку», «ближний» или «дальний». Это обеспечивает более надежные данные, гарантирующие, что в вашем доме не будет вредителей.

Пришло время приобрести SMART

Anticimex SMART — это интеллектуальная, безвредная для окружающей среды система борьбы с вредителями, которая следит за тем, чего вы не хотите видеть. Он предсказывает и предотвращает дорогостоящее нашествие мышей в вашем доме, потому что это глаза и уши вашего специалиста по борьбе с вредителями, когда он не может быть там. Технология SMART позволяет хранить ценные вещи и семейные реликвии в любом месте дома, не беспокоясь о том, что их могут повредить мыши.

Как работает Anticimex SMART?

Anticimex SMART состоит из Smart Connect Minis и Smart Eye Minis.Устройства определяют, где существует давление мыши. При обнаружении движения данные сохраняются и доступны специалистам Viking для анализа, и мы примем меры для устранения проблемы. все обмениваются информацией друг с другом и обратно в центральный офис Viking.

Когда Anticimex SMART станет доступен клиентам Viking Pest?

Продукты Anticimex SMART теперь доступны для бытовых клиентов! Anticimex SMART — это наиболее эффективное и экологически безопасное средство от грызунов, которое вы можете получить для защиты своего дома в Нью-Джерси, Мэриленде, Делавэре или Пенсильвании.Вас интересует Anticimex SMART? Свяжитесь с Viking Pest сегодня по телефону 800-618-2847, чтобы узнать больше об SMART и о том, как эта передовая технология изменит ваш дом.

Активация GPR37 в макрофагах обеспечивает защиту от вызванного инфекцией сепсиса и болевого поведения у мышей

NPD1 и GPR37 защищают в мышиных моделях сепсиса регулируют сепсис у мышей дикого типа (WT) и
Gpr37 ^-/- после LPS и L.м . инфекция. Чтобы избежать путаницы аббревиатуры PD1 с белком запрограммированной смерти 1 (PD-1), мы использовали NPD1 для протектина D1 в этом исследовании. У мышей дикого типа внутрибрюшинная (ИП) инъекция 10 мг/кг ЛПС вызывала гибель 94% мышей через 7 дней (рис. 1а, б). Эта смертность была снижена за счет предварительной обработки NPD1 (500 нг внутрибрюшинно; P = 0,0043, рис. 1b). Примечательно, что этот защитный эффект NPD1 был полностью устранен у мышей Gpr37 ^-/- ( P = 0,0080, рис.1б). Как и ожидалось, LPS также приводил к сепсис-индуцированной гипотермии у мышей WT через 24 часа после введения, но эта гипотермия была значительно защищена NPD1 у мышей WT ( P = 0,0019, рис. 1c). Примечательно, что NPD1 не предотвращал гипотермию у нокаутированных мышей ( P = 0,0002, рис. 1c). Мы также исследовали сывороточные уровни провоспалительного цитокина IL-6, который рассматривается как маркер и медиатор, вносящий вклад в патофизиологию сепсиса ¹⁸ . ЛПС приводил к 1000-кратному увеличению уровня ИЛ-6 в сыворотке, и это увеличение было значительно снижено под действием NPD1 у мышей WT ( P = 0.0022, рис. 1d), но не у мышей Gpr37 ^-/- (рис. 1d).
Рис. 1: Защита LPS- и L. monocytogenes--индуцированного сепсиса с помощью GPR37.
a Экспериментальный проект модели LPS. Мышам дикого типа (WT) и мышам Gpr37 ^-/- вводили внутрибрюшинно (ИП) инъекцию ЛПС (10 мг/кг) вместе с обработкой носителем или NPD1 (500 нг, внутрибрюшинно). b Кривые выживания мышей WT и Gpr37 ^-/-, получавших носитель или NPD1.В скобках указаны размеры выборки. c Динамика ректальной температуры у мышей дикого типа и Gpr37 ^-/-. Размеры выборки указаны в столбцах. d Уровни IL-6 в сыворотке у мышей дикого типа и Gpr37 ^-/- мышей ( n = 4/группа). e Экспериментальный дизайн для инокуляции Listeria monocytogenes ( L. m , 10 ⁷, IP) мышам дикого типа и Gpr37 ^-/- вместе с обработкой носителем или NPD134 .П.). f Кривые выживания мышей WT и Gpr37 ^-/-, получавших NPD1 или носитель. В скобках указаны размеры выборки. г Динамика ректальной температуры у мышей дикого типа и Gpr37 ^-/-, получавших носитель или NPD1. ч Уровни IL-6 в сыворотке у мышей дикого типа и Gpr37 ^-/- через 6 ч после L . м закачки ( n = 6). i – k Уровни цитокинов в культуральной среде pMΦ от мышей WT или Gpr37 .Культуры pMΦ обрабатывали ЛПС (1 мкМ, 37 °C, 12 ч) или л. m (1 × 10 ⁴ КОЕ, 37 °C, 12 ч) вместе с носителем (Veh.) или 30 нМ NPD1. (30 нМ). ELISA тестировали на ФНО-α ( и ), ИЛ-1β ( и ) и ИЛ-6. k Данные выражены как среднее ± s.e.m. и статистически проанализированы с помощью критерия Мантеля-Кокса ( b , f ), двухфакторного ANOVA с последующим апостериорным тестом Тьюки ( c , d , h ) апостериорным тестом Бонферрони ( – i ). к ).

Чтобы подтвердить эти выводы с использованием более физиологической модели сепсиса, мы заразили мышей I.P. инъекция 1 × 10 ⁷ КОЕ Listeria monocytogenes ( L.m ., рис. 1e), грамположительной бактерии, вызывающей листериоз у млекопитающих-хозяев. Мы обнаружили, что мыши WT также демонстрировали высокую смертность (90%) через 7 дней после L.m . инфекция, которая была защищена NPD1 ( P = 0,0396, рис. 1f). Эта защита была снята у мышей Gpr37 ^-/- (WT + NPD1 vs Gpr37 ^{– /-} + NPD1, P 0.<0001, Gpr37 ^{− / −} vs Gpr37 ^−/− + NPD1, P = 0,5525, рис. 1f). Примечательно, что мы также наблюдали значительное увеличение выживаемости у мышей WT, получавших носитель, по сравнению с мышами Gpr37 ^{-/ –}, получавших носитель ( P = 0,0217), что позволяет предположить, что GPR37 может обеспечивать защиту в отсутствие экзогенно вводили NPD1 (рис. 1f), возможно, из-за присутствия эндогенных активаторов GPR37. л.м . инфекция также приводила к гипотермии у мышей WT через 6 часов после инокуляции, и этот эффект был значительно защищен лечением NPD1 у мышей WT ( P = 0,0433, рис. 1g). Эффект NPD1 у нокаутированных мышей был полностью устранен ( P < 0,0001, рис. 1g). л.м . также привело к 500-кратному увеличению уровней IL-6 в сыворотке, которое было ослаблено лечением NPD1 у мышей дикого типа ( P = 0,0255, рис. 1h). Это ослабление было отменено у нокаутированных мышей ( P < 0.0001, рис. 1h). В совокупности эти данные указывают на то, что NPD1 обеспечивает защиту от инфекции и септической смерти зависимым от GPR37 образом.

В предыдущем исследовании мы продемонстрировали, что NPD1 активирует GPR37 в макрофагах ¹⁷ . Чтобы определить, придают ли макрофаги защитный эффект NPD1 против сепсиса in vivo, мы обработали перитонеальные макрофаги (pMϕ) мышей WT и Gpr37 -KO с помощью NPD1 (30 нМ) и измерили провоспалительные цитокины в ответ на введение носителя. ЛПС (1 мкМ), или л.м . (1 × 10 ⁴ КОЕ). Мы наблюдали как LPS, так и L.m . резко увеличилась секреция TNF-α, IL-1β и IL-6 в культуральной среде, и это увеличение ингибировалось обработкой NPD1 в WT, но не в макрофагах KO (рис. 1i–k). Эти результаты позволяют предположить, что NPD1 может действовать на макрофаги, подавляя системный цитокиновый шторм во время сепсиса.

GPR37 защищает от малярийной инфекции

Малярия, инфекционное заболевание, вызываемое простейшими паразитами рода Plasmodium , остается основной причиной смерти во многих регионах мира, согласно Всемирному докладу о малярии за 2019 г. (https:// www.who.int/malaria/publications/world-malaria-report-2019/en/). Чтобы проверить, обеспечивает ли GPR37 защиту от малярийной инфекции, мы инокулировали мышей WT или Gpr37 ^-/- 1 × 10 ⁴ спорозоитов Plasmodium berghei ( P.b) внутривенно (I.V) (рис. 2а). Примечательно, что этот вид Plasmodium заражает только мышей и имеет течение заболевания, аналогичное паразиту Plasmodium falciparum , который вызывает тяжелые инфекции малярии у людей ¹⁹ .Прививка паразита вызывала ~ 50% смертность у мышей WT через 10 дней с небольшим последующим изменением уровня смертности через 21 день (рис. 2b). Напротив, P.b .-инфицированные мыши Gpr37 ^-/- показали аналогичную смертность через 10 дней, но гораздо более высокую смертность через 21 день ( P = 0,0037, по сравнению с мышами WT), достигнув общей выживаемости. 0% (рис. 2b). По сравнению с моделями LPS и listeria изменение температуры тела после P.b было незначительным.инфекция, и у мышей Gpr37 ^-/- наблюдалась значительная гипотермия на более поздних стадиях заболевания (17-й день, P < 0,0001, по сравнению с мышами WT, рис. 2c). Мы также наблюдали значительное увеличение потери веса у нокаутированных мышей через 14 дней после заражения ( P = 0,0048 по сравнению с WT; дополнительная рис. 1a). Кроме того, P.b .-инфицированные мыши Gpr37 ^-/- демонстрировали значительно более высокие уровни IL-6 в сыворотке через 10 дней после инокуляции ( P < 0.0001, по сравнению с мышами дикого типа, рис. 2d), хотя уровни TNF-α и IL-1β в сыворотке не изменились (дополнительный рисунок 1b, c). Важно отметить, что между мышами WT и Gpr37 ^{– /-} не наблюдалось различий в доле макрофагов, B-клеток, T-клеток или нейтрофилов в стационарных условиях (дополнительный рисунок 1d – f).
Рис. 2: GPR37 обеспечивает защиту от малярийной инфекции.
a Экспериментальный план для мышиной модели малярийной инфекции.WT и Gpr37 ^-/- мышам вводили спорозоиты Plasmodium berghei ( P.b .) (10 ⁴, внутривенно), и измеряли выживаемость, ректальную температуру и сывороточный IL-6 как результаты инфекции. . b Кривые выживания мышей WT и Gpr37 ^-/-. В скобках указаны размеры выборки. c Изменение ректальной температуры во времени у мышей WT и Gpr37 ^-/-. d Уровни IL-6 в сыворотке у мышей дикого типа и Gpr37 ^-/- мышей ( n = 5/группа). e Проточный цитометрический анализ образцов периферической крови, взятых у мышей дикого типа и Gpr37 ^-/- 10 дней после P.b . инфекция. Инфицированные эритроциты (iRBC) инкубировали с красителем Hoechst (1 мкг/мл) и CD45-FITC. Левая верхняя панель: стратегия стробирования для удаления дебриса, агрегированных клеток, CD45 ⁺ лейкоцитов и мелких частиц (<3 мкм). Левая нижняя панель: репрезентативные изображения эритроцитов, отсортированных от мышей WT или Gpr37 ^-/- через 10 дней после P.б . прививка. Правая панель: количественная оценка анализа проточной цитометрии в указанные моменты времени, показывающая долю иэритроцитов (Hoechst ⁺ эритроцитов/общее количество эритроцитов; 1 × 10 ⁶ эритроцитов, проанализированных на образец, n = 5). f Окрашивание по Гимзе выполняли для обнаружения iRBC у мышей дикого типа и Gpr37 ^-/- через 10 дней после заражения P.b . На левой панели показаны репрезентативные изображения. На правой панели показан количественный анализ iRBC, окрашенных по Гимзе ( n = 13/группа).Масштабная линейка, 20 мкм. Данные выражены как среднее ± sem. и статистически проанализированы с помощью теста Мантеля-Кокса ( b ), двухфакторного ANOVA с последующим апостериорным тестом Бонферрони ( c – e ) и непарным двусторонним t -критерием ( f ).

Вызывающие малярию Plasmodium паразиты проходят стереотипное течение болезни, начиная с печеночной стадии, за которой следует стадия передачи крови, которая характеризуется инфекцией эритроцитов (эритроцитов), что приводит к потере эритроцитов и анемии (рис.2а, схема справа) ²⁰ . Мы измерили развитие P.b . спорозоитной инфекции на стадию крови с использованием нескольких параметров (рис. 2b–f), включая проточную цитометрию (рис. 2e) и окрашивание по Гимзе (рис. 2f). Инфицированные эритроциты выявляли путем инкубации с красителем Hoechst, который окрашивает P.b .-инфицированные эритроциты, поскольку в эритроцитах отсутствуют ядра. Эритроциты также были охарактеризованы как клетки CD45 ^–, выделенные из периферической крови. Анализ цельной крови мышей дикого типа методом проточной цитометрии выявил уровень инфицирования эритроцитами в 23% через 10 дней после введения P.б . спорозоитов, но этот показатель был значительно выше у нокаутированных мышей (61%, P = 0,0014, рис. 2e). Окрашивание по Гимзе также подтвердило увеличение коэффициента инфицирования эритроцитами у нокаутированных мышей ( P = 0,0323 по сравнению с WT, рис. 2f). В совокупности эти результаты свидетельствуют о том, что GPR37 может защищать от малярийной инфекции и ее последствий.

Артесунат взаимодействует с GPR37 и усиливает фагоцитоз макрофагов. природные соединения (10 мкМ, дополнительный рис.2а, дополнительная таблица 1). Все три анализа выявили артесунат (ARU), производное артемизинина (ART), в качестве потенциального лиганда (дополнительная рис. 2a, b). Примечательно, что ARU оказывает прямое противопаразитарное действие на паразитов
Plasmodium и является препаратом 1-й линии для лечения тяжелой малярии, а в сочетании с мефлохином представляет собой комбинированную терапию на основе артемизинина, рекомендованную ВОЗ для неосложненной P. falciparum лечение малярии ²¹ . GPR37-зависимая активность наблюдалась для ARU, но не для АРТ или известного активного метаболита АРТ дигидроартемизиновой кислоты (ДГК) (дополнительная рис.2б). Основываясь на этих выводах, мы провели анализы наложения, чтобы идентифицировать лиганды-кандидаты для GPR37, при этом предполагаемые партнеры по связыванию были иммобилизованы на нитроцеллюлозной мембране и инкубированы с очищенным человеческим GPR37 (дополнительная рис. 2c). Были протестированы Honokiol, ART и ARU вместе с ДМСО в качестве отрицательного контроля. Интересно, что мы наблюдали сильное и дозозависимое связывание ARU с GPR37 (дополнительная рис. 2c).

Далее мы провели компьютерное моделирование возможного взаимодействия между ARU и GPR37.Моделирование гомологии GPR37, характерного GPCR, проводили с использованием кристаллических структур М2-мускаринового ацетилхолина человека и человеческих дельта-опиоидных рецепторов в качестве матриц. Моделирование молекулярной динамики предполагает, что ARU взаимодействует с GPR37 в Q535, R401 и R418 с образованием водородных связей (рис. 3a–c). Аналогичный анализ предполагает, что NPD1 образует водородные связи с остатками R418, Y432, E508 и Q535 на GPR37 (рис. 3d–f). Примечательно, что ARU и NPD1 имеют одни и те же сайты связывания R418 и Q535 на GPR37 (рис.3а–е). Просаптид Tx14 является известным пептидным агонистом GPR37 ¹⁷ . Интересно, что нам не удалось подтвердить связывание Tx14 с сайтом связывания NPD1 GPR37, что побудило нас искать другие предполагаемые сайты связывания. Мы обнаружили, что вторая внеклеточная петля (ECL2) является предполагаемым сайтом связывания, а дополнительные эксперименты по докингу показали, что Tx14 расположен на дистальной стороне ECL2, а Tx14 взаимодействует с GPR37 в точках Q402 и Y339 с образованием водородных связей (рис. 3g–i). ). В целом, наши исследования прогнозирования связывания показывают, что взаимодействие водородной связи GPR37 с Q535 и R418 стабилизирует связывание ARU и NPD1, и эти специфические взаимодействия в сайте связывания лиганда могут различать аналоги ARU, такие как ART и дигидроартемизинин (DHA).Кроме того, Tx14 может взаимодействовать с GPR37 через различные сайты связывания.
Рис. 3: Компьютерное моделирование предсказывает различные сайты стыковки для каждого лиганда GPR37.
Режимы стыковки, показывающие потенциальные сайты связывания в GPR37 для нейропротектина D1 (NPD1, a – c ), артесуната (ARU, d – f ) и Tx14 ( g – ) . a , d Двухмерная карта взаимодействия для ARU ( a ) и NPD1 ( d ), закрепленная в сайте связывания модели GPR37. b , e , h Результаты моделирования молекулярной динамики (MDS) для ARU ( b ), NPD1 ( e ) и Tx14 ( h ). По оси Y показано среднеквадратичное отклонение (график среднеквадратичного отклонения) комплекса белок-лиганд за время 100 наносекунд. Во время МДС динамическая устойчивость комплекса GPR37–ARU рассчитывалась с использованием поправок на среднеквадратичное отклонение. Значение RMSD белкового остова стабилизировалось на уровне 4 Å через 23 нс, а RMSD ARU подскочило до 5 Å примерно через 25 нс, а затем показало устойчивое увеличение до 7 Å до конца моделирования.Белковый остов GPR37 имел среднеквадратичное отклонение 4 Å в течение 80% времени траектории моделирования, что указывает на то, что GPR37 оставался стабильным. Значение RMSD NPD1 стабилизируется между 4 и 6 Å через 25 нс. c , f , i Трехмерное (3D) представление ARU ( c ), NPD1 ( f ) и Tx14 ( i ). г Смоделированная структура Tx14 (оранжевая). Докинговые конформации соединений NPD1 и ARU с наивысшими баллами в активном центре гомологической модели GPR37 были проанализированы с точки зрения ключевых остатков, участвующих во взаимодействии, и их предпочтительного способа связывания.Все полученные докинговые комплексы были дополнительно проанализированы. NPD1 образует водородную связь с остатками R418, Y432, E508 и Q535 в GPR37, тогда как ARU образует водородную связь с R401, R418 и Q535. Tx14 образует водородные связи с Q402 и Y339.

Ранее мы продемонстрировали, что активация GPR37 с помощью NPD1 способствует разрешению вызванного зимозаном воспаления путем усиления фагоцитоза MΦ ¹⁷ . Мы пришли к выводу, что если ARU также действует как лиганд GPR37, он должен оказывать аналогичные GPR37-зависимые эффекты в макрофагах.С этой целью мы исследовали, может ли ARU усиливать фагоцитоз периферических MΦ (pMΦ) с использованием флуоресцентно меченных частиц зимозана. Мы наблюдали, что обработка ARU (30 мкМ в течение 30 мин) увеличивала поглощение частиц зимозана pMΦ ( P = 0,0005, рис. 4a, b), и этот эффект отсутствовал в pMΦ от Gpr37 ^-/- мышей. ( P = 0,0008, рис. 4а, б). Кроме того, мы завершили этот эксперимент, используя вместо L.m . инкубировали с pH-чувствительным красителем pHrodo, чтобы проверить, может ли ARU способствовать pMΦ-опосредованному клиренсу живых бактерий (1 × 10 ⁵ КОЕ).Точно так же мы наблюдали, что ARU способствует pMΦ фагоцитозу L.m ., и этот эффект был устранен в pMΦ, культивируемом из Gpr37 ^-/- мышей ( P < 0,0001, рис. 4c, d). Чтобы определить, изменяют ли ARU или NPD1 бактериальный клиренс in vivo, мы использовали несколько дополнительных мер. Во-первых, мы измерили бактериальную нагрузку в перитонеальной жидкости (PF) у мышей WT или Gpr37 ^-/- через 24 ч после заражения L.m . Мы наблюдали, что как NPD1, так и ARU существенно снижали бактериальную нагрузку при ПФ, и этот эффект исчез у мышей Gpr37 ^-/- (NPD1: P = 0.0301; ARU: P = 0,0003 для ARU; Рис. 4д, е).
Рис. 4: ARU способствует фагоцитозу макрофагов посредством GPR37.
a Репрезентативные изображения анализа фагоцитоза in vitro, в котором частицы pHrodo zymosan (1 × 10 ⁵ ) инкубировали с pMΦ от WT или Gpr37 ^{− / − мкМ, 30 мин, 37 °C). Красная флуоресценция указывает на внутриклеточное обновление, указывающее на фагоцитоз. Шкала баров: 10 мкм. b Количественная оценка фагоцитарной активности pMΦ зимозан-позитивных клеток ( n = 5/группа). c Репрезентативные изображения анализа фагоцитоза in vitro, в котором флуоресцентно меченные живые (1 × 10 ⁵ КОЕ) L.m . инкубировали с 1 × 10 ⁴ пМФ от WT или Gpr37 ^{-/ –} мышей, получавших носитель или ARU, как в ( a ). Шкала баров: 10 мкм. d Количественное определение фагоцитарной активности pMΦ флуоресцентно меченого живого L.м . ( n = 3/группа). e Репрезентативное изображение блока формирования бактериальных колоний in vivo, в котором L.m . (1 × 10 ⁷ КОЕ) инокулировали мышам WT или Gpr37 ^-/-, которым вводили носитель, NPD1 или ARU (внутрибрюшинно) через 24 часа. f Количественное определение уровня КОЕ в перитонеальной жидкости после л.м . инфекция ( n = 6 для носителя или NPD1/группа, n = 4 для ARU/группа). г Внутренняя бактериальная нагрузка в зависимости от времени после л.м . и PMφ от WT или GPR37 – / – / –} Mice Co-Culture (1 × 10 ⁵ клетки и 1 × 10 ⁴ CFU L.M ., N = 12 для контроля, N = 6 для NPD1 или ARU). ч pMΦ от WT или Gpr37 ^{– /-} мышей обрабатывали носителем или ARU (30 мкМ, 1 ч; 37°C) с последующей инкубацией с iRBC, меченными красителем pHrodo (10 ^{6 ) клетки, 1 ч, 37 °С). Проточный цитометрический анализ фагоцитоза iRBC с помощью pMΦ был выполнен путем анализа pHrodo в сочетании с чувствительным красителем к маркеру аутофагосом LC3 (см.4а). i Количественное определение пропорции LC3 ⁺ /pHrodo ⁺ pMΦ (проанализировано 10 ⁵ клеток; n = 3 мыши/группа). j Анализ методом проточной цитометрии выполняли, как описано в ( h ), вместо этого с использованием pHrodo ⁺ в сочетании с чувствительным к NOS красителем для выявления фагоцитоза. k Количественное определение доли NO ⁺ /pHrodo ⁺ pMΦ (1 × 10 ⁵ проанализированных клеток; n = 3 мыши/группа ( k ).Данные выражены как среднее ± sem. и статистически проанализированы с помощью двустороннего дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Бонферрони ( b , d ) или Тьюки ( f , g , i , k ).}

Учитывая, что л.м . может избежать уничтожения и пролиферировать внутри макрофагов и других фагоцитов, мы стремились определить, может ли активация GPR37 с помощью NPD1 или ARU усиливать элиминацию L.m . по pMΦ. С этой целью pMΦ от мышей WT или Gpr37 ^{– / –} культивировали совместно с L.м . и обработанные носителем, NPD1 или ARU, и анализы колониеобразующих единиц проводили на лизате pMΦ. Интересно, что лечение NPD1 и ARU значительно уменьшало внутренние L.m . уровни. Примечательно, что эти эффекты были устранены в pMΦ у мышей Gpr37 ^{-/ –}, которые также демонстрировали значительно более высокий внутренний L.m . по сравнению с pMΦ от мышей дикого типа (рис. 4g). Мы также измерили бактериальную нагрузку и инфильтрацию PMN в PF, печени и селезенке у мышей, получавших носитель, NPD1 или ARU, в различные моменты времени после л.м . инфекция (дополнительная рис. 3a). В то время как только NPD1 значительно снижал бактериальную нагрузку при ПФ, как NPD1, так и ARU уменьшали бактериальную нагрузку тканей в печени и селезенке с различной кинетикой (дополнительная рис. 3b – d).

Мы также измерили инфильтрацию PMN как показания L.m .-индуцированного воспаления и протестировали про-разрешающие действия NPD1 и ARU в тканях PF, печени и селезенки. Мы заметили, что L.m . инокуляция резко увеличивала уровни PMN в этих клетках и тканях мышей, получавших носитель, при этом пиковая инфильтрация PMN происходила в разные моменты времени для каждой ткани.Важно отметить, что лечение NPD1 и ARU ослабляло 90 131 L.m 90 132 .-индуцированную инфильтрацию PMN (дополнительная рис. 3e – g). Используя уравнение Гаусса, мы рассчитали ψ _max (максимальные PMN), T-ψ _max (момент времени, когда PMN достигают ψ _max), ψ50 (50% максимальных PMN) и T-ψ ₅₀. (момент времени, соответствующий уменьшению PMN на 50%), с последующим расчетом интервала разрешения (время между T-ψ _max и T-ψ ₅₀). Мы обнаружили, что интервал разрешения (Ri) существенно не отличался между группами, получавшими носитель и агонист GPR37 (носитель: 11.07 ч; NPD1: 18.00 ч; АРУ: 16,13 ч; P = 0,961 носителя по сравнению с NPD1, P = 0,9371 носителя по сравнению с ARU для PF; Дополнительный рисунок 3h), отчасти из-за существенного ингибирования инфекции NPD1 и ARU, что затрудняет просмотр пикового ответа у обработанных мышей.

Учитывая, что ARU является противомалярийным препаратом 1-й линии, и наше открытие, что ARU может способствовать GPR37-зависимому фагоцитозу макрофагов частиц зимозана и живых L.m . патогенов, мы предположили, что ARU может также способствовать MΦ-опосредованному клиренсу P.б . Макрофаги распознают инфицированные малярией эритроциты по молекулярным паттернам, ассоциированным с опасностью (DAMP), и поглощают их путем фагоцитоза, впоследствии очищая их посредством образования аутофагосом ^22,23,24,25 . Чтобы проверить, способствует ли ARU клиренсу P.b.- инфицированных эритроцитов, мы исследовали два маркера: ассоциированный с микротрубочками белок 1A/1B-легкая цепь 3 (LC3), маркер аутофагии/аутофагосомы, и оксид азота (NO), маркер для активных форм кислорода. Важно отметить, что как индукция LC3, так и продукция NO имеют решающее значение для фагоцитоза MΦ.Результаты проточной цитометрии показали, что 30 мкМ ARU увеличивали экспрессию LC3 и NO в pMΦ дикого типа, но эти эффекты были устранены в pMΦ с дефицитом Gpr37 (рис. 4h – k, дополнительная рис. 4a). Следует отметить, что мы также тестировали эффекты ARU в клеточной линии макрофагов человека THP1. После обработки ARU дифференцированные клетки THP1 демонстрировали повышенное поглощение эритроцитов человека, инфицированных P. falciparum ( P.f .), и проявляли повышенную активность LC3 и NO ( P < 0.0001 и P = 0,0164 соответственно, дополнительный рисунок 4b, c).

Артесунат защищает от сепсиса посредством GPR37

Наши данные показывают, что активация GPR37 обеспечивает защиту в различных моделях сепсиса, а ARU может связывать GPR37 и индуцировать GPR37-зависимый фагоцитоз in vitro. Основываясь на этих выводах, мы затем попытались определить, оказывает ли ARU защитное действие на LPS и L.m . модели сепсиса в отсутствие малярии. При сепсисе, индуцированном ЛПС (рис.5a), у мышей WT, получавших ARU, выживаемость значительно улучшилась по сравнению с мышами KO, получавшими ARU ( P = 0,0003, рис. 5b). Гипотермия, вызванная ЛПС, также облегчалась с помощью ARU у мышей дикого типа ( P = 0,0002, рис. 5c), но эффект ARU устранялся у нокаутированных мышей через 24 часа после инокуляции ( P < 0,0001, рис. 5c). Кроме того, по сравнению с мышами WT, получавшими ARU, нокаутированные мыши, получавшие ARU, также имели значительно более высокие уровни IL-6 ( P = 0,0009, рис. 5d). Затем мы проверили влияние ARU на L.m .-индуцированная модель сепсиса (рис. 5e). Примечательно, что ARU также улучшала выживаемость у мышей дикого типа ( P = 0,0145, рис. 5f), но эффект ARU отменялся у мышей Gpr37 -KO ( P = 0,0311, рис. 5f). ARU также защищал от L.m .-индуцированной гипотермии ( P = 0,0194, рис. 5g) и продукции IL-6 ( P = 0,0072, рис. 5h) у мышей дикого типа. Защитный эффект ARU против гипотермии был снят у нокаутированных мышей ( P = 0,0007, рис.5g), как и в модели LPS. В совокупности эти данные свидетельствуют о том, что ARU обеспечивает GPR37-зависимую защиту в различных моделях сепсиса и, таким образом, может иметь терапевтическую ценность помимо лечения малярии. Следует отметить, что ARU, по-видимому, обладает наибольшим защитным действием в L.m . модель заражения по сравнению с LPS и P.b . модели.
Рис. 5: Артесунат защищает мышей от инфекции и септической смерти в зависимости от Gpr37.
a Экспериментальный проект для проверки ARU в модели LPS.Мышам WT и Gpr37 ^-/- вводили LPS (10 мг/кг внутрибрюшинно) вместе с носителем или ARU (10 мг/кг). b Кривые выживания мышей WT и Gpr37 ^-/-, получавших носитель или ARU. В скобках указаны размеры выборки. c Динамика ректальной температуры у мышей дикого типа и Gpr37 ^-/-. Размеры выборки указаны в столбцах. d Уровни IL-6 в сыворотке у мышей WT, получавших носитель и ARU, и Gpr37 ^-/- мышей ( n = 4/группа). e Экспериментальный план для тестирования ARU на модели инфекции Listeria monocytogenes ( L.m ., 10 ⁷, IP) у мышей WT и Gpr37 ^-/-. f Кривые выживания мышей WT и Gpr37 ^-/-, получавших носитель или ARU. г Динамика ректальной температуры у мышей дикого типа и Gpr37 ^-/- у мышей L.m . заражение мышей. Размеры выборки указаны в столбцах. h Уровни IL-6 в сыворотке у мышей WT, получавших носитель и ARU, и Gpr37 ^-/- мышей ( n = 4/группа). i Экспериментальный проект для проверки ARU в P.b . (1 × 10 ⁴, внутривенно) модель инфекции у мышей WT и Gpr37 ^-/-. j Кривые выживания мышей WT и Gpr37 ^{-/ –}, получавших носитель или ARU. k Динамика ректальной температуры у мышей WT и Gpr37 ^{− / −}.Размеры выборки указаны в столбцах. l Уровни IL-6 в сыворотке у мышей WT, получавших носитель и ARU, и Gpr37 ^-/- мышей ( n = 8/группа). Данные выражены как среднее ± sem. и статистически проанализированы с помощью теста Мантеля-Кокса ( b, f , j ), двухфакторного ANOVA с последующим апостериорным тестом Турции ( c , d , g , h , k , л ).

Чтобы проверить, может ли однократное введение ARU в начале заболевания предотвратить прогрессирование заболевания малярией в нашей модели, мы прививали мышам (1 × 10 ⁴ P.b спорозоита, внутривенно) в 1-й день с последующей обработкой ARU (10 мг/кг, внутрибрюшинно, ежедневно) на 2–4-й день (рис. 5i). Эта парадигма лечения не уменьшила P.b .-индуцированную смертность у мышей дикого типа или нокаутированных мышей (рис. 5j). Вместо этого, независимо от лечения ARU, у нокаутированных мышей выживаемость была хуже, чем у мышей дикого типа. ARU защищал гипотермию у мышей дикого типа ( P = 0,0196), но не у нокаутированных мышей на 14-й день после заражения (рис. 5k). Уровни IL-6 в сыворотке через 10 дней после заражения показали разницу между необработанными мышами WT и KO ( P = 0.0128), но не между мышами WT и KO, которым вводили ARU (рис. 5l). Лечение ARU также значительно снизило процент инфицированных эритроцитов (iRBC) у мышей дикого типа ( P = 0,0494), но не у нокаутированных мышей на 10-й день (дополнительная рис. 4d, e). Хотя ни лечение одним NPD1, ни комбинированное лечение NPD1 и ARU существенно не изменили выживаемость, комбинированное лечение привело к большему снижению доли иэритроцитов (дополнительная рис. 4f–k). В совокупности этот курс лечения ARU демонстрирует умеренный защитный эффект в нашей модели малярии, хотя он не значительно улучшает выживаемость мышей дикого типа, что согласуется с предыдущими отчетами ²⁶ .

Макрофаги необходимы для защиты от малярийного сепсиса. инъекция клодронатных липосом через 2 дня после
P.b . введение спорозоитов (рис. 6а), момент времени, выбранный, поскольку спорозоиты начинают выходить из печени между 2 и 3 днями. У мышей, получавших клодронат-липосомы, наблюдалась значительно более высокая смертность после введения P.б . инфекции по сравнению с контрольными мышами, получавшими липосомы ( P = 0,0061, рис. 6b). Лечение клодронатом мышей, инфицированных P.b ., также приводило к усилению гипотермии на 10-й день ( P < 0,0001, рис. 6c) и вызывало всплеск уровней IL-6 ( P = 0,0136, рис. 6d). После клодроновой абляции макрофагов мы также наблюдали повышенный процент инфицированных эритроцитов с помощью проточной цитометрии ( P = 0,0147, рис. 6e, f). Примечательно, что мы также провели проточную цитометрию, чтобы подтвердить, что введение клодроновой липосомы успешно удаляло циркулирующие макрофаги ( P = 0.0084, рис. 6ж, з). Эти данные указывают на то, что макрофаги необходимы для защиты от малярийной инфекции. Более того, учитывая, что лечение клодронатом приводит только к временному истощению макрофагов ²⁷ , эти данные свидетельствуют о том, что макрофаги особенно важны для элиминации малярийных паразитов на ранних стадиях инфекции.
Рис. 6: Макрофаги обеспечивают защиту в P.b. мышиная модель малярии.
a Экспериментальный дизайн для истощения макрофагов после P.б . инокуляция с использованием клодронатных липосом (100 мкл внутрибрюшинно) мышам дикого типа. b Кривые выживания мышей, которым вводили контрольные липосомы или клодроновые липосомы. В скобках указаны размеры выборки. c Динамика ректальной температуры у мышей, получавших контрольную группу или клодронат-липосому. Размеры выборки указаны в столбцах. d Уровни IL-6 в сыворотке у мышей, которым вводили контрольные или клодронатные липосомы, через 10 дней после P.b . прививка ( n = 6/группа). e , f Анализ методом проточной цитометрии для определения доли P.б . инфицированные эритроциты (iRBC) через 10 дней после инокуляции, определяемые по положительному окрашиванию после инкубации с красителем Hoechst (1 мкг/мл) и отрицательному окрашиванию на краситель NO (650/670, 2 мкл). e Репрезентативные изображения результатов проточной цитометрии. (см. стратегию стробирования на дополнительном рисунке 4d). f Количественное определение иэритроцитов (Hoechst ⁺ эритроцитов/всего эритроцитов) 10 дней после P.b . прививка контрольным мышам, получавшим липосомы или клодронатные липосомы (1 × 10 ⁶ эритроцитов, проанализированных на образец, размеры образцов указаны в скобках). г Репрезентативные цитометрические изображения перитонеальных макрофагов (Cd11b ⁺ /F4/80 ⁺ популяция) через 5 дней после введения контрольной липосомы или клодроновой липосомы, как в ( a ) ( группа n ≉3/мыши) ; 1 × 10 ⁵ клеток проанализировано на образец) со стратегией гейтирования. h Количественное определение перитонеальных макрофагов у контрольных мышей, которым вводили липосомы или клодроновые липосомы. Данные выражены как среднее ± sem. и статистически проанализированы с помощью критерия Мантеля-Кокса ( b ), двухфакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Бонферрони ( c , d ) или непарного двустороннего t -теста ( f , ч ).

Адаптивный перенос макрофагов, обработанных ARU или NPD1, облегчает сепсис и малярию Gpr37
^-/- мыши, 2 дня после P.b . инокуляция спорозоитов (рис. 7а). Перед переносом pMΦ предварительно обрабатывали (примировали) ARU (30 мкМ), NPD1 (30 нМ) или носителем (1% ДМСО) в течение 24 ч.Трансплантация Gpr37 -дефицитных MΦ с предварительной обработкой ARU не улучшала выживаемость; все мыши погибли через 18 дней после введения P.b . инфекции (рис. 7b). Примечательно, что средний день выживания увеличился с 13,5 до 18 дней после адоптивного переноса ARU-примированных WT-pMΦ ( P = 0,0472 по сравнению с WT pMΦ, обработанным носителем, рис. 7b). Медиана дня выживания дополнительно увеличилась с 13,5 дня до 21 дня после адоптивного переноса NPD1-примированного WT-pMΦ (рис. 7b). Соответственно, ARU и NPD1-примированные WT pMΦ уменьшали долю инфицированных эритроцитов ( P = 0.0051, P = 0,0390, соответственно, по сравнению с праймированным ARU Gpr37 ^-/- pMΦ, рис. 7c, d). ARU или NPD1, примированные pMΦ, также защищали от всплеска IL-6, индуцированного P.b . Однако адаптационный перенос носителя или ARU-примированного Gpr37 -дефицитного pMΦ мышам дикого типа (дополнительная рис. 5b) не показал значительного защитного эффекта в отношении смертности ( P = 0,7684, дополнительная рис.5c) и уровень заражения ( P > 0,05, дополнительная рис. 5d), утверждая, что эти эффекты зависят от GPR37. Кроме того, L.m .-индуцированная септическая смерть и связанные с сепсисом сопутствующие заболевания (гипотермия, системный всплеск IL-6) были значительно ослаблены переносом NPD1-примированных WT pMΦ как у мышей дикого типа, так и у мышей Gpr37 ^-/- ( Рис. 7e–g и дополнительный рис. 6). Однако макрофаги, лишенные Gpr37 , и макрофаги без примирования не оказывали антисептического действия на мышей WT и Gpr37 ^-/- (дополнительная рис.6). В целом, эти результаты показывают, что активация GPR37 в макрофагах имеет решающее значение для облегчения L.m . индуцированный сепсис и P.b . опосредованная смерть.
Рис. 7: Адоптивный перенос макрофагов, примированных активаторами Gpr37, обеспечивает защиту от малярии и листериоза.
a План эксперимента для проверки того, может ли адоптивный перенос pMΦ, примированных активаторами Gpr37, ослаблять малярийную инфекцию. WT или Gpr37 ^-/- pMΦ праймировали носителем, ARU (30 мкМ) или NPD1 (30 нМ) в течение 24 ч с последующим вымыванием препарата и адоптивным переносом pMΦ (5 × 10 ^4, И.P.) в P.b .-инокулированных Gpr37 ^-/- мышей (1 × 10 ⁴ спорозоитов, внутривенно) через 2 дня после заражения. b Кривые выживания Gpr37 ^-/- мышей, получавших носитель, ARU- или NPD1-примированные WT pMΦ. В качестве контроля Gpr37 ^-/- мышей также обрабатывали ARU-примированными pMΦ от мышей Gpr37 ^-/-. В скобках указаны размеры выборки. c , d Проточная цитометрия образцов периферической крови, взятых у мышей, обозначенных через 10 d после P.б . прививка. Инфицированные эритроциты (iRBC) были обнаружены с использованием красителя Hoechst (1 мкг/мл) и отрицательными для красителя NO (650/670). c Репрезентативные изображения проточной цитометрии показывают долю иэритроцитов (Hoechst ⁺ /NOS ^–) в каждой группе лечения (см. стратегию селекции на дополнительном рис. 4d). d Количественное определение иэритроцитов в каждой группе (10 ⁶ эритроцитов проанализировано на образец), n = 6–9 мышей/группу, как указано. E Экспериментальный дизайн для приемной передачи WT или GPR37 ^{^{– / –} PMΦ Promed с транспортным средством или NPD1 (30 нм) на 24 ч введено 6 ч после инокуляции GPR37 – / –} – / – – / – – / – – / – мыши с л.м . (1 × 10 ⁷, ИП). f Кривые выживания Gpr37 ^-/- мышей, получавших WT или Gpr37 ^-/- pMΦ, примированных носителем или NPD1. В скобках указаны размеры выборки. г Динамика ректальной температуры во времени 0 ч, 6 ч или 24 ч после л.м . прививка. В скобках указаны размеры выборки. Данные выражены как среднее ± sem. и статистически проанализированы с помощью критерия Мантеля-Кокса ( b , f ), однофакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки ( d ) или двухфакторного дисперсионного анализа с последующим критерием Тьюки ( g ).

Макрофаги, экспрессирующие GPR37, уменьшают боль, вызванную бактериальной инфекцией

Распространенным сопутствующим заболеванием бактериальной инфекции является боль ²⁸ . Поскольку поведение боли обычно экспериментально измеряется в задней лапе грызунов, мы выполнили интраплантарную инъекцию 10 мкл л м . (5 × 10 ⁶ КОЕ) у мышей WT и Gpr37 ^-/- (рис. 8a) с последующим поведенческим тестированием для измерения механической аллодинии, тепловой гипералгезии или холодовой аллодинии (рис.8б). Задняя лапа L.m . Инфекция у мышей дикого типа вызывала выраженный отек (рис. 8c) и повышенную чувствительность к боли, о чем свидетельствует механическая аллодиния в тесте фон Фрея (рис. 8d), холодовая аллодиния в подошвенном тесте с ацетоном (рис. 8e) и гипералгезия тепла в тесте фон Фрея (рис. 8d). Тест Харгривза (рис. 8f). По сравнению с мышами дикого типа, мыши Gpr37 ^-/- демонстрировали усиление болевого поведения, вызванного L.m ., в каждом из тестов (рис. 8d–f), несмотря на аналогичную механическую и холодовую чувствительность в начале исследования.Примечательно, что механическая аллодиния восстановилась к 14 дню у мышей WT, но осталась нерешенной у мышей Gpr37 ^-/- (рис. 8d). Наконец, адоптивный перенос ARU-примированного pMΦ также реверсировал L.m .-индуцированную механическую аллодинию у мышей Gpr37 ^-/- (рис. 8g, h), а интраплантарная инъекция ARU (100 мкг) частично реверсировала механическую аллодинию. механическая аллодиния, вызванная инфекцией, у мышей дикого типа, но не у мышей Gpr37 ^-/- (рис. 8i). Эти результаты демонстрируют, что (1) GPR37 также защищает от боли, вызванной бактериальной инфекцией, и (2) ARU может облегчать боль после заражения через GPR37.
Рис. 8: GPR37 также защищает от боли, вызванной бактериальной инфекцией.
a Экспериментальный дизайн для л.м . модель инфекционно-индуцированной боли. л.м . (5 × 10 ⁶ КОЕ) вводили интраплантарно (I.PL.) в заднюю лапу мыши, где можно легко оценить поведение, подобное боли. b Методы, используемые для оценки механического (Фон Фрей), теплового (Харгривз) и вызванного холодом (ацетон) болевого поведения у грызунов. c Динамика отека задней лапы после L.м инфекции. d Динамика порогов отдергивания лапы у мышей дикого типа и Gpr37 ^-/- после L.m . инокуляция, как определено тестом фон Фрея ( n = 14–15 мышей/группу). e Динамика холодовой аллодинии у мышей дикого типа и Gpr37 ^{-/ –} после введения L.m . прививка, определяемая по продолжительности ответа в тесте с ацетоном на подошвенной поверхности ( n = 5 мышей/группу). f Динамика тепловой гипералгезии у мышей дикого типа и Gpr37 ^-/- после L.m . инокуляции, определяемой по латентному периоду отдергивания лапы в тесте Харгривза ( n = 5 мышей/группу). г Экспериментальный проект для испытаний L.m . боль, вызванная инфекцией. л.м . (5 × 10 ⁶ КОЕ) вводили в заднюю лапу (внутриподошвенную; IP.L.) мышам WT или Gpr37 ^{– /-}, где можно легко оценить измерения боли.Затем мышей обрабатывали ARU-примированным WT или Gpr37 ^{-/ –} pMΦ или ARU (100 мкг) посредством IP.L. инъекционную и механическую аллодинию оценивали с помощью теста фон Фрея. ч ARU-примированные WT или Gpr37 ^{– /-} pMΦ вводили через 5 дней после мкл . прививки, когда у мышей уже развилась сильная механическая аллодиния, определяемая путем измерения порогов отдергивания лапы. Пороги отдергивания лапы продолжали измерять после переноса через 7, 10 и 14 дней после инокуляции L.м. n = 9 мышей/группу. i Пороги отдергивания лапы измеряли у мышей WT или Gpr37 ^{– / –} в BL, через 1 день после L.m . прививки, или 1 д после L.m . инокуляция через 1 ч после введения ARU (100 мкг, I.PL.). Данные выражены как среднее ± sem. и были подвергнуты статистическому анализу с помощью двустороннего ANOVA с апостериорным критерием Бонферрони ( c – h ).

Границы | Упрощенная модель мышей против SARS-CoV-2 демонстрирует защиту пероральной вакциной мРНК на основе репликона

Введение

Пандемия COVID-19, вызванная коронавирусом тяжелого острого респираторного синдрома 2 (SARS-CoV-2), привела к быстрое развертывание профилактических и терапевтических средств в невиданных ранее масштабах (1–4).Быстрое развитие было частично обеспечено созданием мышиных моделей SARS-CoV-2 на основе предварительных знаний, полученных во время вспышки SARS-CoV-1 (5–7). Лабораторные штаммы мышей нечувствительны к SARS-CoV-2, поскольку мышиный гомолог ангиотензинпревращающего фермента 2 (ACE2) не поддерживает репликацию вируса. Вирус использует человеческий ACE2 (hACE2) в качестве рецептора для проникновения в клетки-хозяева, а мыши, экспрессирующие hACE2, очень восприимчивы к SARS-CoV-1, и у них развивается заболевание легких (8, 9). Используя эти предварительные знания, несколько групп независимо друг от друга разработали мышиную модель SARS-CoV-2 либо путем временной экспрессии hACE2 [ссылка (5, 6)], либо путем создания трансгенных мышей hACE2 (7, 10).Однако эти модели не являются широко доступными для тестирования лекарств и вакцин против SARS-CoV-2, и для них требуется сложное лабораторное оборудование, которое не всегда доступно в большинстве лабораторий. Поэтому для создания мышиной модели SARS-CoV-2 мы использовали упрощенный протокол очистки аденовирусов, который можно выполнить в любой лаборатории молекулярной биологии (11). Рекомбинантные аденовирусы и аденоассоциированные вирусы (AAV) нашли более широкое применение в исследованиях переноса гетерологичных генов (12–15) и доказали свою безопасность (16, 17).Здесь мы разработали модель мыши AAV-hACE2 и оценили осуществимость подхода, проверив эффективность мРНК-вакцины.

Ранее мы разработали мультицистронную самореплицирующуюся мРНК-вакцину-кандидат против SARS-CoV-2, используя репликон вируса леса Семлики (18). Чтобы обеспечить пероральную доставку мРНК-вакцины, мы использовали бактериальный перенос генов. Вакцина была безопасной и индуцировала мощные гуморальные и клеточные иммунные ответы. Вакцина защищала хомяков от вызванной вирусом пневмонии (Jawalagatti et al., не опубликовано). Мультицистронная вакцина была разработана с целью достижения улучшенной защиты от вариантов. Поэтому в качестве следующего шага мы изучили эффективность вакцины на мышах в эксперименте по заражению дельта-вариантом. Более того, крайне желательно разработать упрощенную модель мышей SARS-CoV-2, которую можно разработать в рамках любой молекулярной биологии. Использование простого и быстрого протокола очистки от аденовирусов позволило разработать упрощенную модель мышей SARS-CoV-2. Вакцина, основанная на последовательностях родительского гена SARS-CoV-2, защищала мышей от заражения дельта-вариантом.Использование AAV-hACE2 поддерживало репликацию вируса, и эта модель очень подходит для небольших доклинических исследований по тестированию лекарств и вакцин.

Материалы и методы

Заявление об этике

Свободные от конкретных патогенов мыши Balb/c 5-недельного возраста были приобретены у Koatech, Южная Корея. Мышам давали стандартный корм и чистую воду с 12-часовым циклом свет-темнота. Комитет по этике животных Национального университета Чонбук одобрил эксперименты (JBNU 2021-027). SARS-CoV-2 обрабатывали в строго охраняемых лабораториях биобезопасности Корейского научно-исследовательского института зоонозов.

Клетки и вирусы

Клеточные линии HEK293T и Vero E6, полученные от ATCC, культивировали в среде DMEM (Lonza, Швейцария) с добавлением 10% FBS (Gibco, США) и 1x пенициллина-стрептомицина (Gibco, США) при 37°C в 5 % CO ₂ . Вирус был получен из Корейского центра контроля заболеваний (KCDC). Vero E6 использовали для размножения родительского штамма SARS-CoV-2 (BetaCoV/Korea/KCDC/03/2020) и дельта-варианта B.1.617.2 (hCoV/Korea/KDCA119861/2021). Титр вируса определяли методом анализа бляшек и хранили при -80°C до дальнейшего использования.

Модель мыши AAV-hACE2

Аденовирусная конструкция, экспрессирующая hACE2 (pAAV-hACE2), была создана с использованием бесхелперной системы AAVpro ^® (Takara, Япония). Схема протокола представлена на дополнительной фигуре 1. Полноразмерный ген hACE2 был амплифицирован из кДНК, полученной из клеток Caco-2 (дополнительная фигура 1A). hACE2 клонировали в pAAV после направленного клонирования с использованием рестрикционных ферментов Sal I и Xba I (RE). Положительные клоны в DH5α E.coli были подтверждены ПЦР колоний (дополнительная фигура 1B) и перевариванием RE (дополнительная фигура 1C). Клетки HEK293T котрансфицировали в эквимолярном соотношении с плазмидами pAAV-hACE2, pHelper и pRC2-mi342 для продукции вируса. Полный протокол трансфекции, выделения вируса и очистки описан в другом месте (11). Упрощенный протокол позволяет проводить очистку вируса для небольших исследований в обычной настольной лаборатории. Наличие hACE2 в рекомбинантном AAV2 было подтверждено путем амплификации полноразмерного hACE2 с помощью ПЦР после лизиса капсида (дополнительная фигура 1D).Далее количество очищенного вируса определяли с помощью qRT-PCR (19). Мышам интраназально вводили 2,5×10 ⁸ геномных эквивалентов (GE) AAV-hACE2 в объеме 10 мкл под авертиновой анестезией. Образцы легких собирали на 3, 5, 7 и 9 дни после инокуляции, а кинетику экспрессии hACE2 определяли с помощью qRT-PCR с использованием праймеров hACE2 и иммуногистохимии (IHC). ИГХ проводили с использованием кроличьего антитела ACE2 в разведении 1:2000 (кат. № 10108-T24, Sino Biological, Китай).Кроме того, срезы ткани окрашивали с использованием H & E для оценки влияния AAV-hACE2 на гистологию легких.

Вакцина-кандидат

Список бактериальных штаммов, плазмид и праймеров, использованных в настоящем исследовании, приведен в таблице 1. Ранее мы сообщали о дизайне и конструкции вакцины-кандидата (18). Вакцина была разработана на основе репликона SFV и нацелена на домен, связывающий рецептор SARS-CoV-2 (RBD), домен гептадных повторов (HR), мембранный гликопротеин (M) и эпитопы nsp13.Использование репликона SFV позволяет экспрессировать вакцинную конструкцию в виде самореплицирующейся мРНК. Далее, для доставки вакцин использовали живую аттенуированную Salmonella Typhimurium (ST) с генотипом Δ lon, ΔcpxR, ΔrfaL, ΔpagL::lpxE и Δ asd . Полученный ЗТ, несущий вакцинную конструкцию, был обозначен как JOL3014. Для приготовления инокулята для иммунизации JOL3014 выращивали в течение ночи в бульоне LB, а на следующий день субкультивировали в 10 мл бульона LB. Бактерии в логарифмической фазе осаждали и дважды промывали в 50 мл PBS.Осадок ресуспендировали в объеме 2 мл. Число бактерий подсчитывали на основе значения OD600 и использовали для иммунизации мышей. Приготовленный инокулят использовали свежим.

Таблица 1 Список бактериальных штаммов, плазмид и праймеров, использованных в настоящем исследовании.

Анализ нейтрализации живого вируса

Образцы сыворотки, собранные в нашем предыдущем исследовании (Jawalagatti et al., 2021, неопубликовано), использовались для оценки реакции нейтрализующих антител против родительского и дельта-вариантов SARS-CoV-2 (18).Мышей иммунизировали перорально двумя дозами с интервалом в две недели, а образцы сыворотки собирали на 3 неделе после последней иммунизации. Вкратце, образцы сыворотки, инактивированные нагреванием, последовательно разбавляли и инкубировали с 50 БОЕ SARS-CoV-2 в течение 2 часов при 37°C. Смесь вирус-сыворотка использовалась для заражения клеток Vero E6 в 96-луночном планшете в течение 1 ч при 37°С. Планшеты инкубировали в течение 3 дней и наблюдали за развитием цитопатических эффектов (CPE), а репликацию вируса изучали с помощью иммунофлуоресцентного анализа (IFA).

Исследование контрольного заражения

Мышей иммунизировали дважды с интервалом в две недели 1×10 ⁸ КОЕ пероральным путем. Мышей заражали через три недели после последней иммунизации. За четыре дня до контрольной дозы мышам интраназально вводили 2,5×10 ⁸ геномных эквивалентов (GE) AAV-hACE2 в объеме 10 мкл под авертиновой анестезией. Мышей заражали 1×10 ⁴ БОЕ дельта-варианта SARS-CoV-2 в объеме 10 мкл интраназальным путем под общей анестезией.Общая анестезия была достигнута путем введения смеси 5 мг/кг ксилазина и 80 мг/кг кетамина внутрибрюшинным путем. Массу тела контролировали ежедневно, и всех животных умерщвляли на 5-й день после контрольного заражения. Были взяты образцы крови, сыворотки и легких.

Вирусная нагрузка и экспрессия hACE2

Вирусную нагрузку в образцах легких определяли с помощью анализа бляшек и qRT-PCR (20, 21). Образцы легких взвешивали и гомогенизировали в среде DMEM или Trizol для анализа бляшек и qRT-PCR соответственно.Гомогенаты легких очищали центрифугированием при 13000 об/мин в течение 10 мин и хранили при -80°С. РНК экстрагировали (GeneAll, Южная Корея) и синтезировали кДНК. Экспрессию hACE2 определяли количественно с использованием геноспецифических праймеров, перечисленных в таблице 1. ксилол-спирт (соотношение 1:1) по 3 мин. Срезы регидратировали путем погружения в серию градиентов спирта 100%, 95%, 75% и 50% на 3 мин каждый.Срезы промывали водопроводной водой и инкубировали в 3% H ₂ O ₂ в метаноле в течение 10 мин для блокирования активности эндогенной пероксидазы. После промывания PBS извлечение антигена осуществляли путем инкубации при 100°C в течение 30 минут в 0,5 мМ цитратном буфере с pH 6,0. Блокирование проводили с использованием 3% BSA при комнатной температуре в течение 2 часов. Срезы инкубировали с антителом ACE2 в разведении 1:2000 (кат. № 10108-T24, Sino Biological, China) в течение ночи при 4°C. После промывки PBS добавляли козий антикроличий IgG HRP в разведении 1:5000 и инкубировали при комнатной температуре в течение 1 часа.Срезы были проявлены с использованием субстрата DAB.

Гистопатология

Срезы легких подвергали гистопатологическому анализу после окрашивания гематоксилин-эозином.

Статистический анализ

Данные были проанализированы с использованием GraphPad Prism 9.0 и IBM SPSS ^®. Детали использованного теста и количество животных указаны в подписях к рисункам. Значение p <0,05 считалось статистически значимым.

Результаты

Мышиная модель hACE2

Выбранные лабораторные мыши не восприимчивы к SARS-CoV-2, поскольку мышиный ACE2 не поддерживает связывание вируса (6, 22).Поэтому, чтобы повысить чувствительность мышей к SARS-CoV-2, мы временно трансдуцировали рекомбинантный аденоассоциированный вирус (AAV), кодирующий hACE2 (AAV-hACE2), в легкие мышей Balb/c. Мы оценили экспрессию hACE2 и его способность поддерживать репликацию вируса в клетках RAW. Экспрессия hACE2 была подтверждена с помощью ОТ-ПЦР (рис. 1А) и ИФА (рис. 1В). Кроме того, с помощью анализа бляшек мы обнаружили более высокие титры SARS-CoV-2 в клетках RAW, трансдуцированных AAV-hACE2, чем в контрольных клетках (рис. 1C). Способность клеток RAW, экспрессирующих hACE2, поддерживать репликацию вируса была подтверждена с помощью IFA шиповидного белка (рис. 1D).Затем для изучения кинетики экспрессии hACE2 in vivo шестинедельным мышам Balb/c трансдуцировали интраназально 2,5 × 10 ⁸ геномных эквивалентов AAV-hACE2 (GE). Экспрессия hACE2 наблюдалась в эпителиальных клетках и пневмоцитах легких трансдуцированных мышей (рис. 1E). Следует отметить, что экспрессия белка hACE2 в легких регистрировалась во все экспериментальные дни. Кроме того, мы обнаружили экспрессию hACE2 в образцах легких, собранных во все дни, с помощью ОТ-ПЦР (рис. 1F) и количественной ПЦР (рис. 1G).Чтобы оценить, повлияло ли введение AAV-hACE2 на легкие, мы провели гистопатологический анализ. Срезы легких, окрашенные H и E, не выявили регрессивных изменений ткани по сравнению со здоровой тканью легкого (рис. 1H), что подтверждает безопасность введения AAV-hACE2. Кинетика экспрессии hACE2, гистопатологическая оценка и способность поддерживать репликацию вируса подтвердили пригодность модели для оценки нашей вакцины-кандидата на мышах.

Рисунок 1 Кинетика экспрессии hACE2. (A) hACE2 Экспрессия мРНК в трансдуцированных AAV-hACE2 клетках HEK и RAW с помощью RT-PCR. дорожка M-маркер молекулярной массы ДНК; Дорожка 1, 2 – повторы, показывающие амплификацию; Дорожка N – отсутствие амплификации в нетрансдуцированных клетках. (B) Экспрессия hACE2 в клетках RAW, трансдуцированных AAV-hACE2, с помощью IFA с использованием антитела ACE2. Ярко-зеленая флуоресценция указывает на экспрессию hACE2 на клеточной поверхности. Клетки RAW, трансдуцированные AAV-hACE2, инфицировали SARS-CoV-2 в количестве 0,1 множественности, а репликацию вируса определяли с помощью анализа бляшек (C) и IFA (D) с использованием шиповидного антитела S1.Мышам интраназально трансдуцировали AAV-hACE2, и экспрессию hACE2 в легких оценивали с помощью (E) IHC с использованием антитела ACE2, (F) RT-PCR для амплификации фрагмента ACE2 и (G) qRT- ПЦР. дорожка M-маркер молекулярной массы ДНК; Дорожки 0, 3, 5, 7 и 9 обозначают день отбора проб легких после трансдукции. Было показано усиление внутреннего контроля β-актина. (H) Ткани легких, окрашенные H&E, после аденовирусной трансдукции. Пунктирная линия в (C) и (G) представляет нижний предел количественного определения (LLOQ).Информация о данных: данные в (C) были проанализированы с помощью теста Манна-Уитни. Данные в (E-H) являются репрезентативными для двух мышей в каждый момент времени из общего числа 10. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего при 95% ДИ. ***р < 0,001.

Оценка перекрестно-защитных нейтрализующих антител против дельта-варианта

Мы создали полицистронную вакцину-кандидат, чтобы добиться улучшенной защиты от вариантов SARS-CoV-2. Поэтому мы определили перекрестные защитные нейтрализующие антитела в сыворотке иммунных мышей против дельта-варианта.Сыворотка эффективно нейтрализовала как предковый, так и B.1.617.2 SARS-CoV-2 с титром log2-трансформированного нейтрализующего антитела (NAb) 10 (рис. 2A–C). Обнаруженные титры NAb подтверждали анализом IFA для изучения репликации вируса. Отсутствие снижения NAb против дельта-варианта свидетельствует о том, что вакцина вырабатывает сильнодействующие перекрестно-защитные антитела.

Рисунок 2 Оценка титра нейтрализующих антител. Ингибирование репликации вируса сывороткой иммунных мышей оценивали с помощью IFA с использованием антитела HR.Изображения IFA, показывающие нейтрализацию (A) наследственного SARS-CoV-2 и (B) B.1.617.2 дельта-варианта. (C) Титр log2 NAb показан на правой панели. Пунктирная линия представляет нижний предел обнаружения (LLOD). Информация о данных: данные были проанализированы с помощью двустороннего дисперсионного анализа с использованием теста множественных сравнений Шидака. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего при 95% ДИ. ***р < 0,001.

Оценка пригодности модели в эксперименте по иммунизации и контрольному заражению

Затем была изучена пригодность модели для поддержки оценки вакцины-кандидата.Для этой цели мышей иммунизировали двумя дозами с интервалом в две недели 1×10 ⁸ КОЕ пероральным путем. Мышей заражали на 3-й неделе после последней иммунизации инокулятом 1×10 ⁴ БОЕ дельта-варианта SARS-CoV-2. За четыре дня до заражения мышам интраназально вводили 2,5 × 10 ⁸ AAV-hACE2. Мышей умерщвляли на 5-й день после заражения и собирали образцы легких. AAV-hACE2 поддерживал репликацию вируса с обнаружением вирусной нагрузки в легких и смывах из носа у всех мышей, получавших плацебо.Потеря веса на 4-7% наблюдалась в группе плацебо на 5-й день после заражения (Рисунок 3A). Средние инфекционные вирусные нагрузки, преобразованные в log10, в легких и носовых смывах были зарегистрированы как 5,86 БОЕ/100 мг (Рисунок 3B) и 6,34 БОЕ/мл (Рисунок 3C) соответственно. Кроме того, среднее число копий гена N-трансформированного log10 вируса в легких составило 6,3/100 мг (рис. 3D). Напротив, иммунизированные мыши были защищены от потери веса и репликации вируса. Живой вирус не был обнаружен в легких или носовых смывах иммунизированных мышей; однако среднее число копий гена N, трансформированного log10, равно 1.В легких было обнаружено 94/100 мг, хотя и на низком уровне. Экспрессия hACE2 была обнаружена в легких как у мышей, получавших плацебо, так и у вакцинированных мышей (рис. 3E). Затем мы оценили гистологические изменения в легких зараженных мышей после окрашивания H & E. Поражения в контрольной группе плацебо были характерны для интерстициальной пневмонии легкой и средней степени тяжести с воспалительной клеточной инфильтрацией, застойными явлениями и кровоизлияниями (рис. 3F). Иммунизированные мыши были защищены от заболевания легких, вызванного SARS-CoV-2.В совокупности полученные данные подтверждают пригодность упрощенной мышиной модели для оценки потенциальных вакцин и методов лечения против SARS-CoV-2.

Рисунок 3 Демонстрация защиты с помощью пероральной мРНК-вакцины-кандидата. Самцов мышей иммунизировали 1 × 10 ⁸ КОЕ перорально дважды с интервалом в две недели и три недели спустя интраназально заражали дельта-вариантом SARS-CoV-2. Мышам вводили AAV-hACE2 за 4 дня до контрольного заражения. (A) Массу тела отслеживали в течение пяти дней после заражения.Каждая линия представляет одну отдельную мышь. Живой вирус в (B) легких и (C) смывах из носа измеряли с помощью анализа бляшек. (D) гена N SARS-CoV-2 и (E) копий hACE2 в легких измеряли с помощью qRT-PCR. Пунктирная линия в (B-E) представляет нижний предел количественного определения (LLOQ). (F) Срезы легочной ткани, окрашенные гематоксилин-эозином. Красный кружок указывает на область интерстициальной пневмонии, а синие стрелки обозначают лимфоцитарную инфильтрацию.Информация о данных: данные о защите были получены от пяти биологически независимых мышей в каждой группе. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего при 95% ДИ. Данные в (A) были проанализированы с помощью двустороннего дисперсионного анализа с использованием теста множественных сравнений Шидака. Данные в (B – E) были проанализированы с помощью теста Манна-Уитни. **p < 0,01, ****p < 0,0001 и ^нс p > 0,05.

Обсуждение

В настоящем исследовании мы создали модель мыши путем временной трансдукции линии лабораторных мышей с помощью AAV-hACE2.Мы сообщаем об упрощенной мышиной модели SARS-CoV-2 с использованием AAV, кодирующего hACE2, которую можно сконструировать в любой лаборатории молекулярной биологии. Хотя модель имеет ограничение, заключающееся в том, что она подходит только для небольших исследований, она служит мощным инструментом для быстрого доклинического тестирования лекарств и вакцин против SARS-CoV-2. Кроме того, мы демонстрируем полезность модели, регистрируя эффективность пероральной мРНК-вакцины для обеспечения защиты от дельта-варианта B.1.617.2.

Лабораторные линии мышей, как правило, не восприимчивы к SARS-CoV-2, поскольку мышиный ACE2 не способствует проникновению вируса (6, 22).Тот факт, что SARS-CoV использует рецептор hACE для проникновения в клетку, был использован для разработки мышиной модели инфекции и патогенеза SARS-CoV-2 (5–7). Это ускорило разработку мышиных моделей SARS-CoV-2 для тестирования лекарств и вакцин (5, 6, 10, 23). Однако эти модели не получили широкого распространения и требуют дорогостоящего лабораторного оборудования. Поэтому очень желательна модель мыши, которую можно разработать в любой лаборатории со стандартным оборудованием. Здесь мы сообщаем о мышиной модели SARS-CoV-2 с использованием простого и быстрого протокола очистки аденовируса (дополнительный рисунок 1) (11).Мы сенсибилизировали мышей Balb/c к инфекции SARS-CoV-2 посредством экспрессии hACE2 в легких путем аденовирусной трансдукции (рис. 1). Мыши, трансдуцированные AAV-hACE2, поддерживали репликацию SARS-CoV-2 с обнаружением титров вируса в легких и носовых смывах (рис. 3A–D). Кроме того, у зараженных мышей развились поражения легких, характерные для интерстициальной пневмонии (рис. 3F). Ранее сообщалось о репликации вируса и заболевании легких у мышей, экспрессирующих hACE2 (5, 6). Аналогичные патологические поражения наблюдались у людей и других животных, инфицированных SARS-CoV-2 (24–29).В совокупности наши результаты демонстрируют репликацию SARS-CoV-2 и последующее развитие заболевания легких у инфицированных мышей, получивших hACE путем аденовирусной трансдукции.

Несмотря на тот факт, что наша модель поддерживала репликацию вируса и развитие заболевания легких, величина обнаруженной репликации вируса была сравнительно ниже, чем в других моделях hACE2-аденовируса (5, 6). В соответствии с вирусологическими данными, мыши потеряли меньше веса, и у них развилось заболевание легких легкой или средней степени тяжести (рис. 3F).Это несоответствие может быть связано с серотипом AAV, используемым в настоящем исследовании, поскольку тропизм ткани AAV варьируется в зависимости от серотипа (30). В нашем исследовании использовался серотип 2, тогда как в других исследованиях использовался серотип 5, который может лучше подходить для доставки генов в легкие (30, 31). Поэтому мы рекомендуем использовать серотип 5 AAV или другие серотипы, такие как AAV 1 [ссылка (32)] и AAV 6 [ссылка (32)] для будущих исследований.

Пандемия COVID-19 привела к быстрому внедрению вакцин в беспрецедентных масштабах: Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) полностью одобрило двухдозовую вакцину Pfizer-BioNTech (33).Однако из-за появления новых вариантов и непропорционального распределения вакцин глобальное бремя SARS-CoV-2 неуклонно растет (34–38). Это потребовало разработки вакцин следующего поколения для борьбы с антигенным разнообразием. Ранее мы разработали Salmonella -опосредованную мультицистронную вакцину, нацеленную на RBD, HR, M и эпитопы nsp13 SARS-CoV-2 [ссылка (18)]. Использование бактерий для переноса генов обеспечивает пероральную доставку мРНК-вакцины, и, насколько нам известно, наши исследования являются первыми, демонстрирующими пероральную мРНК-вакцину для борьбы с инфекционными заболеваниями (39).Ранее мы наблюдали, что пероральный путь иммунизации вызывает сильный ответ IgA слизистой оболочки легких (Jawalagatti et. al., неопубликовано). Кроме того, ранее было зарегистрировано возникновение реакции слизистой оболочки дыхательных путей после пероральной иммунизации (40). Полученные данные подчеркивают способность пероральной вакцины вызывать реакцию слизистой оболочки дыхательных путей. Самовоспроизводящаяся мРНК-вакцина, созданная с использованием репликона SFV, вызывала мощные гуморальные и клеточные реакции у мышей и защищала хомяков от заражения как предковыми, так и дельта-вариантами SARS-CoV-2 (Jawalagatti et.др., не опубликовано). Чтобы дополнительно проверить результаты и проиллюстрировать полезность мышиной модели, мы определили перекрестную защитную способность вакцины у мышей, трансдуцированных AAV-hACE2, зараженных дельта-вариантом B.1.617.2 (рис. 3). В соответствии с нашими данными по хомякам, мыши, иммунизированные перорально, были защищены от репликации вируса и патологии легких. Эти результаты подчеркивают пригодность нашей модели для тестирования противовирусных вакцин и методов лечения.

Таким образом, наши эксперименты поддерживают разработку упрощенной мышиной модели SARS-CoV-2.У мышей, трансдуцированных AAV-hACE2, развилось заболевание легких, соответствующее репликации вируса. Кроме того, пероральная мРНК-вакцина защищала мышей от репликации вируса и заболевания легких, вызванного SARS-CoV-2, демонстрируя осуществимость подхода к тестированию вакцин и лекарств против COVID-19.

Заявление о доступности данных

Первоначальные материалы, представленные в исследовании, включены в статью/дополнительный материал. Дальнейшие запросы можно направлять соответствующему автору.

Заявление об этике

Исследование на животных было рассмотрено и одобрено Комитетом по этике животных Чонбукского национального университета.

Вклад авторов

В. Дж. и П. К. разработали исследование и провели эксперименты. VJ проанализировал данные, подготовил рисунки и написал рукопись. VJ, CH и J-YP: эксперименты ABSL3 – вирусное заражение, умерщвление и отбор проб. M-SY, BO, MS и BK: гистопатология. BK предоставил ресурсы для гистопатологического эксперимента. JL: руководство проектом, получение финансирования, комментарии к рукописи.Все авторы одобрили окончательный вариант рукописи.

Финансирование

Это исследование было поддержано Программой фундаментальных научных исследований через Национальный исследовательский фонд Кореи (NRF), финансируемой Министерством образования (2019R1A6A1A03033084).

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Примечания издателя

Все утверждения, изложенные в этой статье, принадлежат исключительно авторам и не обязательно представляют претензии их дочерних организаций, издателя, редакторов и рецензентов.Любой продукт, который может быть оценен в этой статье, или претензии, которые могут быть сделаны его производителем, не гарантируются и не поддерживаются издателем.

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fimmu.2022.811802/full#supplementary-material

Дополнительный рисунок 1 | Схематическое изображение этапов разработки мышиной модели SARS-CoV-2. (A) ПЦР-амплификация полноразмерного hACE2 из кДНК, полученной из клеток Caco-2.дорожка M-маркер молекулярной массы ДНК; Дорожки 1-4 – разные препараты кДНК, демонстрирующие положительную амплификацию. (B) ПЦР-подтверждение колонии клонирования hACE2 в pAAV2 и (C) Положительный клон был подтвержден расщеплением RE с использованием рестрикционных ферментов XbaI/SalI. дорожка M-маркер молекулярной массы ДНК; дорожка с1, с2- колонии; Переваренная плазмида Lane i-RE демонстрирует высвобождение hACE2 . (D) Подтверждение присутствия hACE2 в рекомбинантном аденовирусе методом ПЦР.дорожка M-маркер молекулярной массы ДНК; Дорожки s1, s2- номера образцов. * Производство, выделение и очистка аденовирусов выполнялись в соответствии со следующими протоколами, описанными в Negrini et al., 2020 (ссылка 11).

Ссылки

2. Singh JA, Upshur REG. Предоставление разрешения на экстренное использование вакцинам-кандидатам против COVID-19: последствия для испытаний вакцин против COVID-19. Lancet Infect Dis (2020) 21:e103–9. doi: 10.1016/S1473-3099(20)30923-3

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

3.Wherry EJ, Jaffee EM, Warren N, D’Souza G, Ribas A. Как мы получили вакцину от COVID-19 менее чем за 1 год? Clin Cancer Res (2021) 27:2136–8. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-21-0079

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

4. Шерин М.А., Хан С., Казми А., Башир Н., Сиддик Р. Инфекция COVID-19: происхождение, передача и характеристики коронавирусов человека. J Adv Res (2020) 24:91–8. doi: 10.1016/j.jare.2020.03.005

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

5.Sun J, Zhuang Z, Zheng J, Li K, Wong RL-Y, Liu D и др. Создание широко полезной модели патогенеза, вакцинации и лечения COVID-19. Cell (2020) 182:734–43. doi: 10.1016/j.cell.2020.06.010

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

6. Hassan AO, Case JB, Winkler ES, Thackray LB, Kafai NM, Bailey AL, et al. Алсусси ВБ. Модель инфекции SARS-CoV-2 у мышей демонстрирует защиту за счет нейтрализующих антител. Cell (2020) 182:744–53.doi: 10.1016/j.cell.2020.06.011

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

8. Нетланд Дж., Мейерхольц Д.К., Мур С., Кассел М., Перлман С. Тяжелый острый респираторный синдром Коронавирусная инфекция вызывает гибель нейронов при отсутствии энцефалита у мышей, трансгенных по человеческому ACE2. J Virol (2008) 82:7264–75. doi: 10.1128/ОВИ.00737-08

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

9. McCray PB Jr., Pewe L, Wohlford-Lenane C, Hickey M, Manzel L, Shi L, et al.Летальная инфекция мышей K18-Hace2, инфицированных коронавирусом с тяжелым острым респираторным синдромом. J Virol (2007) 81:813–21. doi: 10.1128/ОВИ.02012-06

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

10. Sun S-H, Chen Q, Gu HJ, Yang G, Wang Y-X, Huang X-Y и др. Мышиная модель инфекции и патогенеза SARS-CoV-2. Микроб-хозяин клетки (2020) 28:124–33. doi: 10.1016/j.chom.2020.05.020

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

11.Негрини М., Ван Г., Хойер А., Бьорклунд Т., Дэвидссон М. Производство AAV повсюду: простой, быстрый и надежный протокол для производства векторов AAV в домашних условиях на основе экстракции хлороформом. Curr Protoc Neurosci (2020) 93:e103. doi: 10.1002/cpns.103

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

12. Хан А., Сайедахмед Э.Е., Сингх В.К., Мишра А., Дорта-Эстремера С., Ноокала С. и др. Рекомбинантная бычья аденовирусная вакцина для слизистой оболочки, экспрессирующая микобактериальный антиген-85B, обеспечивает надежную защиту от туберкулеза у мышей. Cell Rep Med (2021) 2:100372. doi: 10.1016/j.xcrm.2021.100372

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

16. Nemunaitis J, Cunningham C, Buchanan A, Blackburn A, Edelman G, Maples P, et al. Внутривенное вливание селективного к репликации аденовируса (ONYX-015) у больных раком: безопасность, осуществимость и биологическая активность. Джин Тер (2001) 8:746–59. doi: 10.1038/sj.gt.3301424

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

17.Lee J, Shin DW, Park H, Kim J, Youn Y, Kim JH и др. Переносимость и безопасность генной терапии двойного суицида, опосредованной аденовирусом, инъецируемой методом ЭУЗИ, с химиотерапией при местно-распространенном раке поджелудочной железы: исследование фазы 1. Gastrointest Endosc (2020) 92:1044–52. doi: 10.1016/j.gie.2020.02.012

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

18. Jawalagatti V, Kirthika P, Park J, Hewawaduge C, Lee J. Высокоэффективная иммунозащитная мультицистронная вакцина-кандидат против SARS-CoV-2, сочетающая новую экспрессию эукариот и бактериальную инфекцию Salmonella. J Adv Res (2021) 36: 211–22. doi: 10.1016/j.jare.2021.07.007

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

19. Aurnhammer C, Haase M, Muether N, Hausl M, Rauschhuber C, Huber I, et al. Универсальная ПЦР в реальном времени для обнаружения и количественного определения последовательностей инвертированных терминальных повторов, происходящих от аденоассоциированного вируса серотипа 2. Hum Gene Ther Part B Methods (2012) 23:18–28. doi: 10.1089/hgtb.2011.034

Полный текст CrossRef | Академия Google

20.Корман В.М., Ландт О., Кайзер М., Моленкамп Р., Мейер А., Чу Д.К.В. и соавт. Обнаружение нового коронавируса 2019 года (2019-N CoV) с помощью ОТ-ПЦР в реальном времени. Евронадзор (2020) 25:2000045. doi: 10.2807/1560-7917.ES.2020.25.3.2000045

Полный текст CrossRef | Google Scholar

21. Hewawaduge C, Senevirathne A, Jawalagatti V, Kim JW, Lee JH. Трехслойная маска, пропитанная медью, эффективно инактивирует SARS-CoV2. Environ Res (2021) 196:110947. doi: 10.1016/j.envres.2021.110947

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

22. Летко М., Марзи А., Мюнстер В. Функциональная оценка проникновения в клетку и использования рецепторов для SARS-CoV-2 и других бета-коронавирусов линии B. Nat Microbiol (2020) 5:562–9. doi: 10.1038/s41564-020-0688-y

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

23. Хассан А.О., Кафаи Н.М., Дмитриев И.П., Фокс Дж.М., Смит Б.К., Харви И.Б. и др. Дело Джей Би. Однодозовая интраназальная вакцина против вируса Чада защищает верхние и нижние дыхательные пути от SARS-CoV-2. Cell (2020) 183:169–84. doi: 10.1016/j.cell.2020.08.026

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

24. Ян М-С, О БК, Ян Д, О ЭЙ, Ким Й, Кан КВ и др. Ультра- и микроструктурные изменения дыхательных путей у сирийских хомяков, инфицированных SARS-CoV-2. Vet Res (2021) 52:1–19. doi: 10.1186/s13567-021-00988-w

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

25. Kurup D, Malherbe DC, Wirblich C, Lambert R, Ronk AJ, Zabihi Diba L, et al.Вакцина против SARS-CoV-2 с вектором инактивированного вируса бешенства предотвращает заболевание на модели сирийского хомяка. PLoS Pathog (2021) 17:e1009383. doi: 10.1371/journal.ppat.1009383

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

26. Borczuk AC, Salvatore SP, Seshan SV, Patel SS, Bussel JB, Mostyka M, et al. Легочная патология COVID-19: когорта вскрытия, проведенная в нескольких учреждениях из Италии и Нью-Йорка. Mod Pathol (2020) 33:2156–68. doi: 10.1038/s41379-020-00661-1

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

27.Сингх Д.К., Сингх Б., Ганатра С.Р., Гази М., Коул Дж., Типпешаппа Р. и др. Реакция на острую инфекцию SARS-CoV-2 в легких макак-резусов, бабуинов и мартышек. Nat Microbiol (2021) 6:73–86. doi: 10.1038/s41564-020-00841-4

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

28. Sanchez-Felipe L, Vercruysse T, Sharma S, Ma J, Lemmens V, Van Looveren D, et al. Лизенборгс Л. Однодозовая живая аттенуированная вакцина против SARS-CoV-2 с вектором YF17D. Природа (2021) 590:320–5. doi: 10.1038/s41586-020-3035-9

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

29. Sia SF, Yan L-M, Chin AWH, Fung K, Choy K-T, Wong AYL, et al. Патогенез и передача SARS-CoV-2 у золотистых хомячков. Природа (2020) 583:834–8. doi: 10.1038/s41586-020-2342-5

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

32. Flotte TR, Fischer AC, Goetzmann J, Mueller C, Cebotaru L, Yan Z, et al.Двойной репортер Сравнительное индексирование псевдотипированных векторов Raav в Chimpanzee Airway. Мол Тер (2010) 18:594–600. doi: 10.1038/mt.2009.230

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

34. Twohig KA, Nyberg T, Zaidi A, Thelwall S, Sinnathamby MA, Aliabadi S, et al. Риск госпитализации и обращения за неотложной помощью при SARS-CoV-2 Delta (B. 1.617. 2) по сравнению с альфа-вариантами (B. 1.1. 7), вызывающими озабоченность: когортное исследование. Lancet Infect Dis (2021) 22:35–42.doi: 10.1016/S1473-3099(21)00475-8

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

35. Шейх А., Макменамин Дж., Тейлор Б., Робертсон К. Дельта ЛОС SARS-CoV-2 в Шотландии: демография, риск госпитализации и эффективность вакцины. Ланцет (2021) 397:2461–2. doi: 10.1016/S0140-6736(21)01358-1

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

37. Асунди А., О’Лири С., Бхаделиа Н. Глобальное неравенство в отношении вакцин против COVID-19: Масштабы, влияние и проблемы. Микроб-хозяин клетки (2021) 29:1036–9. doi: 10.1016/j.chom.2021.06.007

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

38. Кэмпбелл Ф., Арчер Б., Лоренсон-Шафер Х., Джиннай Ю., Конингс Ф., Батра Н. и др. Повышенная заразность и глобальное распространение вызывающих озабоченность вариантов SARS-CoV-2 по состоянию на июнь 2021 г. Eurosurveillance (2021) 26:2100509. doi: 10.2807/1560-7917.ES.2021.26.24.2100509

CrossRef Full Text | Академия Google

39.Коффи Дж. В., Дас Г. Г., Траверсо Г. Пероральная биологическая доставка: достижения в области пероральных субъединичных, ДНК- и мРНК-вакцин и возможности массовой вакцинации во время пандемий. Annu Rev Pharmacol Toxicol (2021) 61:517–40. doi: 10.1146/annurev-pharmtox-030320-092348

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

40. Hopkins S, Kraehenbuhl J-P, Schodel F, Potts A, Peterson D, De Grandi P, et al. Рекомбинантная вакцина Salmonella Typhimurium индуцирует местный иммунитет четырьмя различными путями иммунизации. Infect Immun (1995) 63:3279–86. doi: 10.1128/iai.63.9.3279-3286.1995

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Защитите свой дом от мышей и крыс в Коннектикуте

Программа защиты от грызунов Guardian

В компании Guardian Pest Control мы понимаем, что мыши и крысы являются не только неприятными вредителями для владельцев домов в Коннектикуте, они также могут нанести значительный ущерб изоляции и конструкции дома и угрожать здоровью членов семьи и гостей в нем.Поскольку грызуны могут протискиваться через отверстия диаметром более 1/4 дюйма, они имеют возможность проникать в дома через трещины и щели, в том числе там, где инженерные сети входят в дом, щели, где сайдинг встречается с фундаментом дома, а также вокруг окон и дверей и т. д. Заражение грызунами также может привести к пожару, так как мыши и крысы могут перегрызть электрические провода. В Guardian Pest Control мы являемся компанией по борьбе с вредителями Коннектикута, которая предлагает эффективную программу защиты от грызунов, которая поможет защитить ваш дом и семью от мышей и крыс.

Защитите свой дом от мышей и других грызунов

Мышей не так просто уничтожить. Успешное истребление мышей требует хороших практических знаний о повадках мышей и острого глаза при определении «горячих точек» в доме. Наша программа начинается с тщательной проверки для определения масштабов проблемы и выявления точек входа. Затем мы можем настроить программу исключения в соответствии с вашими конкретными потребностями.

Программа защиты от грызунов Guardian состоит из следующих компонентов:

Изолируйте точки входа снаружи и/или изнутри вашего дома тканью из нержавеющей стали марки Excluder.

Изолируйте места ввода сантехники и электропроводки в жилые помещения тканью из нержавеющей стали марки Excluder.

Установите механические ловушки в подвале, на чердаке и/или в подвальном помещении, чтобы избавиться от мышей, живущих в вашем доме.

Определите условия вокруг вашего дома, способствующие активности грызунов, и дайте рекомендации по их улучшению.

Нанесите Pro-Pell (полностью натуральный репеллент от грызунов) на внешний периметр фундамента.

Борьба за продолжение Авторские права Микки Мауса

Микки Маус — один из самых популярных мультипликационных персонажей в современной истории.Персонаж стал такой иконой, что силуэт черно-белой фигуры сразу узнаваем людьми из всех слоев общества. Персонаж Микки Маус дебютировал в раннем фильме компании «Пароходик Вилли». Теперь культовый персонаж стал единым целым с брендом Disney, поскольку Микки Маус часто является лидером во многих проектах Disney, таких как Disneyland и товары Disney. Хотя Disney уже почти 100 лет пользуется защитой авторских прав на Микки Мауса, вскоре это может измениться, поскольку срок действия законов об авторских правах, защищающих Микки Мауса, истекает в 2024 году.
«
Микки Маус» станет одним из нескольких культовых произведений, которые должны стать общественным достоянием в ближайшие пару лет. Срок действия авторских прав на Бэтмена, Белоснежку Диснея и некоторых более ранних персонажей Looney Tunes также истекает в период между 2031 и 2035 годами. В связи с предстоящим истечением срока действия защиты Микки Мауса многие в мире авторского права задаются вопросом, будет ли Disney продвигаться вперед. попытка сохранить авторские права Микки Мауса еще немного.

Что такое авторское право?

По данным У.S. закон об авторском праве, авторское право — это юридический термин, используемый для описания прав автора на его или ее творческие произведения. Авторское право вступает в силу, когда автор воплощает свои творческие идеи в фиксированную и осязаемую форму. К фиксированным и материальным произведениям относятся произведения, включая, помимо прочего, книги, статьи, фильмы и фильмы, аудиоформаты и музыку, стихи, пьесы и даже архитектурные произведения.

Законы об авторском праве обеспечивают защиту авторов творческих работ, чтобы другие лица не могли получать выгоду от работы автора.Есть некоторые правила, которые позволяют человеку использовать чью-то работу, но эти правила существуют только при определенных условиях. Как правило, авторам не нужно маркировать свою осязаемую фиксированную работу символом авторского права, но многие компании используют этот символ, чтобы напомнить пользователям о защите авторских прав.

Влияние Disney на прежние законы об авторском праве

Микки Маус Диснея был создан в 1928 году, и персонаж подпадал под действие Закона об авторском праве 1909 года. Согласно этому закону, Микки Маус находился под авторским правом в течение 56 лет, что означает, что его защита закончилась в 1984 году.В первые годы своего существования этот персонаж стал культовым краеугольным камнем Disney, а бренд Микки Мауса рос экспоненциально, принося компании миллиарды. Потеря контроля над персонажем была бы тяжелым ударом для Диснея. В ответ на более раннюю защиту от истечения срока действия Микки Мауса компания лоббировала законодательные органы с целью продления авторских прав Микки Мауса. В 1976 году, когда Закон об авторском праве был реформирован, защита Микки Мауса была увеличена с 56 до 76 лет, что дало Disney годы дополнительной защиты, поскольку срок действия авторских прав истек в 2003 году, а не в 1984 году, как предполагалось изначально.

Поскольку срок действия защиты 2003 года истекает, Дисней снова лоббировал Вашингтон, округ Колумбия, и защита авторских прав была продлена еще на 20 лет, защищая Микки Мауса до 2023 года. В настоящее время Микки Маус защищен Законом о продлении срока действия авторских прав Сонни Боно. Это расширение, принятое в 1998 г., добавляет, что дополнительные виды работ, созданные 1 января 1978 г. или позже, будут охраняться авторским правом в течение «жизни автора плюс 70 лет». Расширение также защищает корпоративные произведения в течение 95 лет с года их первой публикации или 120 лет с года их создания в зависимости от того, что наступит раньше.

Поскольку в ближайшие годы приближается истечение срока действия авторских прав, остаются вопросы о том, будет ли Disney настаивать на продлении Закона об авторском праве. Наряду с этим многие критики указывали на потенциальный вред частной компании, имеющей такое большое влияние на законодательство, как Дисней имел влияние на законы об авторском праве.

Последствия перехода Микки Мауса в общественное достояние
«
Микки Маус» стал источником глобального дохода для компании Disney.Подсчитано, что Микки Маус приносит около шести миллиардов долларов в год. Поскольку срок действия авторских прав на одного из самых узнаваемых персонажей в мире истекает в ближайшие годы, многие задаются вопросом, как это повлияет на Disney и другие компании. По мере того, как он становится общественным достоянием, отдельные лица и компании могут увидеть возможность извлечь выгоду из того, что с тех пор было запрещено.

Однако влияние на Disney все еще остается предметом обсуждения. В то время как Disney собирается лишиться защиты авторских прав.Его право собственности на персонажа, имя и другие компоненты Микки Мауса, охраняемые товарным знаком, останется неизменным навсегда, поскольку срок действия права собственности на товарный знак не истекает по мере истечения срока действия защиты авторских прав. Эта защита товарных знаков может позволить Disney сохранить доминирующее положение персонажа. Disney также сможет сохранить защиту для любых новых воплощений персонажа, что даст еще одно преимущество в сохранении предполагаемого владения
.
Disney не скрывает, что хочет сохранить полную собственность на свой бренд и Микки Мауса.Дисней сделал это через несколько судебных исков, которые они подали против тех, кто пытается использовать их персонажа Микки Мауса. В 2019 году Disney подала в суд на компанию, занимающуюся онлайн-одеждой, за созданный ими дизайн, который был похож на дизайн Микки Мауса.

Критики дают ответ

Одним из основных препятствий, с которыми сталкивается Disney, является то, что некоторые называют лицемерием Disney, стремящегося сохранить права на Микки Мауса. Сам бренд доминирует в современном ландшафте благодаря доступу к произведениям, находящимся в общественном достоянии.Переосмысление таких произведений, как «Красавица и чудовище», «Золушка», «Мулан», «Аладдин» и «Русалочка», помогло компании заработать около 25 миллиардов долларов.

Заключение

Хотя остается неясным, попытается ли Дисней лоббировать Вашингтон, округ Колумбия, чтобы расширить защиту авторских прав, остается ясным, что Микки Маус, безусловно, является знаковой фигурой, которая оказала бы своего рода влияние, если бы он был выпущен в общественное достояние.

передовых методов борьбы с грызунами и вредителями в вашем доме на колесах | Эдмонтон AB

Итак, вы недавно приобрели красивый дом на колесах, 5-колесный или туристический прицеп; и теперь важно защитить свой новый актив.Ниже приведена некоторая информация, которую мы предлагаем каждому владельцу автофургона, на которую следует серьезно обратить внимание, чтобы предотвратить повреждение автофургона от ВРЕДИТЕЛЕЙ и ГРЫЗУНОВ!!

Ходовая часть вашего дома на колесах не похожа ни на одно другое транспортное средство. Имеется множество отверстий и точек доступа для сантехники, проводки и шлангов. RV Pro Undercoating — это постоянное нежирное, нелипкое, устойчивое к истиранию покрытие, которое герметизирует эти точки входа и защищает вашу ходовую часть.

Профилактические меры — нанесите защиту от мышей во время доставки

Самый простой способ защитить ваш автодом от мышей и вредителей — это, в первую очередь, уменьшить вероятность их проникновения в ваш автофургон.Есть ряд вещей, которые Carefree RV предлагает делать в рамках ваших полугодовых проверок, которые могут помочь удержать тварей от проникновения в ваш замок.

Мыши могут причинить вред, прогрызая себе путь внутрь дома на колесах. Защита от мышей предотвращает проникновение мышей в жилой дом. Мышиный щит — это постоянный, нежирный, нелипкий барьер со вкусом и запахом мяты перечной. Он наносится на днище RV и защищает от повреждений RV и рисков для здоровья, связанных с мышами.Гарантия 5 лет! Компания Carefree RV гордится тем, что сотрудничает с продуктами Diamond Kote, чтобы помочь нашей сервисной команде с применением.

Советы и рекомендации

Во время использования используйте герметичные пластиковые пакеты или контейнеры для продуктов и не оставляйте продукты открытыми в течение длительного времени. (т. е. мыши любят прятаться в остатках полотенец и строить гнезда, поэтому герметичные пластиковые пакеты помогут)

Перед тем, как поставить устройство на хранение, разморозьте и тщательно очистите холодильник, а дверцы шкафа подпирайте открытыми, чтобы не допустить гнездования.

Проверяйте такие предметы, как дезодоранты, шампуни, зубные пасты и лекарства, так как они имеют срок годности и могут привлекать насекомых и грызунов.

Поддерживайте порядок в своем доме на колесах. Часто вытирайте пыль и сведите к минимуму беспорядок, особенно в небольших помещениях.

Проверяйте вентиляционные отверстия на наличие гнезд в рамках регулярной проверки.

Закройте все отверстия снаружи и внутри вашего дома на колесах пенопластом, стальной ватой или узкими сетчатыми экранами. Убедитесь, что вы также проверили все отверстия в брандмауэре между вашим двигателем и салоном (где трубы или проводка входят внутрь).Салфетки для сушки белья, мыло Irish Spring и/или шарики от нафталина в шкафах или ящиках НЕ защитят мышей от проникновения внутрь. Масляные экстракты и уксус также НЕ защитят грызунов и насекомых от проникновения в дом на колесах.

При хранении автофургона убедитесь, что он стоит на бетоне или гравии, а НЕ на траве средней или высокой высоты. Мыши любят ползать по траве и с удовольствием вьют гнезда под фанерой.

Благодаря наличию сверкающей чистоты устройства, применению всех советов и рекомендаций и защите от мышей во время покупки эти профилактические меры помогут предотвратить проникновение тварей!
.