Псб 35с: Пенополистирол ПСБ-С 35 (ПСБС-35)

Содержание

Пенополистирол ППС 25 (ПСБ-С 35), 50мм. V = 0.72м3

Область примененияСкатные кровли и мансарды
Плоские кровли
Вентилируемый фасад
Слоистая/колодцевая кладка
Каркас полы, потолки, стены
Полы под цементную стяжку

Средняя плотность, кг/м325.1-35.0

ТипПенополистирол

Коэффициент теплопроводности при t=25±5°С , λ25, Вт/м°С0.038

Прочночть на сжатие при 10% деформации, МПа0,14

Предел прочности при статическом изгибе, МПа 0,20

Водопоглощение за 24 часа, % по объему, не более2

Стандартные размеры рулона/плиты, мм1200х1000х50

Кромка плитыПрямая

Объем материала в упаковке, м30,72

Способ упаковкиПолиэтилен

Особые свойстваВозможны другие размеры плит под заказ

ПСБ-С 35 – применяется при изготовлении многослойных панелей, в т.ч. железобетонных, устройства обогреваемых дорожек, подъездных площадок, стоянок автомобилей, тепло-гидроизоляции подземных коммуникаций, теплоизоляции труб, утеплении фундаментов, для предотвращения, промерзания и вспучивания грунтов, для отвода стоков, укрепления откосов, при строительстве бассейнов, разбивки газонов, спортивных площадок.

Размеры:

Размер листа (мм) для марок 15, 25, 35, 50	Количество м3 в упаковке
1000 х 1200 х 20, 30, 40, 50, 60, 100, 120, 150, 200 мм	0,72
2000 х 1200 х 50, 100, 120, 150, 200 мм	1,44
3000 х 1200 х 50, 100, 120, 150, 200 мм	2,16
600 х 1200 х 50, 100, 120, 150, 200 мм	0,432
2300 х 1200 х 50 мм	1,656
3000 х 1200 х 50 мм	2,16

Физико-технические характеристики:

Наименование показателей	Норма для плит марок
Наименование показателей	15	25	35	50	50-D
Плотность, кг/куб. м	10-15	15,1-25	25,1-35	35,1-50	40-55
Прочность на сжатие при 10% линейной деформации, МПа, не менее	0,04	0,08	0,14	0,16	0,5
Предел прочности при изгибе, МПа, не менее	0,06	0,16	0,20	0,30	0,7
Теплопроводность в сухом состоянии при (25±5) С, Вт/(м•К), не более	0,043	0,041	0,038	0,041	0,045
Время самостоятельного горения плит типа ПСБ-С, с, не более	4	4	4	4	4
Влажность, %, не более	12	12	12	12	12
Водопоглощение за 24 ч, % по объему, не более	4	3	2	2	1,5

Применение:

– Утепление несущих элементов фундаментов.

Фундамент – основа здания. От него зависит долговечность и в значительной мере тепловой комфорт. Поэтому вопрос по теплоизоляции фундаментов, особенно в регионах с суровым климатом, должен ставиться на одно из первых мест. Традиционно пенопласт применяют в качестве средней части трехслойных фундаментных блоков. Однако свойства материала и его качество позволили применять фундамент современной более эффективной конструкции. В современном фундаменте пенополистирол (пенопласт) используют в качестве несъемной опалубки при изготовлении и монолитного фундамента непосредственно на объекте. Это существенно снижает расход бетона, арматуры и трудозатраты. Хорошо зарекомендовал себя

пенополистирол (пенопласт) при устройстве бесподвальных строений. В этом случае на подготовленную площадку укладываются плиты утеплителя в один или несколько слоев, заливаются бетоном и далее возводится строение обычным порядком. При такой конструкции бетонная стяжка одновременно является фундаментом и основанием пола.

Конечно, это не исключает необходимости устройства точечного фундамента под несущие опоры. Особо отметим возможность применения пенополистирола в целях изоляции фундаментов для предотвращения промерзания. Специалистам строителям и эксплуатационникам хорошо известны последствия этого природного явления. Поэтому в северных регионах защита фундаментов от промерзания, а также возможность строительства на мерзлоте имеет важное значение. Пенополистирольные плиты можно применять для вертикальной и горизонтальной защиты фундаментов от промерзания. Для этой цели вдоль фундамента отрывается траншея шириной порядка 1 м и глубиной, определяемой промерзанием грунта. Плиты теплоизоляции укладываются вдоль фундамента и засыпаются. В некоторых случаях необходимо дополнительное устройство гидроизоляции.

– Применение на трубопроводах.

Известно, что теплоизоляции инженерных коммуникаций до последнего времени не придавалось должного значения, хотя доля теплопотерь через них составляет порядка 30%.

Для теплоизоляции трубопроводов холодного водоснабжения, вентиляционных каналов, телефонных линий и заглубленных кабелей в последнее время все чаще стали применять пенополистирол. Этот материал также используют для защиты водопроводных и канализационных труб городских магистралей от замерзания. Благодаря этому, трубопроводы можно укладывать на меньшей глубине, намного сокращая объем вынутого грунта. Несомненным достоинством применения пенополистирола для теплоизоляции трубопроводов является возможность придания материалу практически любых форм, что способствует функциональному приспособлению к конструктивным требованиям.

– Опалубка из пенополистирола.

Опалубка из пенополистирола представляет собой конструкцию, состоящую из двух полотен пенополистирола, соединённых при помощи специальных креплений. Внутреннее пространство такой конструкции заполняется раствором бетона с элементами арматуры. Использование

пенополистирола в качестве несъёмной опалубки имеет как положительные, так и отрицательные стороны.

К положительным сторонам можно отнести способность опалубки из пенополистирола служить одновременно ограждающей конструкцией и обладать при этом теплоизоляционными свойствами. Таким образом, опалубка из пенополистирола является своеобразным «сендвичем», который идеально подходит для быстрого процесса строительства (не требуется создание теплоизоляциооного слоя). Кроме того, такая опалубка из пенополистирола обладает дополнительно и звукоизоляционными свойствами, которые особенно актуальны при строительстве жилых зданий. Отрицательными моментами использования опалубки из пенополистирола является необходимость создания верхнего облицовочного слоя, обладающего повышенными пожаростойкими свойствами (в данном случае пенополистирол обладает горючими свойствами). Причём крепления на такой стене довольно сложно выполнить, так как для достижения прочности требуется применение длинных креплений, которые смогут достать до бетонной поверхности конструкции.

плотность и другие технические характеристики утеплителя, видео и фото

Суспензионный пенополистирол – один из самых популярных утеплителей на рынке. Материал отличается действительно хорошими эксплуатационными качествами. И я хочу рассказать про его технические характеристики, область применения и другие особенности.

Плита пенопласта должна иметь маркировку.

Строительный пенополистирол ПСБ-С

Что это такое?

Пенополистирол ПСБ-С 25 в заводской упаковке.

Перед нами ПСБ-С, что обозначает «пенополистирол суспензионный беспрессовый самозатухающий». Вспененные пластические массы применяются очень широко в различных сферах деятельности человека.

В строительстве чаще всего используют пенополистирол или просто пенопласт, так как этот материал наиболее полно соответствует тем задачам, которые на него возложены.

Пенополистирол чаще всего используют в строительстве.

За счет вспененной ячеистой структуры пенополистирол обладает очень низкой теплопроводностью, поэтому главная его функция – это теплоизоляция различных конструкций. В зависимости от марки и качеств конкретного материала меняется и сфера его применения.

Утепление стен и других частей зданий – главная функция ПСБ-С.

Пенополистирол изобретен давно, и за это время придумана масса способов его производства и, соответственно, разновидностей.

Наиболее известны такие:

Беспрессовый суспензионный. Это ПСБ, EPS. Известен марками «МОССТРОЙ 31», «НовоПласт», «ЕТ-Пласт».
Экструзионный. Это ЕПС, XPS. Известен марками «Пеноплэкс», «Технониколь», URSA, Knauf.
Прессовой. Это ПС1 – ПС4. Известен разнообразными импортными марками. Используется крайне редко.
Автоклавный. Это Styrofoam. Известен как продукт Dow Chemical Company.
Автоклавно-экструзионный. Примеры этого материала на отечественном рынке не представлены.

Экструдированный пенополистирол «Пеноплэкс».

Сертификат соответствия ГОСТ 15588-86 ПСБ-С плит фирмы «МОССТРОЙ 31».

Буква «С» в конце аббревиатуры ПСБ говорит нам о том, что в суспензию полистирола при производстве материала были добавлены противопожарные вещества (или антипирены), и теперь материал именуется «самозатухающий».

Цифра 35 указывает на плотность утеплителя, которая в своем максимальном значении может составлять не более 35 кг/м³.

В названии материала могут также присутствовать следующие литеры:

«Ф» – обозначает «форменный», то есть лист имеет специальную форму;
«Н» – для наружного использования, фасадный;
«А» – образец имеет ровные края наподобие геометрически правильного параллелепипеда;
«Б» – края плиты вырезаны в L-образной форме;
«Р» – лист вырезан раскаленной струной.

Монтаж листов производится на привычные «зонтики».

На фото видно, что самозатухающий пенопласт не поддерживает горение.

ПСБ-С – это тот самый хорошо известный каждому пенопласт, белая масса, состоящая из небольших склеенных ячеек. Является одним из самых распространенных утеплителей, применяемых в строительстве. Отличается невысокой ценой и хорошими техническими и эксплуатационными характеристиками.

ПСБ – этот тот самый пенопласт.

Технические особенности и характеристики

«Младший брат» героя нашей статьи.

Технические характеристики 35-й марки не сильно отличаются от общих характеристик суспензионного пенопласта, однако имеют некоторые особенности. Благодаря этим нюансам покупателю проще подобрать материал, который будет наиболее точно подходить к условиям эксплуатации и выполнять возложенные на него задачи.

Отличия 35-й марки от других.

Для утепления стен рекомендуют пенопласт плотностью 25 кг/м³, то есть 25-й или 35-й марки.

Основные показатели, характеризующие пенопласт ПСБ-35-С:

Теплопроводность при 20 – 30 °С, Вт/м*°С – 0.037 – 0.038.
Плотность, кг/м³ – 25.1 – 35.
Прочность на сжатие при 10%-й деформации, МПа – 0.16.
Предельная прочность при изгибающем усилии – 0. 25 Мпа.
Паропроницаемость, мг/ч*м*Па – 0.05.
Срок службы без потери основных эксплуатационных и технических характеристик – 60 – 80 лет.
Класс горючести согласно нормативам ГОСТ – Г1 (слабогорючий).
Поглощение воды в течение суток (24 часов), % – не более 2-х по объему.
Токсические выделения, вредные для человека в условиях нормальной эксплуатации даже с учетом низкотемпературной деструкции ППС – отсутствуют.

Пенопласт высокой плотности используют в качестве несъемной опалубки.

Из списка видно, что пенопласт этой марки отличается сравнительно высокой прочностью на сжатие и плотностью.

Это одна из самых качественных марок в номенклатуре материалов ПСБ-С, которая может использоваться как:

утеплитель полов;
автодорожных покрытий;
подземных коммуникаций и фундаментов;
при изготовлении железобетонных многослойных панелей.

Утепление пола с помощью 35-го пенопласта.

Теплоизоляция фундамента ПСБ-С.

Утепление колодца пенопластом.

Пенопласт 35-й марки отличается повышенными эксплуатационными показателями и может быть использован там, где требуется высокая стойкость к физическим, химическим и тепловым нагрузкам. Можно сказать, что это материал со свойствами экструзионного пенополистирола, но цена его ощутимо ниже.

Термоизоляция септика пенополистиролом ПСБ.

Как самому произвести определение плотности

Важно уметь защититься от недобросовестных производителей.

Как мы можем видеть из списка физических характеристик, такой важный показатель как плотность варьируется в достаточно большом диапазоне, от 25 до 35 кг/м³.

Если 25-й пенопласт прекрасно подойдет для утепления стен, то для утепления пола нужен как минимум 35-й. В связи с этим, а также с недобросовестностью многих производителей, желательно уметь выяснить реальную плотность пенопласта.

Визуальный осмотр перед покупкой обязателен.

Сделать это несложно. Необходимо взвесить лист пенополистирола, лучше на электронных весах, так как он легкий и большие погрешности сведут на нет все наши усилия. Обозначим вес листа литерой «m». Допустим, наш лист весит 1200 грамм, переводим в килограммы и получаем m = 1.2 кг.

Аптечная точность нам не требуется, поэтому можно использовать кухонные весы с точностью до грамма.

Далее нам необходимо определить объем листа. Для этого умножаем его длину (например, 1 м) на ширину (например, 0.5 м) и на толщину (например, 0.1 м). Получаем объем V = 1 х 0.5 х 0.1 = 0.05 м³.

Теперь определяем плотность по формуле:

Формула для вычисления плотности вещества.

Плотность равна 1.2/0.05 = 24 кг/м³.

Если вы купили материал с маркой 35, загляните в ГОСТ 15588-86 и убедитесь, что вас обманули, так как такую характеристику плотности имеет ПСБ-25-С.

Значения характеристик согласно ГОСТ.

ППС ПСБ-25-С применяется чаще всего для утепления стен.

Вы сможете быть уверены, что используете материал с плотностью, соответствующей расчетам. Ведь если вы утепляете ответственный объект, и удельный вес утеплителя согласно документации должен быть не менее 32 кг/м³, то купленный вами пенопласт ПСБ-35-С может иметь удельный вес одного кубометра равный, скажем, 28 кг на вполне законных основаниях.

Почему покупатели выбирают эту марку пенопласта

Упаковка самозатухающего пенопласта ПСБ-35.

Я не буду перечислять преимущества пенопласта как утеплителя. Желающие могут ознакомиться с ними в других моих статьях на сайте. Хочется выделить отличия именно 35-го ПСБ-С.

Еще один пример продукции ПСБ-С.

Если коротко, то можно сказать, что это в некотором смысле универсальный материал, который подойдет:

для утепления стен;
не «побоится» фундамента или септика;
а может быть использован и для утепления полов внутри квартиры или дома.

Это своеобразный заменитель экструзионнику, но более дешевый.

Теплоизоляция цоколя своими руками.

Прочность этих листов достаточна для использования в строительстве обогреваемых дорог и стоянок, взлетно-посадочных полос, защиты грунтов от вспучивания, укрепления откосов и т.п. Инструкция позволяет использовать ПСБ-С тридцать пятой серии для этих целей, хотя лично я перестраховался и купил бы ПСБ-С-50.

В регионах с суровым климатом материал можно использовать на стены.

Вывод

Знание технических характеристик, особенностей использования и назначения пенопласта ПСБ-35-С, приведенных выше, поможет вам выполнить теплоизоляцию любых объектов без проблем и ошибок. После просмотра видео в этой статье или на основании личного опыта вы можете дополнить сказанное в комментариях.

Пенопласт ПСБ-С-35 | Пенопласт в Ставрополе

Качественный пенопласт ПСБ-С-35 (по ГОСТ 15588-2014 – ППС23) широкого спектра применения обладает гранулированной структурой белого цвета и повышенной жесткостью. Заказать пенополистирол на выгодных условиях предлагает производственная компания СтавПолистэр. Материал характеризуется экологичным составом, устойчивостью к влаге, старению и вредоносным микроорганизмам. Особенностью данной марки пенополистирола является низкая теплопроводность, что позволяет использовать его в качестве эффективной теплоизоляционной защиты зданий и сооружений. Вспененная ячеистая структура обеспечивает стабильность формы и технических характеристик материала в условиях физических, химических и тепловых нагрузок.

Кроме того, что стоимость пенопласта ПСБ-С-35 приемлема для любого бюджета, продукция отличается высокими эксплуатационными качествами. Пенополистирол достаточно легко поддается фигурной резке, активно применяется для изготовления легких конструкций для стен и потолков. С помощью универсального материала производят многокомпонентные панели, включая изделия из железобетона, сооружают дорожки с подогревом, укрепляют откосы, обустраивают искусственные водоемы, спортивные объекты, выполняют теплоизоляцию и гидроизоляцию инженерных систем, оснований зданий. Утеплитель надежно защищает грунт от деформации. Приобрести пенополистирол высокого качества удобно на сайте или по телефону 8 (8652) 56-57-20.

Технические характеристики пенополистирола:

Наименование показателя	Норма по ГОСТ 15588-2014
Плотность	не менее 23 кг/м³
Прочность на сжатие при 10% линейной деформации	не менее 140 кПа
Предел прочности при изгибе	не менее 220 кПа
Теплопроводность в сухом состоянии при (10±1)°С	не более 0,035 Вт/(м·К)
Теплопроводность в сухом состоянии при (25±5)°С	не более 0,037 Вт/(м·К)
Время самостоятельного горения	не более 4 с
Влажность, % по массе	не более 2,0
Водопоглощение за 24 ч, % по объему	не более 2,0

Утеплитель Пенопласт ПСБ С 35 (ППС25) 26-27кг/м3 – 1000100020-600мм 1.

000000м3 Пенополистирол (пенопласт) Поставщик№ 176 Тула Алексин

1. На время распутицы вводится временное ограничение движения транспортных средств с грузом, следующим по автомобильным дорогам общего пользования (закрытие дорог в связи с весенним паводком)

В период временного ограничения действуют следующие допустимые нагрузки:

5-ти осное ТС 25т – нагрузка 13 тонн,
4-х осное ТС 20т – нагрузка 8 тонн,
3-х осное ТС 10т – нагрузка 4 тонны.

2. Въезд в пределы МОЖД (Московская окружная железная дорога) транспортного средства грузоподъемностью свыше 3,5 тонн по согласованию.

3. Въезд в пределы ТТК (Третье транспортное кольцо) транспортного средства грузоподъемностью свыше 1 тонны по согласованию.

4. Въезд на МКАД транспортного средства грузоподъемностью свыше 10 тонн по согласованию.

5. Время доставки заказа в течение дня:

с 8.00 до 22. 00 в период с апреля по сентябрь
с 8.00 до 19.00 в период с октября по март

6. В случае поставки заказа большим или меньшим количеством автомашин перерасчет заказа не производится.

7. Покупатель обязан обеспечить наличие подъезда от автомобильных дорог общего пользования с асфальтобетонным покрытием к месту разгрузки (твердое покрытие, ширина дороги не менее 3 метров, радиус разворота не менее 15 метров) с отсутствием по маршруту подъезда к месту разгрузки дорожных знаков, запрещающих движение данному виду транспорта, в противном случае оплатить все дополнительные расходы, возникшие из-за невыполнения данных условий по расценкам Поставщика.

8. Покупатель обязан обеспечить место для разгрузки Товара, позволяющее беспрепятственно и быстро осуществить разгрузку. Покупатель обязан обеспечить строповку (обвязку) Товара для производства разгрузочных работ, в том числе манипулятором. Если разгрузка Товара осуществляется силами Поставщика, а Покупатель просит выгрузить Товар через какие-либо препятствующие разгрузочным работам объекты (заборы, ограды, столбы освещения, ЛЭП, деревья и прочее), затраты, связанные с повреждением и восстановлением указанных обектов, полностью ложатся на Покупателя.

9. Покупатель обязан обеспечить разгрузку транспортного средства грузоподъемностью 1,5 – 5 тонн в течение 1 часа, свыше 5 тонн – в течение 2 часов.

10. В случае простоя транспортного средства с товаром в месте выгрузки свыше времени, указанного в п.9 Покупатель обязан оплатить водителю простой в размере 1000 р. за каждый последующий час.

11. Приемка Товара по количеству, ассортименту и качеству (внешнему виду) осуществляется во время передачи Товара Покупателю или его уполномоченному представителю. При обнаружении недостатков Товара во время его приемки Покупатель обязан приостановить разгрузку и немедленно известить Поставщика о выявленных дефектах. В одностороннем порядке составить акт с указанием подробного перечня выявленных дефектов и отметить это в товарной накладной. После приемки и подписания документов на Товар Покупатель лишается права в дальнейшем предъявлять претензии Поставщику по количеству, ассортименту и качеству Товара.

12. В случае не предоставления доверенностей на уполномоченное лицо выгрузка Товара не производится.

13. Поставщик не принимает претензии по качеству при неправильной разгрузке заказа (сбрасыванием).

14. При отказе Покупателем от заказа после его оплаты Покупатель возмещает Поставщику расходы, понесенные в связи с совершением действий по выполнению Договора.

15. При оплате Заказа на условиях предоплаты (менее 100%) Покупатель обязан произвести окончательный расчет до момента поставки.

Целевые и нецелевые эффекты новых ортостерических и аллостерических активаторов GPR84

Материалы

PSB-16671 ¹⁶, соединение 104 (9- (5-циклопропил- [1,2,4] оксадиазол-3- илметокси) -2 – ((R) -1- [1,4] диоксан-2-илметокси) -6,7-дигидропиримидо [6,1-a] изохинолин-4-он), соединение 107 (2- ([1,4] диоксан-2-илметокси) -9- (3-фениламинопроп-1-инил) -6,7-дигидропиримидо [6,1-a] изохинолин-4-он) ¹¹ и [³ H] 9543 ¹¹ были предоставлены Laurent Saniere (Galapagos NV). 2- (гексилтиол) пиримидин-4,6 диол (2-HTP) был предоставлен Трондом Ульвеном, Университет Копенгагена.

Мыши с нокаутом GPR84

GPR84 (инвентарный номер GenBank NM_030720, идентификационный номер Ensembl ENSMUSG00000063234) Мыши KO ²⁷ были предоставлены Deltagen в соответствии с лицензионным соглашением GlaxoSmithKline. Нацеливание заменяет 257 п.н. кодирующей последовательности кассетой экспрессии IRESαLacZα poly (A) и кассетой позитивной селекции, которая содержит ген неомицинфосфотрансферазы, управляемый промотором PGK (Neo).Вставка LacZ IRESLacZ вводит сигнал преждевременной остановки трансляции, который удаляет первые три предсказанные последовательности трансмембранного домена. Разрушение гена GPR84 подтверждали с помощью ПЦР и стандартного электрофореза в агарозном геле с использованием следующих праймеров: специфичный для гена (эндогенный), 5′-CAGATGCCAACTTCTCCTGCTA-3 ‘; специфичный для гена (целевой, эндогенный), 5’-GAGGTAGCGTCCTAGAGCAAT-3 ‘; и Neo (нацеленный), 5’-GCCTCTGTTCCACATACA-3 ‘.

Мышей, образующих исходные племенные пары, поставляла компания GlaxoSmithKline, которая состояла из гетерозиготных (HET) потомков F1 от разведения WT и KO.Пары HET были выведены в домашних условиях с 8-недельного возраста для получения пометов смешанных генотипов в соответствии с менделевской генетикой.

Содержание животных

Мышей дикого типа C57BL / 6 (Глазго) и GPR84 с нокаутом (Лондон) кормили ad libitum стандартной пищей для мышей. Использовали самцов и самок в возрасте 8–15 недель. За животными ухаживали в соответствии с национальными правилами проведения экспериментов на животных. Все эксперименты на животных проводились под соответствующими лицензиями домашнего офиса.Эксперименты проводились под номером лицензии учреждения (PEL) 70/2901 (Kings College) и 70/8473 (Глазго).

Клонирование мыши GPR84

GPR84 мыши клонировали из линии лейкемических макрофагов мыши RAW 264.7. РНК экстрагировали из клеток RAW 264.7 с использованием набора RNeasy mini (Qiagen) с последующим синтезом кДНК с использованием набора для обратной транскрипции QuantiTect (Qiagen) в соответствии с инструкциями производителя. Используя эту кДНК в качестве матрицы, метка эпитопа FLAG (аминокислотная последовательность DYKDDDDK) была включена на N-конце GPR84 мыши с помощью реакции ПЦР с использованием следующих праймеров:

Смысл GPR84 мыши: 5 ‘CAT GTT GGA TCC GCC ACC ATG GAC TAC AAG GAC GAC GAT GAT AAG TGG AAC AGC TCA GAT GCC AAC 3 ′.

Мышиный антисмысловой GPR84: 5 ‘CAT GTT GCG GCC GC G ATG GAA CCG GCG GAA ACT CTG 3′.

Подчеркнуты последовательности, соответствующие сайтам BamHI и NotI, необходимые для клонирования.

Полученный продукт амплификации ПЦР, FLAG-mouse (m) GPR84, затем был субклонирован в рамке считывания между сайтами BamHI и NotI плазмиды eYFP-pcDNA5 / FRT / TO, в конечном итоге сгенерировав FLAG-mGPR84-eYFP-pcDNA5 / FRT / TO. построить. Затем идентичность конструкции подтверждали секвенированием ДНК.Конструкцию слитого белка FLAG-человека (h) GPR84-Gα _i2 клонировали в векторе экспрессии pcDNA5 / FRT / TO, как описано ранее ¹¹. Для создания слитой конструкции FLAG-mGPR84-Gα _i2 сначала внутренний сайт BamHI Gα _i2 FLAG-hGPR84-Gα _i2 был тихо мутирован посредством сайт-направленного мутагенеза с использованием метода QuikChange (Stratagene, Cheshire , UK) с использованием следующих праймеров:

C636T Gα _i2 Вперед: 5 ‘GAGCGGAAGAAGTGGATTCACTGCTTTGAGGGTG 3’.

C636T Gα _i2 Реверс: 5 ′ CACCCTCAAAGCAGTGAATCCACTTCTTCCGCTC 3 ′.

Затем была создана конструкция слитого белка FLAG-mGPR84-Gα _i2 путем замены человеческого GPR84 плазмиды FLAG-hGPR84-C636TGα _i2 pcDNA5 / FRT / TO последовательностью, соответствующей GPR84 мыши, с использованием рестрикционных ферментов BamHI и Not1.

Экстракция

РНК и анализ экспрессии генов

РНК экстрагировали из клеток THP-1 с использованием набора RNeasy (Qiagen). От 1000 до 2000 нг РНК подвергали обратной транскрипции с использованием набора для обратной транскрипции кДНК High Capacity (Applied Biosystems).qPCR выполняли с помощью системы обнаружения последовательностей Applied Biosystems ABI-PRISM 7900HT. Экспрессию генов нормализовали к 18 S рибосомной РНК эукариот с использованием основной смеси qPCR (Applied Biosystems) и следующих анализов экспрессии генов TaqMan® (Applied Biosystems): GPR84 (Hs00220561_m1) и 18 S рРНК эукариот (Hs99999901_s1). Экспрессию GPR84 в клетках RAW 264.7 подтверждали с помощью ОТ-ПЦР с использованием праймеров F-5′-AGGTGACCCGTATGTGCTTC-3 ‘и R-5′-ACTCTGGTTCCGGATGTTTG-3’. Для GAPDH праймеры, использованные для ОТ-ПЦР, были:

F-5′-TTGATGGCAACAATCTCCAC-3 ‘и R-5′-CGTCCCGTAGACAAAATGGT-3’.

Предполагаемый размер ампликона кДНК: 110 п.н. Изображения, показанные на рис. 7, были получены с использованием системы Gene Genius Bio Imaging System от Syngene и GeneSnap v7.12.

Экспрессия слитых белков человека и мыши GPR84-Gα

_i2

Индуцируемые доксициклином Flp-In T-REx-293 стабильные клеточные линии, экспрессирующие конструкции FLAG-hGPR84-Gα _i2 и FLAG-mGPR84-Gα _i2 генерируется котрансфекцией интересующей рецепторной конструкции и интеграции плазмиды pOG44 (1: 9) в клетки Flp-In T-REx-293 с использованием 1 мг / мл катионного комплексообразователя ДНК полиэтиленимина (PEI, MW-25000).Flp-In T-REx-293 клетки поддерживали в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM) без пирувата натрия (Invitrogen) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS), 1% пенициллина / стрептомицина и 10 мкг / мл бластицидина при 37 °. C в 5% CO ₂ увлажненной атмосфере. Клетки трансфецировали при слиянии от 60 до 80% всего 8 мкг ДНК (0,8 мкг представляющего интерес рецептора в векторе pcDNA5 / FRT / TO и 7,2 мкг плазмидного вектора pOG44) и PEI (соотношение ДНК / PEI 1: 6). каждый разводят в 150 мМ стерильном NaCl, pH 7.4. Смесь комплексов ДНК и PEI инкубировали при комнатной температуре в течение 10 минут, а затем добавляли к клеткам. Стабильно трансфицированные клетки отбирали путем замены среды на среду, содержащую 200 мкг / мл гигромицина В, через 48 часов после трансфекции. После выделения стабильных трансфектантов экспрессию рецепторной конструкции индуцировали при необходимости путем обработки клеток 100 нг / мл доксициклина в течение 24 часов.

Культура клеток

Моноциты THP-1 поддерживали при плотности между 1 × 10 ⁵ – 8 × 10 ⁵ клеток / мл в RPMI-1640 (Invitrogen) с добавлением 10% (об. / Об.) Тепла инактивированный FBS, смесь 1% пенициллина / стрептомицина и 2 мМ L-глутамина при 37 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO ₂. Клетки, засеянные с плотностью 4 × 10 ⁵ клеток / мл, подвергали воздействию липополисахарида (LPS) (100 нг / мл) (Sigma, Дорсет, Великобритания) в течение 24 часов перед экстракцией РНК или приготовлением мембраны. Макрофаги мыши RAW 264.7 поддерживали в DMEM (с 4,5 г / л D-глюкозы, 0,11 г / л пирувата натрия) с добавлением 10% инактивированного нагреванием FBS, 1% пенициллина / стрептомицина и 2 мМ L-глутамина при 37 ° C и 5 ° C. % CO ₂ увлажненная атмосфера. Для усиления экспрессии GPR84 клетки RAW 264.7 обрабатывали 100 нг / мл LPS в течение 5 ч перед приготовлением мембраны.Клетки Flp-In ™ T-REx ™ -293 (Invitrogen) поддерживали в среде Игла, модифицированной Дульбекко, без пирувата натрия (Invitrogen), с добавлением 10% (об. / Об.) Инактивированной нагреванием FBS, 1% смеси пенициллина / стрептомицина и 10% мкг / мл бластицидина при 37 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO ₂. Экспрессию соответствующей конструкции из локуса Flp-In ™ T-REx ™ индуцировали обработкой 100 нг / мл доксициклина в течение 24 часов.

Подготовка мембраны

Мембраны были получены из THP-1 или RAW 264.7 клеток в присутствии или в отсутствие стимуляции LPS или клеток Flp-In ™ T-REx ™ -293 после обработки доксициклином для индукции экспрессии рецептора. Клетки центрифугировали при 3000 об / мин в течение 5 мин при 4 ° C. Гранулы ресуспендировали в буфере TE (10 мМ Трис-HCl, 0,1 мМ EDTA; pH 7,5), содержащем смесь ингибиторов протеаз (Roche, Applied Science, West Sussex, UK), и гомогенизировали с помощью ручного гомогенизатора на 5 мл. Этот материал центрифугировали при 1500 об / мин в течение 5 минут при 4 ° C, а супернатант дополнительно центрифугировали при 50000 об / мин в течение 45 минут при 4 ° C.Полученный осадок ресуспендировали в буфере TE и оценивали содержание белка с использованием набора для анализа белка BCA (Pierce, Fisher Scientific, Loughborough, UK).

Выделение нейтрофилов из костного мозга мыши

Большеберцовые и бедренные кости мышей с нокаутом GPR84 и мышей дикого типа были удалены и освобождены от мягких тканей. Оба эпифиза удаляли стерильными ножницами, а кости промывали шприцем, заполненным ледяным RPMI 1640. Суспензию костного мозга пропускали через сетчатый фильтр для клеток 100 мкм и собирали в стерильную полипропиленовую пробирку на 15 мл для центрифугирования при 300 g в течение 5 мин при 4 ° C.Полученный осадок ресуспендировали в PBS, содержащем 1% FBS и 2 мМ EDTA. Нейтрофилы выделяли с использованием набора EasySep ™ Mouse Neutrophil Enrichment Kit в соответствии с инструкциями производителя (STEMCELL Technologies UK Ltd, Кембридж, Великобритания).

Выделение нейтрофилов из цельной крови человека

Образцы периферической крови были получены от нормальных здоровых доноров в соответствии с протоколами, одобренными Комитетом по этике Медицинского, ветеринарного колледжа и наук о жизни Университета Глазго.Доноры предоставили письменное информированное согласие. Затем нейтрофилы выделяли из цельной крови человека с использованием набора для выделения нейтрофилов MACSxpress® в соответствии с инструкциями производителя (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Германия).

Анализ миграции нейтрофилов

После выделения нейтрофилы немедленно ресуспендировали в RPMI 1640, содержащем 0,5% бычьего сывороточного альбумина, не содержащего жирных кислот. Тестируемые соединения получали в указанных концентрациях в том же буфере и добавляли на дно 96-луночного планшета (Sigma-Aldrich).Затем вставки прикрепляли к планшету и добавляли нейтрофилы (3000 клеток / мкл). Клетки инкубировали при 37 ° C в течение 1,5 ч, затем мигрировавшие клетки собирали и оценивали содержание АТФ с использованием системы ATPlite Luminescence Assay System® в соответствии с инструкциями производителя (Perkin Elmer, Бакингемшир, Великобритания).

Подготовка нейтрофильных мембран

Нейтрофилы ресуспендировали в 50 мМ Tris HCL, 10 мМ MgCl ₂ pH 7,4 и центрифугировали при 11000 g в течение 15 мин при 4 ° C.Супернатант отбрасывали, осадок ресуспендировали в 50 мМ Tris HCl, pH 7,4, и центрифугировали при 11000 g в течение 15 минут при 4 ° C. Полученный осадок ресуспендировали в 50 мМ Трис-HCl и определяли концентрацию белка с использованием набора для анализа белков BCA (Expedeon, Кембридж, Великобритания).

Анализ связывания радиолиганда

[³ H] G9543 является аналогом соединений 104 и 107, как описано ранее ¹¹. Поскольку [³ H] G9543 связывается с человеческим GPR84 с субнМ сродством ¹¹, большинство анализов проводили с использованием концентрации, близкой к насыщающей (2 нМ) [³ H] G9543, связывающего буфера (PBS с 0.5% бычий сывороточный альбумин, не содержащий жирных кислот; pH 7,4) в стеклянных пробирках общим объемом 500 мкл. Связывание инициировали добавлением мембран THP-1 (5 мкг белка на пробирку). Анализы выполняли при 25 ° C в течение 1 ч перед прекращением путем добавления ледяного PBS и вакуумной фильтрации через стеклянные фильтры GF / C с использованием 24-луночного харвестера клеток Brandel (Alpha Biotech, Глазго, Великобритания). Каждую реакционную пробирку промывали 3 раза ледяным PBS. Фильтрам давали высохнуть, а затем помещали в 3 мл Ultima Gold ™ XR (PerkinElmer Life Sciences, Биконсфилд, Великобритания).Радиоактивность определяли количественно методом жидкостной сцинтилляционной спектроскопии. Специфическое связывание определяли как разницу между связыванием, обнаруженным в присутствии и отсутствии 1 мкМ соединения 104 ¹¹. Поправка на заполняемость позволила рассчитать B _max. В некоторых исследованиях использовался диапазон концентраций [³ H] G9543, чтобы сделать возможным оценку K _d лиганда и прямое измерение B _max.

[

³⁵ S] Анализ включения GTPγS

Подготовленный мембранный белок (5 мкг THP-1, RAW-264.7, 3 мкг Flp-In клеток T-REx 293) инкубировали в буфере для анализа (20 мМ HEPES, 5 мМ MgCl ₂, 160 мМ NaCl, 0,05% не содержащий жирных кислот бычий сывороточный альбумин; pH 7,5), содержащий указанные концентрации лиганда. В экспериментах, разработанных для оценки ингибирования стимуляции агонистами, препараты мембран предварительно инкубировали с соединением-антагонистом 107 в течение 15 мин при комнатной температуре перед добавлением 2-HTP или PSB-16671. В экспериментах, разработанных для оценки потенциальных аллостерических взаимодействий между PSB-16671 и 2-HTP, оба лиганда были добавлены в препарат мембраны одновременно.Реакцию инициировали добавлением [³⁵ S] GTPγS (50 нКи на реакцию) с 1 мкМ GDP и инкубировали при 30 ° C в течение 60 минут. Реакцию останавливали быстрой вакуумной фильтрацией через 96-луночные микропланшеты со стекловолоконным фильтрующим дном GF / C (PerkinElmer Life Sciences, Beaconsfield, UK) с использованием UniFilter FilterMate Harvester (PerkinElmer Life Sciences, Beaconsfield, UK). Несвязанный радиолиганд удаляли из фильтров тремя промывками ледяным PBS. MicroScint-20 (PerkinElmer Life Sciences, Биконсфилд, Великобритания) добавляли к высушенным фильтрам, и связывание [³⁵ S] GTPγS определяли количественно с помощью жидкостной сцинтилляционной спектроскопии.

Анализы взаимодействия β-аррестина-2

Для оценки потенциальных агонистических эффектов лигандов GPR84 на филогенетически родственный рецептор GPR35, были котрансфицированы формы GPR35a человека или GPR35 с С-концом, усиленные желтым флуоресцентным белком (eYFP) с С-концом. с меченной люциферазой формой β-аррестина-2 в клетки HEK293, как описано ранее ²¹. Через 24 часа клетки обрабатывали различными концентрациями агониста GPR35 лодоксамина ²¹ или 2-HTP или PSB-16671.Затем измеряли резонансный перенос энергии биолюминесценции через 5 минут после добавления субстрата люциферазы коелентеразин-h, как в ²¹.

Анализ сродства лиганда / кооперативности

Для расчета аллостерических параметров данные, полученные в экспериментах по аллостеризму, были проанализированы с использованием операционной модели аллостерической модуляции, описанной ранее ^18,32. Общий вариант этой модели обозначается следующим уравнением:

$$ {\ rm {E}} = \ frac {{E} _ {m} ({\ tau} _ {A} [A] {({ K} _ {B} + \ alpha \ beta [B] + {\ tau} _ {B} [B] {K} _ {A})} ^ {n}} {([A] {K} _ { B} + {K} _ {A} {K} _ {B} + [B] {K} _ {A} + \ alpha [A] {[B]} ^ {n} + ({\ tau} _ {A} {[A ({K} _ {B} + \ alpha \ beta [B]) + {\ tau} _ {B} [B] {K} _ {A})} ^ {n}} $ $

где, E – измеренный ответ, [A] и [B] – концентрация ортостерического и аллостерического лиганда в равновесии, соответственно; K _A и K _B представляют собой аффинности связывания двух лигандов с рецептором. ; α – фактор кооперативности связывания, отражающий аллостерический эффект на аффинность связывания ортостерического агониста с рецептором, β – фактор кооперативности активации, обозначающий эмпирическую меру аллостерического эффекта на ортостерическую эффективность.Значения τ _A и τ _B измеряют способность ортостерического и аллостерического лиганда, соответственно, непосредственно активировать рецептор. E _m – это максимальный отклик системы, а n – коэффициент наклона функции преобразователя. Чтобы согласовать данные аллостеризма в глобальном масштабе с помощью этого уравнения, значения E _m и n всегда были ограничены, а другие параметры (K _A, K _B, α, β, τ _A и τ _B) были оценены. .

БРАТ FT И TFL1 (BFT), член семейства FT / TFL1, демонстрирует отчетливый паттерн экспрессии во время вегетативного роста Arabidopsis

@article {763f315d634a4405a32df2b721d0da03,

title = «БРАТ FT И TFL1» ), член семейства FT / TFL1, демонстрирует отчетливый паттерн экспрессии во время вегетативного роста Arabidopsis »,

abstract =« Переход к стадии цветения точно контролируется несколькими классами регуляторных молекул. БРАТ FT И TFL1 (BFT) является членом семейства FLOWERING LOCUS T (FT) / TERMINAL FLOWER 1 (TFL1), важного класса регуляторов развития цветков с неустановленной биохимической функцией. BFT обладает активностью, подобной TFL1, и играет роль в развитии пазушных соцветий. Чтобы выяснить характер экспрессии BFT, мы проанализировали субклеточную локализацию и условную экспрессию BFT в этом исследовании. Мы создали растения 35S :: BFT: GFP для исследования субклеточной локализации белка BFT.35S :: BFT: растения GFP показали позднее цветение, так же как и растения 35S :: BFT. BFT: слитый белок GFP был локализован в ядре и плазматической мембране, что отличалось от паттерна локализации FT и TFL1. Экспрессия BFT была вызвана условиями абиотического стресса. Обработка ABA, засухи и осмотического стресса индуцировала экспрессию BFT, тогда как условия холодного, солевого и теплового стресса не вызывали, что позволяет предположить, что BFT играет роль в регулировании времени цветения и структуры соцветий в условиях засухи. Характер индукции BFT отличался от такового для других генов семейства FT / TFL1. Наши исследования показали, что BFT показал отчетливый паттерн экспрессии от его гомологичных генов во время вегетативного роста у Arabidopsis. »,

keywords =« Абиотический стресс, брат FT и TFL1, локус цветения T, время цветения, субклеточная локализация, терминальный цветок 1 “,

author =” Чунг, {Кён Сук} и Ю, {Со Ён} и Ю, {Сон Чон} и Ли, {Чон Соб} и Ан, {Джи Хун} “,

note =” Информация о финансировании : Эта работа была поддержана Creative Research Initiatives (R16-2008-106-01001-0) MEST / KOSEF (J.H.A.) и Центром функциональной геномики сельскохозяйственных культур (CG1211) MEST / KOSEF (J.S.L.). K.S.C., S.J.Y. и С.Ю. поддерживались программой BK21. “,

год =” 2010 “,

месяц = сен,

doi =” 10.4161 / psb.5.9.12415 “,

language =” English “,

volume =” 5 “,

pages =” 1102–1104 “,

journal =” Сигнализация и поведение предприятия “,

issn =” 1559-2316 “,

publisher =” Landes Bioscience “,

number =” 9 “,

}

ChIP-seq анализ PPD2-GS yellow по всему геному.

ChIP был выполнен …

Контекст 1

… PPD2-GS желтый, 1562 пика, соответствующих 1336 генам, были обнаружены на пересечении двух повторов (дополнительная таблица S2B). Сравнение результатов GS yellow и HBH показало, что 45% генов-мишеней PPD2-HBH были подтверждены PPD2-GS yellow (рис. 3A). Из 11 транскрипционно регулируемых генов-мишеней, обнаруженных в обоих репликах HBH TChAP (см. Выше), 10 были подтверждены в обоих репликах GS желтого цвета. При увеличении на уровне пика девять пиков, покрывающих восемь транскрипционно регулируемых мишеней, показали сходный паттерн локализации пика как в наборах данных желтого цвета HBH, так и GS…

Контекст 2

… локализации картированных пиков, сохраняемых каждым тегом, продемонстрировали, что большинство событий связывания происходило в 5′-нетранслируемой области и 1-килобайтной восходящей области (рис. 3, AC) , подтверждая связывание PPD2 с промоторными областями гена. Кроме того, анализ мотивов de novo выявил чрезмерную представленность указанного G-бокса в обоих желтых образцах PPD2-GS (рис. 3D). Обогащенный анализ набора данных GS yellow подтвердил данные TChAP, показывая, что PPD2 предпочитает связываться с генами, участвующими в…

Контекст 3

… сопоставленных пиков, сохраняемых каждым тегом, продемонстрировали, что большинство событий связывания произошло в 5′-нетранслируемой области и в восходящей области размером 1 т.п.н. (рис. 3, AC), что подтверждает достоверность связывание PPD2 с промоторными участками гена. Кроме того, анализ мотивов de novo выявил чрезмерную представленность указанного G-бокса в обоих желтых образцах PPD2-GS (рис. 3D). Обогащенный анализ набора данных GS yellow подтвердил данные TChAP, показав, что PPD2 предпочитает связываться с генами, участвующими в регуляции транскрипции (P <1.38E-30) и гормональный ответ (P <2,86E-34; дополнительная таблица S3, A и B). Интересно, что при анализе 250 наиболее обогащенных генов ...

Context 4

… желтая линия использовалась для всех дальнейших анализов. В соответствии с предыдущим исследованием, в котором анализировалась линия pUBIL: ZmAN3-GS (Nelissen et al., 2015), общий конечный размер листьев полученной желтой линии pUBIL: ZmAN3-GS существенно не отличался от такового у желтой линии pUBIL: ZmAN3-GS. нетрансгенные братья и сестры (t-критерий Стьюдента, P = 0.24; n ≥ 15; Дополнительный рис. S3), но желтые растения pUBIL: ZmAN3-GS развивались медленнее, чем нетрансгенные братья и сестры. Отсутствие фенотипа роста контрастирует с фенотипом, наблюдаемым у Arabidopsis, где избыточная экспрессия AN3 приводит к увеличению конечного размера листа). Однако у Arabidopsis использовался сильный промотор 35S, тогда как у кукурузы мы использовали …

Идентификация новых белков фрагмопластов с помощью GFP

Даниэль ван Дамм, Франсуа-Ив Буге ¹, Крис Ван Поук, Дирк Инзе и Дэнни Гилен

Департамент системной биологии растений, Межвузовский институт биотехнологии Фландрии, Гентский университет, Technologiepark 927, B-9052 Гент, Бельгия

текущий адрес: Laboratoire Arago, UMR7628 CNRS, Universit? Pierre et Marie Curie, BP 44, 66651 Banyuls sur Mer cedex, Франция
2, которому следует адресовать корреспонденцию. Электронная почта [email protected]; факс 32-9-3313809

Аннотация

Чтобы идентифицировать молекулярных игроков, участвующих в цитокинезе и определении плоскости деления, геном Arabidopsis thaliana был исследован на предмет потенциальных генов цитокинеза. Было выбрано более 100 открытых рамок считывания на основе сходства с генами цитокинеза дрожжей и животных, генами цитоскелета и полярности, а также генами Nicotiana tabacum, демонстрирующими контролируемую экспрессию клеточного цикла. Субклеточную локализацию этих белков определяли посредством GFP-мечения в клетках табака Bright Yellow-2 (BY-2) и растениях Arabidopsis.Детальная конфокальная микроскопия идентифицировала 15 белков, нацеленных на различные области фрагмопласта и клеточной пластинки. EB1- и MAP65-подобные белки были связаны с плюс-концом, минус-концом или по всей длине микротрубочек. Актин-связывающий белок миозин, киназа Aurora и новый белок клеточного цикла, обозначенный T22, накапливались преимущественно в средней линии. EB1 и Aurora, в дополнение к другим регуляторным белкам (гомологам Mob1, Sid1 и Sid2), были нацелены на ядро, предполагая, что эта органелла действует как координирующий узел для цитокинеза.

Ссылки на дополнительные материалы

все локализации в базе данных представляют собой C-концевые слитые белки с EGFP,
выражается под промотором 35S, если не указано иное.
Файлы изображений в базе данных лучше всего просматривать с помощью Quicktime.
Пожалуйста, свяжитесь со мной, если возникнут проблемы с просмотром файлов. электронная почта: [email protected]

Купить гидрохлорид ПСБ 11 (BT-254140) | THE BioTek

Home
Товар
Ингибиторы
ПСБ 11 гидрохлорид

ПСБ 11 гидрохлорид Ингибиторы Мощный и селективный антагонист аденозинового рецептора A3 человека с низким сродством к рецептору A3 крысы (значения Ki равны 2.

3 и> 10000 нМ соответственно). Обладает> 1000-кратной селективностью по рецепторам A1 и A2A человека (значения Ki составляют 4,1 и 3,3 мкМ соответственно) и> 180-кратной селективностью по рецепторам A1, крысы A2A и A2B мыши. Действует как обратный агонист в анализе связывания [35S] GTPγS в клетках hA3-CHO (IC50 = 36 нМ). 331,8

Состав: 331.8

Источник:

Использование:

Продукт предназначен только для исследований без участия человека. Не для терапевтического или ветеринарного использования.

Каталожный номер: bt-254140

Номер CAS: 453591-58-7

Молекулярная формула: C16h27N5O.HCl

Молекулярный вес: 331,8

Внедрение продукции Онлайн-запрос

Номер CAS	453591-58-7
Название продукта	ПСБ 11 гидрохлорид
Молекулярная формула	С16х27Н5О. HCl
Молекулярный вес	331,8
Описание	Сильный и селективный антагонист аденозинового рецептора A3 человека с низким сродством к рецептору A3 крысы (значения Ki составляют 2,3 и> 10000 нМ соответственно). Обладает> 1000-кратной селективностью по рецепторам A1 и A2A человека (значения Ki составляют 4,1 и 3,3 мкМ соответственно) и> 180-кратной селективностью по рецепторам A1, крысы A2A и A2B мыши.Действует как обратный агонист в анализе связывания [35S] GTPγS в клетках hA3-CHO (IC50 = 36 нМ).
Синонимы	(8R) -8-Этил-1,4,7,8-тетрагидро-4-5H-имидазо [2,1-i] пурин-5-она гидрохлорид
Последнее изменение	08 марта 2019

Будущее общественного вещания – Комитет по цифровым технологиям, культуре, СМИ и спорту

Будущее общественного вещания Содержание

1. Для процветания общественного вещания в будущем правительству необходимо будет действовать – необходимы изменения, требующие полномочий министерств, чтобы гарантировать, что система общественного вещания остается устойчивой в контексте сегодняшнего значительно расширяющегося и все более глобального рынка СМИ. (Пункт 12)

2. Несмотря на длительное снижение количества просмотров, мы признаем, что линейное телевидение по-прежнему имеет решающее значение для определенной аудитории. (Пункт 16)

3.Универсальность лежит в основе общественного вещания и должна оставаться таковой. Линейное вещательное телевидение ОВО остается важным, и с учетом задержек с развертыванием оптоволоконной широкополосной связи полностью онлайновая система общественного вещания, обеспечивающая универсальный доступ, еще не жизнеспособна. В течение текущего переходного периода, когда значительный объем контента становится доступным в Интернете, интересы потребителей, которые полагаются на линейное телевидение, должны быть сохранены. Ofcom продолжает призывать ОВО делать больше с меньшими затратами, но не уточняет, как они ожидают этого.Ожидания и доходы общественных вещателей должны быть реалистичными по отношению к доступному финансированию. Ожидания и доходы общественных вещателей должны быть реалистичными по отношению к имеющемуся финансированию. Если бюджетов будут продолжать сокращаться в реальном выражении , Правительству следует пересмотреть ожидания, установленные для ОВО. (пункт 24)

4. Пандемия Covid-19 высветила роль, которую контент общественного вещания может сыграть в объединении страны, создании общего национального опыта и предоставлении доступа к актуальной, специфической для Великобритании информации и развлечениям.(Пункт 28)

5. Пандемия усилила критическую важность свободного и легкого доступа к надежным источникам новостей. Во время кризиса аудитория показала, что ценит СОВ. ОВО сыграли определенную роль в борьбе с распространением дезинформации в Интернете, а специальные выпуски новостей сыграли решающую роль в распространении важной информации среди населения в целом. Однако в случае отказа Amazon и Google разрешить BBC редакционный надзор за содержанием Covid-19 и информацией, размещенной на их умных динамиках, может показаться, что эти платформы отдали приоритет контролю информации над журналистской честностью.(Пункт 35)

6. Пандемия усилила важность предоставления местных и региональных новостей. Предоставление новостей странам и регионам не должно больше пострадать в результате бюджетных ограничений. Мы осознаем реальный риск для предоставления региональных новостных программ, и мы непреклонны в том, что качество и актуальность для местного населения программ для стран и регионов не должны подвергаться дальнейшей угрозе. Региональные новостные программы должны быть репрезентативными и актуальными для аудитории, для которой они транслируются. Мы рекомендуем Ofcom провести анализ качества и актуальности местных и региональных новостей, о котором будет сообщено до начала переговоров по новой Хартии BBC. (пункт 40)

7. Обращение к более молодой аудитории сейчас и построение отношений с ней имеет первостепенное значение, если ОВО намерены оставаться популярными и устойчивыми в долгосрочной перспективе. То, как люди получают доступ к контенту, особенно в возрасте до 35 лет, быстро меняется, и пандемия Covid-19 ускорила это изменение.Поведение молодой аудитории является индикатором будущих тенденций, и ОВО рискуют потерять связь с людьми моложе 35 лет. Если общественные вещательные компании не сделают больше для привлечения более молодой аудитории, ключевой принцип универсальности, лежащий в основе их существования, окажется под угрозой. Чтобы эти усилия увенчались успехом, мы рекомендуем внести изменений в структуру регулирования, чтобы ОВО могли быстрее и проще внедрять инновации, а могли лучше конкурировать в сети .(Пункт 48)

8. Мы рады, что Ofcom обратил внимание на дефицит детского программирования в портфелях общественного вещания в 2018 году, и считаем жизненно важным, чтобы он продолжал регулярно пересматривать показатели общественного вещания в этой области. Мы рекомендуем Правительству оценить успех Фонда контента для молодежи по сравнению с его целями и расширить схему, если будет обнаружено, что увеличит инвестиции в оригинальный контент для детей в Великобритании. (пункт 52)

9. Мы признаем, что BBC предоставила рекордный объем образовательных ресурсов во время пандемии Covid-19, особенно в периоды закрытия школ по всей стране. Хотя это ключевой пример ценности, которую предоставляет BBC, BBC потребовалось слишком много времени, чтобы сделать больше своего контента доступным на телевидении. Мы приветствуем работу BBC по предоставлению этих ресурсов, но призываем ее продолжать предоставлять доступ к большему количеству своего контента другими средствами, помимо Интернета, чтобы обеспечить более равный доступ . (пункт 56)

10. Правительству потребовалось почти 10 месяцев, чтобы отреагировать на консультацию по декриминализации уклонения от уплаты лицензионных сборов. Подобные задержки DCMS в реформировании других сфер вещания, таких как известность, могут вызвать серьезную озабоченность. Еще большее беспокойство вызывало то, что долго откладывающийся ответ просто создавал дополнительную неопределенность. Вопрос о декриминализации может быть использован правительством в качестве инструмента торга во время продолжающихся переговоров об урегулировании лицензионных сборов с BBC и S4C, и тем самым подорвать один из основных принципов общественного вещания: его следует исключить из-под государственного вмешательства. Мы призываем Правительство предоставить гарантии, что вопрос декриминализации не будет использоваться в качестве инструмента переговоров во время текущих переговоров по урегулированию лицензионных сборов с BBC и S4C. Мы также рекомендуем , чтобы Правительство завершило свою дальнейшую работу над схемами правоприменения, и опубликовало свои выводы к концу нынешней парламентской сессии. (пункт 61)

11.Продолжающийся рост невыплаты телевизионных лицензий в Великобритании вызывает озабоченность, так же как и тот факт, что цель BBC – 5,9% уклонения к марту 2021 года не будет достигнута с большим отрывом. Мы также обеспокоены тем, что неспособность окончательно разрешить спекуляции о декриминализации телевизионных лицензий уклонение от уплаты платы может усугубить ситуацию, и рекомендуем правительству предоставить некоторую определенность по этому вопросу как можно скорее. (пункт 64)

12. Мы осознаем проблемы, связанные с лицензионным сбором, и в приложении к настоящему отчету изучаем существующие альтернативы. Ни один из них не является достаточно привлекательным, чтобы оправдать рекомендацию на следующий период Устава, чтобы они заменили текущую модель лицензионных сборов, не в последнюю очередь с учетом сбоев и затрат, связанных с этим, и, в конечном итоге, лицензионный сбор остается предпочтительным вариантом на этот период. Правительству необходимо предоставить сильную альтернативу лицензионному сбору, которую оно может поставить в парламент, или решительно поддержать текущую модель , по крайней мере, на следующий период Хартии (2028–2038) активно помогать BBC в борьбе с уклонением от сообщения .(Пункт 65)

13. Текущие требования к рекламным объявлениям привели к процветанию производственной экономики, которая привлекла внимание потоковых сервисов, но рост спроса на видео оказывает давление на Условия торговли. Услуги по подписке на видео по запросу должны инвестировать в экологию производства, а также извлекать из этого выгоду, но при любом шаге по реформированию Условий торговли необходимо учитывать расходящиеся бизнес-модели различных уполномоченных по экологии производства в Великобритании.(Пункт 72)

14. Нас не убеждают аргументы в пользу того, что известность можно оставить рынку просто потому, что контент PSB популярен и если такой организации, как Freeview, которая представляет интересы более 70 телеканалов, трудно вести переговоры с глобальными платформами и Производителям телевизоров вряд ли будет проще для отдельных ОВО. Как мы коснемся далее в Отчете, органы по вопросам конкурентной политики в настоящее время развивают свой подход к платформам и приложениям, имеющим «стратегический рыночный статус», и к тому, как они могут действовать в качестве привратников на онлайн-рынках с потенциалом антиконкурентного использования рыночной власти.Точно так же следует думать о производителях телевизионного оборудования (и их операционных систем и консолидирующих телевизионных приложений). (Пункт 80)

15. Правительство слишком медленно отреагировало на рекомендации Ofcom от 2019 года по обновлению законодательства о выдающихся правах. Мы разочарованы тем, что правительство ожидает, что этот процесс займет еще два года; срочно необходимо новое первичное законодательство, а экология СМИ развивается слишком быстро, чтобы правительство могло откладывать какие-либо дальнейшие действия. Мы рекомендуем Правительству уделить первоочередное внимание новому первичному законодательству, чтобы обновить Закон о коммуникациях 2003 и предоставить ОВО известность, выходящую за рамки Электронного руководства по программе .Правительству следует постараться опубликовать законопроект в проекте на предстоящей парламентской сессии, прежде чем найти времени для введения и принятия этого закона до конца 2022 года. платформ, таких как смарт-телевизоры, мы также рекомендуем , чтобы проигрыватели видео по запросу PSB были охвачены их ремитами общественного вещания . (пункт 81)

16.Мы признаем, что в некоторых программах есть упоминание оригинальных производителей мелким шрифтом, но сомневаемся, что это вполне соответствует духу аккредитации всех, кто занимается правильным брендингом. Мы считаем важным, чтобы контент, созданный PSB, можно было четко идентифицировать как таковой. (Пункт 87)

17. Мы не считаем, что предоставление Ofcom и соответствующему агентству общественного вещания данных о просматриваемых материалах верхнего уровня о контенте, созданном вещательными компаниями, может быть коммерчески конфиденциальным. Стриминговые сервисы являются важным «вторым окном» для контента СОВ, но без данных о зрителях трудно полностью оценить охват СОВ.(Пункт 88)

18. Мы рекомендуем Правительству ввести два конкретных требования в отношении контента PSB , размещенного на других потоковых сервисах, в соответствии с законодательством о новых медиа. Во-первых, контент PSB должен быть четко обозначен как таковой, а иметь логотип PSB, из которого был создан контент . Во-вторых, стриминговые сервисы должны предоставлять данных о просмотре верхней строки – по крайней мере, зрителей – для контента PSB, который они размещают на Ofcom, и соответствующих PSB, чтобы обеспечить полный анализ охвата PSB, и аудиовизуальный ландшафт в целом. (пункт 89)

19. Мы обеспокоены тем, что весь потенциал подразделения цифровых рынков не реализуется в рамках его нынешних предлагаемых полномочий. Мы рекомендуем, чтобы правительство расширило сферу компетенции Отдела цифровых рынков, чтобы рассмотреть вопрос о том, дает ли доминирование онлайн-платформ им чрезмерное влияние на способность потребителей получать доступ к общедоступному вещательному контенту в Интернете и посредством потоковой передачи. (пункт 95)

20. Если установленный медиа-бренд предоставляет программы, неправильно делать предположение по умолчанию, что вклад YouTube в то, что зритель решает посмотреть эту программу, и, следовательно, его доля в цепочке создания стоимости, такая же, как и в случае, когда контент является пользователем. -сгенерированный. Что касается новостей, то такой подход, если ему позволят продолжить, со временем подорвет способность ОВО, таких как ITV и Channel 4, фактически производить качественное, хорошо изученное новостное освещение. Подразделение цифровых рынков должно также рассмотреть вопрос о том, предлагают ли стандартные условия распределения доходов , которые используются некоторыми платформами, справедливую прибыль для рекламных роликов в обмен на их контент. (пункт 96)

21. Нельзя допустить, чтобы из-за этого нежелания британские ОВО занимали менее заметное место в аппаратном обеспечении, чем поставщики коммерческого контента, не относящиеся к СОВ, которые приобретают известность. Нет смысла требовать режим PSB, если он может быть скрыт от глаз действиями поставщиков оборудования. Мы рекомендуем правительству довести до сведения международных производителей информацию о важности важности контента PSB для Великобритании и о своем желании рассмотреть вопрос о регулировании, если популярность PSB будет подорвана конструкцией оборудования. (пункт 100)

22. Результаты, полученные Комиссией по конкуренции в 2009 г., в настоящее время устарели, учитывая скорость изменения рынка и доминирование глобальных потоковых сервисов, и ОВО следует разрешить сотрудничать, чтобы у них было больше шансов конкурировать в Сейчас переполнен рынок видео по запросу. Хотя мы надеемся, что в течение следующих 18 месяцев закон о выдаче прав будет распространен на онлайн-платформы, опыт правительства в решении проблем, связанных с экологией СМИ, не вселяет в нас уверенности, поэтому ОВО должны предпринять шаги, чтобы максимизировать свои собственные переговорные позиции и привлечь аудитории в этот цифровой век. Вместо того, чтобы ждать правительства, мы рекомендуем, чтобы ОВО помогли себе сами, изучив варианты сотрудничества на единой платформе видео по запросу , и Ofcom должен поддержать ОВО в в этом стремлении. Мы призываем органы по вопросам конкурентной политики пояснить, что, учитывая эволюцию вещательного ландшафта, нет автоматических возражений против такого сотрудничества на основании рыночного доминирования . (пункт 101)

23. Отсутствие данных о персонале, собираемых и передаваемых потоковыми сервисами в Великобритании, вызывает большую озабоченность. Правительство должно гарантировать , что регулирующие органы имеют доступ к основным данным, в строке с данными, предоставляемыми традиционными вещательными компаниями, чтобы обеспечить точный анализ разнообразия и равных возможностей в отрасли. Мы рекомендуем , чтобы требование о предоставлении данных, в том числе с разбивкой по полу, расе или этнической принадлежности, инвалидности, возрасту, сексуальной ориентации, религии или убеждениям и социально-экономическому положению, было включено в новых первичных законодательство, которое мы призвали заменить Закон о связи 2003 года. (пункт 103)

24. PSB должны подавать пример. Существующие пробелы в данных о занятости, предоставляемых Ofcom, вызывают серьезную озабоченность. Мы рекомендуем Ofcom наложить минимальные обязательства на ОВО с точки зрения данных о занятости , которые они предоставляют, чтобы сократить отраслевых пробелов в данных, которые существуют в настоящее время. Ofcom следует привлекать к ответственности ОВО, если они не соответствуют минимальным требованиям . (пункт 104)

25. Мы обеспокоены тем, что без мониторинга невозможно определить, справедливо ли представлены трансгендеры на рабочем месте. Хотя не должно быть требования к кому-либо заявлять своему работодателю, что они являются трансгендерами, мы призываем правительство сотрудничать с Ofcom и вещательными компаниями для расширения разнообразия форм мониторинга, чтобы включить возможность для людей заявить , что они трансгендеры, если они захотят.Это требование также должно быть распространено на потоковые сервисы, чтобы привести данные , которые они собирают, в соответствие с данными, собранными вещательными компаниями . (пункт 105)

26. Нам трудно принять оправдание, что разнообразие съемочной группы находится вне контроля комиссаров и вещателей. Нам приятно слышать, что отечественные вещатели отдают приоритет разнообразию в производстве, и мы не считаем, что такие влиятельные уполномоченные, как Amazon, не могут настаивать на разнообразии в производственных командах.(Пункт 108)

27. Разнообразие в отрасли за последние годы улучшилось – например, улучшился гендерный баланс, – но прогресс по-прежнему остается слишком медленным. На устранение неравенства в отрасли уходит слишком много времени, и необходимо сделать гораздо больше для увеличения разнообразия, особенно людей с ограниченными возможностями и представительства BAME, особенно на высших уровнях управления. PSB и стриминговые сервисы нуждаются в , чтобы работать лучше, и в ответе на этот отчет Ofcom и правительство должны объяснить, как они намерены гарантировать, что улучшения будут производиться намного быстрее. (пункт 112)

28. Мы признаем важность регионального разнообразия при вводе в эксплуатацию и приветствуем предыдущее решение Ofcom об усилении критериев для регионального и национального производства. Мы рекомендуем , чтобы правила Ofcom для регионального и национального производства пересматривались ежегодно, чтобы гарантировать, что ввод в эксплуатацию подлинного регионального контента продолжает улучшаться. (пункт 115)

29.Увеличение разнообразия в ролях ввода в эксплуатацию и производства имеет решающее значение для улучшения разнообразия экранов. Мы рекомендуем, чтобы Ofcom ввело требования к количеству BAME, LGBTQ + и инвалидов, занимающих вводные и руководящие должности, чтобы улучшить подлинное экранное представление разнообразных сообществ Великобритании. (пункт 118)

30. Мы приветствуем недавнее продвижение S4C в Уэльсе на 104-й канал Virgin Media, но мы обеспокоены отсутствием возможности обнаружения контента на языках меньшинств на этом все более цифровом рынке.Роль, которую играют вещательные компании на языках меньшинств, является важной и подтверждает необходимость обновленного законодательства о выдаче информации, чтобы защитить возможность их контента быть найденным зрителями. Мы рекомендуем , чтобы правительство в рамках работы по обновлению законодательства о СМИ обеспечило достаточное внимание контенту на языках меньшинств на соответствующих платформах . (пункт 123)

Фактор транскрипции Arabidopsis thaliana AtMYB102 защищает от насекомого-травоядного Pieris rapae – Research @ WUR

TY – JOUR

T1 – Фактор транскрипции Arabidopsis thaliana AtMYB102 действует в защите от насекомого-травоядного Pieris rapae

de 9000 , М.

AU – Denekamp, M.

AU – Dicke, M.

AU – Vuylsteke, M.

AU – van Loon, L.C.

AU – Smeekens, S.C.M.

AU – Pieterse, C.M.J.

N1 – 07-2937

PY – 2006

Y1 – 2006

N2 – В Arabidopsis thaliana семейство факторов транскрипции R2R3-MYB состоит из более чем 100 членов и участвует во многих биологических процессах, таких как развитие растений, метаболизм , старение и защита. Было показано, что ген фактора транскрипции R2R3-MYB AtMYB102 реагирует на солевой стресс, ABA, JA и ранения, что позволяет предположить, что AtMYB102 играет роль в реакции растений на обезвоживание после ранения.Здесь мы изучали роль AtMYB102 в ответе A. thaliana на питание личинками белокочанной бабочки Pieris rapae. Репортерные линии A. thaliana, экспрессирующие GUS под контролем промотора AtMYB102, показали, что AtMYB102 экспрессируется локально в местах питания поврежденных травоядными животными листьев, но не системно в неинфицированных частях растения. Нокаутные мутантные растения со вставкой транспозона AtMYB102 (myb102) обеспечивали более быстрое развитие гусениц P. rapae, чем растения Col-0 дикого типа.Более того, количество гусениц, которые развились в куколки в течение 14 дней, было значительно выше на myb102, что указывает на то, что у растений дикого типа AtMYB102 вносит вклад в базальную устойчивость к питанию P. rapae. Анализ микроматрицы растений Col-0 и AtMYB102 дикого типа, сверхэкспрессирующих 35S :: MYB102, выявил большое количество дифференциально экспрессируемых генов. Помимо нескольких генов, связанных с защитой, относительно большое количество генов связано с модификациями клеточной стенки.

AB – В Arabidopsis thaliana семейство факторов транскрипции R2R3-MYB состоит из более чем 100 членов и участвует во многих биологических процессах, таких как развитие растений, метаболизм, старение и защита.Было показано, что ген фактора транскрипции R2R3-MYB AtMYB102 реагирует на солевой стресс, ABA, JA и ранения, что позволяет предположить, что AtMYB102 играет роль в реакции растений на обезвоживание после ранения. Здесь мы изучали роль AtMYB102 в ответе A. thaliana на питание личинками белокочанной бабочки Pieris rapae. Репортерные линии A. thaliana, экспрессирующие GUS под контролем промотора AtMYB102, показали, что AtMYB102 экспрессируется локально в местах питания поврежденных травоядными животными листьев, но не системно в неинфицированных частях растения.Нокаутные мутантные растения со вставкой транспозона AtMYB102 (myb102) обеспечивали более быстрое развитие гусениц P.